Introducción a la micropipeta
La micropipeta es un instrumento importante utilizado para medir pequeños volúmenes de líquido con precisión. Esta herramienta de investigación, que puede encontrarse en numerosos laboratorios de investigación en todo el mundo, viene en varios formas y tamaños. Sin embargo, a pesar de la variación entre micropipettors, todos ellos funcionan de forma similar para medir con precisión las cantidades de microlitros de líquido. Micropipettors se utilizan con puntas desechables, que, como micropipettors, vienen en una gama de tamaños.
Micropipettors todos comparten los mismos componentes básicos para aspirar y dispensar líquidos. El émbolo se encuentra en la parte superior de la pipeta y se utiliza para elaborar o expulsión de líquido dependiendo de la posición que es presionado o liberado.
El dial de ajuste de volumen se utiliza para cambiar al volumen de líquido que se transferirá.
La pantalla de lectura de volumen se lee de arriba a abajo. Dependiendo de la micropipeta utilizada los números reflejan diferentes órdenes de magnitud para la medición de su volumen. Aquí puede ver una medición de 370 microlitros.
Puntas desechables se cargan en la parte inferior de la micropipeta.
Botón de expulsión de la punta y punta extraer trabajo de eje para puntas de pipeta de expulsión cuando tienen que ser desechados.
La familia de micropipeta incluye a varios miembros de diferentes tamaños que un rango preciso de volúmenes de transferencia.
Aquí puede ver la alineación familiar según los rangos de volumen que puede transferir cada uno de ellos. Por ejemplo, Papa P-1000 ofrece entre μl de 200-1000, mientras el bebé del grupo, P-2, transferencias entre 0.2-2 μl.
Cada uno de los miembros de la familia es reconocible por un número en la parte superior del émbolo, y por el color, que deja en claro quiénes son y cuánto volumen puede cómodamente transfieren.
En ocasiones, otros parientes de la micropipeta se mostrarán para un experimento, como tío P5000 P100 tía y primo de P10. Juntos, pueden ayudar esta familia extendida pasar líquido de 0.2-5000 μL en el volumen.
Para asegurar a una transferencia precisa y exacta de líquido, diferentes tamaños de puntas de pipetas, a menudo, pero no siempre, están codificados por color para facilitar su reconocimiento y se utilizan para diferentes tamaños de pipetas. Con respecto a volumen transferido, puntas micropipeta blanco de transferencia típicamente entre 0.5-2.5 μl, puntas amarillas son para 1-200 μl y puntas azules de 200 a 1000 μl.
Cuando se utiliza una micropipeta, primero escoge el instrumento con el rango apropiado para el volumen que desea transferir. Correcta elección de la pipeta puede significar la diferencia entre un experimento exitoso o fallido.
Para empezar, ajuste el control en el volumen deseado. Para aumentar el volumen de aspiración, gire el dial hacia la izquierda, pasando el volumen deseado por la tercera vuelta y luego disminuir lentamente hasta la marca final. Para disminuir el volumen, gire el dial hacia la derecha.
Tenga en cuenta que estos dígitos en la lectura de volumen tienen diferentes órdenes de magnitud dependiendo de la micropipeta. Por ejemplo, a la izquierda, vemos el P1000, 370 μl de la lectura. Hay un cero en miles lugar, 3 en los cientos de lugar y un 7 en las decenas del lugar. A la derecha es la P200, mostrando 159 μl con un 1 en las centenas el lugar, un 5 en las decenas lugar y un 9 en el lugar.
Una vez ajustado el volumen, seleccionar una punta.
Ahora, mantenga la micropipeta en posición vertical con la parte estrecha del cuerpo en la palma de su mano y la proyección sobre el dedo índice,
Ejerciendo una ligera presión para presionar el émbolo aproximadamente a mitad de camino la primera parada, o cuando usted comienza a sentirse más resistencia.
Esta acción desplaza el aire de la punta de la pipeta.
Mantener el émbolo presionado, sumerja la punta entre 1-3 mm en la muestra. Liberar suavemente el émbolo en la posición de reposo, esperar un segundo para que el líquido se desplace hacia la punta y luego extraiga la pipeta de la muestra.
Cuando el émbolo se suelta en la posición de reposo, el líquido se dibuja en el vacío creado por el aire desplazado.
Inspeccione la punta para confirmar la cantidad deseada de líquido fue elaborada y que la punta no contiene burbujas de aire.
Al transferir la muestra en el recipiente deseado, sostenga la micropipeta en un ángulo de 10-45° contra el interior pared de los vasos receptores. Esto evitará que las burbujas formando en la punta. Para expulsar el líquido Presione el émbolo suavemente hasta la parada 1 sin problemas, para comenzar a dispensar el líquido y luego, aplicando una resistencia más fuerte, presione el émbolo hasta el segundo tope para "soplar" la última gota de líquido desde la punta.
Retire completamente la punta de la nave y luego suelte el émbolo a la posición de reposo.
Ahora utilice el botón de expulsión para descartar cuidadosamente la punta de la pipeta en el receptáculo apropiado. Preste atención a lo que está haciendo, porque consejos expulsados pueden actuar como proyectiles y potencialmente pueden dañar a tus compañeros compañeros de laboratorio.
Para mantener funcionando bien micropipettors y preservar el mecanismo de ajuste de volumen interno, nunca gire el volumen por encima o por debajo del rango específico de la micropipeta. Usted puede romper el instrumento.
Para evitar la contaminación cruzada entre muestras, cambiar la punta después de cada transferencia de volumen.
Consistencia del operador es importante cuando se trabaja con micropipetters. Una presión de émbolo suave dará óptimos resultados experimentales. Finalmente, recuerda que para mantener su micropipettors en mejores condiciones, guarde siempre los instrumentos en posición vertical cuando no no estén en uso.
Ahora que hemos cubierto la operación básica y principios de la utilización de micropipettors, vamos a discutir algunas aplicaciones comunes de laboratorio para microvolume transferencias, así como las variaciones de este instrumento.
Micropipettors se utilizan con frecuencia para la transferencia de suspensiones celulares a las placas de cultivo para una variedad de experimentos.
En conjunto con consejos especializados, micropipettors puede utilizarse para cargar cuidadosamente las muestras para técnicas analíticas, como la electroforesis en gel de DNA.
Micropipettors puede utilizarse también para mechanichally la ruptura del tejido, para obtener suspensiones de la célula.
Variantes de la micropipeta, que funcionan basado en desplazamiento de aire, pueden también encontrarse en el laboratorio.
Pipetas de repetición permiten pipetear serie de volúmenes más pequeños después de una aspiración inicial de un mayor volumen de solución. Las pipetas son muy útiles para transferir el mismo volumen de muestra a un gran número de recipientes.
Pipetas multicanales se utilizan generalmente para transferir volúmenes en el rango 20-200 μl y son útiles para cargar filas enteras de 96 placas bien.
Sólo ha visto introducción de Zeus a la micropipettors.
En este video repasamos: una micropipeta de qué es y cómo funciona, cómo aspirar y dispensar una volumen líquido de muestra, algunas medidas de seguridad y diferentes aplicaciones de su micropipettors. Gracias por ver y recuerda escoger la pipeta adecuada para sus experimentos.
La micropipeta es un instrumento común del laboratorio utilizado para la transferencia de microvolúmenes de soluciones líquidas. Micropipettors vienen…
La micropipeta es un instrumento importante utilizado para medir pequeños volúmenes de líquido con precisión. Esta herramienta de investigación, que puede encontrarse en numerosos laboratorios de investigación en todo el mundo, viene en varios formas y tamaños. Sin embargo, a pesar de la variación entre micropipettors, todos ellos funcionan de forma similar para medir con precisión las cantidades de microlitros de líquido. Micropipettors se utilizan con puntas desechables, que, como micropipettors, vienen en una gama de tamaños.
Micropipettors todos comparten los mismos componentes básicos para aspirar y dispensar líquidos. El émbolo se encuentra en la parte superior de la pipeta y se utiliza para elaborar o expulsión de líquido dependiendo de la posición que es presionado o liberado.
El dial de ajuste de volumen se utiliza para cambiar al volumen de líquido que se transferirá.
La pantalla de lectura de volumen se lee de arriba a abajo. Dependiendo de la micropipeta utilizada los números reflejan diferentes órdenes de magnitud para la medición de su volumen. Aquí puede ver una medición de 370 microlitros.
Puntas desechables se cargan en la parte inferior de la micropipeta.
Botón de expulsión de la punta y punta extraer trabajo de eje para puntas de pipeta de expulsión cuando tienen que ser desechados.
La familia de micropipeta incluye a varios miembros de diferentes tamaños que un rango preciso de volúmenes de transferencia.
Aquí puede ver la alineación familiar según los rangos de volumen que puede transferir cada uno de ellos. Por ejemplo, Papa P-1000 ofrece entre μl de 200-1000, mientras el bebé del grupo, P-2, transferencias entre 0.2-2 μl.
Cada uno de los miembros de la familia es reconocible por un número en la parte superior del émbolo, y por el color, que deja en claro quiénes son y cuánto volumen puede cómodamente transfieren.
En ocasiones, otros parientes de la micropipeta se mostrarán para un experimento, como tío P5000 P100 tía y primo de P10. Juntos, pueden ayudar esta familia extendida pasar líquido de 0.2-5000 μL en el volumen.
Para asegurar a una transferencia precisa y exacta de líquido, diferentes tamaños de puntas de pipetas, a menudo, pero no siempre, están codificados por color para facilitar su reconocimiento y se utilizan para diferentes tamaños de pipetas. Con respecto a volumen transferido, puntas micropipeta blanco de transferencia típicamente entre 0.5-2.5 μl, puntas amarillas son para 1-200 μl y puntas azules de 200 a 1000 μl.
Cuando se utiliza una micropipeta, primero escoge el instrumento con el rango apropiado para el volumen que desea transferir. Correcta elección de la pipeta puede significar la diferencia entre un experimento exitoso o fallido.
Para empezar, ajuste el control en el volumen deseado. Para aumentar el volumen de aspiración, gire el dial hacia la izquierda, pasando el volumen deseado por la tercera vuelta y luego disminuir lentamente hasta la marca final. Para disminuir el volumen, gire el dial hacia la derecha.
Tenga en cuenta que estos dígitos en la lectura de volumen tienen diferentes órdenes de magnitud dependiendo de la micropipeta. Por ejemplo, a la izquierda, vemos el P1000, 370 μl de la lectura. Hay un cero en miles lugar, 3 en los cientos de lugar y un 7 en las decenas del lugar. A la derecha es la P200, mostrando 159 μl con un 1 en las centenas el lugar, un 5 en las decenas lugar y un 9 en el lugar.
Una vez ajustado el volumen, seleccionar una punta.
Ahora, mantenga la micropipeta en posición vertical con la parte estrecha del cuerpo en la palma de su mano y la proyección sobre el dedo índice,
Ejerciendo una ligera presión para presionar el émbolo aproximadamente a mitad de camino la primera parada, o cuando usted comienza a sentirse más resistencia.
Esta acción desplaza el aire de la punta de la pipeta.
Mantener el émbolo presionado, sumerja la punta entre 1-3 mm en la muestra. Liberar suavemente el émbolo en la posición de reposo, esperar un segundo para que el líquido se desplace hacia la punta y luego extraiga la pipeta de la muestra.
Cuando el émbolo se suelta en la posición de reposo, el líquido se dibuja en el vacío creado por el aire desplazado.
Inspeccione la punta para confirmar la cantidad deseada de líquido fue elaborada y que la punta no contiene burbujas de aire.
Al transferir la muestra en el recipiente deseado, sostenga la micropipeta en un ángulo de 10-45° contra el interior pared de los vasos receptores. Esto evitará que las burbujas formando en la punta. Para expulsar el líquido Presione el émbolo suavemente hasta la parada 1 sin problemas, para comenzar a dispensar el líquido y luego, aplicando una resistencia más fuerte, presione el émbolo hasta el segundo tope para "soplar" la última gota de líquido desde la punta.
Retire completamente la punta de la nave y luego suelte el émbolo a la posición de reposo.
Ahora utilice el botón de expulsión para descartar cuidadosamente la punta de la pipeta en el receptáculo apropiado. Preste atención a lo que está haciendo, porque consejos expulsados pueden actuar como proyectiles y potencialmente pueden dañar a tus compañeros compañeros de laboratorio.
Para mantener funcionando bien micropipettors y preservar el mecanismo de ajuste de volumen interno, nunca gire el volumen por encima o por debajo del rango específico de la micropipeta. Usted puede romper el instrumento.
Para evitar la contaminación cruzada entre muestras, cambiar la punta después de cada transferencia de volumen.
Consistencia del operador es importante cuando se trabaja con micropipetters. Una presión de émbolo suave dará óptimos resultados experimentales. Finalmente, recuerda que para mantener su micropipettors en mejores condiciones, guarde siempre los instrumentos en posición vertical cuando no no estén en uso.
Ahora que hemos cubierto la operación básica y principios de la utilización de micropipettors, vamos a discutir algunas aplicaciones comunes de laboratorio para microvolume transferencias, así como las variaciones de este instrumento.
Micropipettors se utilizan con frecuencia para la transferencia de suspensiones celulares a las placas de cultivo para una variedad de experimentos.
En conjunto con consejos especializados, micropipettors puede utilizarse para cargar cuidadosamente las muestras para técnicas analíticas, como la electroforesis en gel de DNA.
Micropipettors puede utilizarse también para mechanichally la ruptura del tejido, para obtener suspensiones de la célula.
Variantes de la micropipeta, que funcionan basado en desplazamiento de aire, pueden también encontrarse en el laboratorio.
Pipetas de repetición permiten pipetear serie de volúmenes más pequeños después de una aspiración inicial de un mayor volumen de solución. Las pipetas son muy útiles para transferir el mismo volumen de muestra a un gran número de recipientes.
Pipetas multicanales se utilizan generalmente para transferir volúmenes en el rango 20-200 μl y son útiles para cargar filas enteras de 96 placas bien.
Sólo ha visto introducción de Zeus a la micropipettors.
En este video repasamos: una micropipeta de qué es y cómo funciona, cómo aspirar y dispensar una volumen líquido de muestra, algunas medidas de seguridad y diferentes aplicaciones de su micropipettors. Gracias por ver y recuerda escoger la pipeta adecuada para sus experimentos.
Iniciar sesión o para acceder al contenido completo. Obtenga más información sobre el acceso de su institución al contenido de JoVE aquí
La micropipeta es un instrumento importante utilizado para medir pequeños volúmenes de líquido con precisión. Esta herramienta de investigación, que puede encontrarse en numerosos laboratorios de investigación en todo el mundo, viene en varios formas y tamaños. Sin embargo, a pesar de la variación entre micropipettors, todos ellos funcionan de forma similar para medir con precisión las cantidades de microlitros de líquido. Micropipettors se utilizan con puntas desechables, que, como micropipettors, vienen en una gama de tamaños.
Micropipettors todos comparten los mismos componentes básicos para aspirar y dispensar líquidos. El émbolo se encuentra en la parte superior de la pipeta y se utiliza para elaborar o expulsión de líquido dependiendo de la posición que es presionado o liberado.
El dial de ajuste de volumen se utiliza para cambiar al volumen de líquido que se transferirá.
La pantalla de lectura de volumen se lee de arriba a abajo. Dependiendo de la micropipeta utilizada los números reflejan diferentes órdenes de magnitud para la medición de su volumen. Aquí puede ver una medición de 370 microlitros.
Puntas desechables se cargan en la parte inferior de la micropipeta.
Botón de expulsión de la punta y punta extraer trabajo de eje para puntas de pipeta de expulsión cuando tienen que ser desechados.
La familia de micropipeta incluye a varios miembros de diferentes tamaños que un rango preciso de volúmenes de transferencia.
Aquí puede ver la alineación familiar según los rangos de volumen que puede transferir cada uno de ellos. Por ejemplo, Papa P-1000 ofrece entre μl de 200-1000, mientras el bebé del grupo, P-2, transferencias entre 0.2-2 μl.
Cada uno de los miembros de la familia es reconocible por un número en la parte superior del émbolo, y por el color, que deja en claro quiénes son y cuánto volumen puede cómodamente transfieren.
En ocasiones, otros parientes de la micropipeta se mostrarán para un experimento, como tío P5000 P100 tía y primo de P10. Juntos, pueden ayudar esta familia extendida pasar líquido de 0.2-5000 μL en el volumen.
Para asegurar a una transferencia precisa y exacta de líquido, diferentes tamaños de puntas de pipetas, a menudo, pero no siempre, están codificados por color para facilitar su reconocimiento y se utilizan para diferentes tamaños de pipetas. Con respecto a volumen transferido, puntas micropipeta blanco de transferencia típicamente entre 0.5-2.5 μl, puntas amarillas son para 1-200 μl y puntas azules de 200 a 1000 μl.
Cuando se utiliza una micropipeta, primero escoge el instrumento con el rango apropiado para el volumen que desea transferir. Correcta elección de la pipeta puede significar la diferencia entre un experimento exitoso o fallido.
Para empezar, ajuste el control en el volumen deseado. Para aumentar el volumen de aspiración, gire el dial hacia la izquierda, pasando el volumen deseado por la tercera vuelta y luego disminuir lentamente hasta la marca final. Para disminuir el volumen, gire el dial hacia la derecha.
Tenga en cuenta que estos dígitos en la lectura de volumen tienen diferentes órdenes de magnitud dependiendo de la micropipeta. Por ejemplo, a la izquierda, vemos el P1000, 370 μl de la lectura. Hay un cero en miles lugar, 3 en los cientos de lugar y un 7 en las decenas del lugar. A la derecha es la P200, mostrando 159 μl con un 1 en las centenas el lugar, un 5 en las decenas lugar y un 9 en el lugar.
Una vez ajustado el volumen, seleccionar una punta.
Ahora, mantenga la micropipeta en posición vertical con la parte estrecha del cuerpo en la palma de su mano y la proyección sobre el dedo índice,
Ejerciendo una ligera presión para presionar el émbolo aproximadamente a mitad de camino la primera parada, o cuando usted comienza a sentirse más resistencia.
Esta acción desplaza el aire de la punta de la pipeta.
Mantener el émbolo presionado, sumerja la punta entre 1-3 mm en la muestra. Liberar suavemente el émbolo en la posición de reposo, esperar un segundo para que el líquido se desplace hacia la punta y luego extraiga la pipeta de la muestra.
Cuando el émbolo se suelta en la posición de reposo, el líquido se dibuja en el vacío creado por el aire desplazado.
Inspeccione la punta para confirmar la cantidad deseada de líquido fue elaborada y que la punta no contiene burbujas de aire.
Al transferir la muestra en el recipiente deseado, sostenga la micropipeta en un ángulo de 10-45° contra el interior pared de los vasos receptores. Esto evitará que las burbujas formando en la punta. Para expulsar el líquido Presione el émbolo suavemente hasta la parada 1 sin problemas, para comenzar a dispensar el líquido y luego, aplicando una resistencia más fuerte, presione el émbolo hasta el segundo tope para "soplar" la última gota de líquido desde la punta.
Retire completamente la punta de la nave y luego suelte el émbolo a la posición de reposo.
Ahora utilice el botón de expulsión para descartar cuidadosamente la punta de la pipeta en el receptáculo apropiado. Preste atención a lo que está haciendo, porque consejos expulsados pueden actuar como proyectiles y potencialmente pueden dañar a tus compañeros compañeros de laboratorio.
Para mantener funcionando bien micropipettors y preservar el mecanismo de ajuste de volumen interno, nunca gire el volumen por encima o por debajo del rango específico de la micropipeta. Usted puede romper el instrumento.
Para evitar la contaminación cruzada entre muestras, cambiar la punta después de cada transferencia de volumen.
Consistencia del operador es importante cuando se trabaja con micropipetters. Una presión de émbolo suave dará óptimos resultados experimentales. Finalmente, recuerda que para mantener su micropipettors en mejores condiciones, guarde siempre los instrumentos en posición vertical cuando no no estén en uso.
Ahora que hemos cubierto la operación básica y principios de la utilización de micropipettors, vamos a discutir algunas aplicaciones comunes de laboratorio para microvolume transferencias, así como las variaciones de este instrumento.
Micropipettors se utilizan con frecuencia para la transferencia de suspensiones celulares a las placas de cultivo para una variedad de experimentos.
En conjunto con consejos especializados, micropipettors puede utilizarse para cargar cuidadosamente las muestras para técnicas analíticas, como la electroforesis en gel de DNA.
Micropipettors puede utilizarse también para mechanichally la ruptura del tejido, para obtener suspensiones de la célula.
Variantes de la micropipeta, que funcionan basado en desplazamiento de aire, pueden también encontrarse en el laboratorio.
Pipetas de repetición permiten pipetear serie de volúmenes más pequeños después de una aspiración inicial de un mayor volumen de solución. Las pipetas son muy útiles para transferir el mismo volumen de muestra a un gran número de recipientes.
Pipetas multicanales se utilizan generalmente para transferir volúmenes en el rango 20-200 μl y son útiles para cargar filas enteras de 96 placas bien.
Sólo ha visto introducción de Zeus a la micropipettors.
En este video repasamos: una micropipeta de qué es y cómo funciona, cómo aspirar y dispensar una volumen líquido de muestra, algunas medidas de seguridad y diferentes aplicaciones de su micropipettors. Gracias por ver y recuerda escoger la pipeta adecuada para sus experimentos.
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: What are the main components of a micropipettor?
A micropipettor has several key components: the plunger at the top for drawing up or expelling liquid, a volume adjustment dial to set the desired volume, a volume readout display showing the measurement, disposable tips loaded at the bottom, and a tip eject button with shaft for removing tips. These components work together to enable precise microvolume transfers.
Q2: How does a micropipettor draw liquid into the tip?
A micropipettor works by air displacement. When you depress the plunger halfway to the first stop, it displaces air from the pipette tip. As you release the plunger back to rest position, a vacuum forms, drawing the liquid into the tip. Wait one second after releasing to allow the liquid to fully enter before removing the pipette from the sample.
Q3: What volume ranges do different micropipettor sizes handle?
Micropipettors come in various sizes with different volume ranges. The P-2 transfers 0.2-2 microliters, the P-1000 delivers 200-1000 microliters, and the extended family includes models like the P-5000 that transfers up to 5000 microliters. Each micropipettor is color-coded and numbered for easy identification of its specific volume range.
Q4: How should you hold and position a micropipettor during liquid transfer?
Hold the micropipettor upright with the narrow body in your palm and the overhang over your index finger. When aspirating, immerse the tip 1-3 millimeters into the sample. When dispensing into a vessel, hold the micropipettor at a 10-45 degree angle against the inside wall to prevent bubble formation. This positioning ensures accurate and clean liquid transfers.
Q5: What are common laboratory applications for micropipettors?
Micropipettors are frequently used for transferring cell suspensions to culture plates for various experiments and loading samples for analytical techniques like DNA gel electrophoresis. They can also mechanically disrupt tissue to obtain single cell suspensions. Variants like repeater pipettes and multichannel pipettes extend their utility for serial pipetting and loading entire rows of 96-well plates.
Q6: Why is choosing the correct micropipettor size important?
Selecting the appropriate micropipettor for your volume range is critical because using the wrong size can lead to inaccurate measurements and failed experiments. Each micropipettor is designed to work optimally within its specific volume range. Correct choice ensures precise liquid transfer and reliable experimental results.
Q7: What maintenance practices keep micropipettors in good working condition?
Always store micropipettors upright when not in use to preserve the internal volume adjustment mechanism. Never turn the volume dial above or below the instrument's specific range, as this can damage the mechanism. Change tips after each volume transfer to avoid cross-contamination between samples. Maintain smooth, consistent plunger pressure for optimal performance.
Capítulos en este video
0:00
Overview
0:42
Components of a Micropipettor
1:40
Types of Micropipettors and Tips
3:20
Basic Micropipettor Operation
6:27
Helpful Hints
7:17
Applications
8:44
Summary