Question 1

¿Cuál es la diferencia entre el hielo húmedo y el hielo seco para la preservación de muestras?

Accepted Answer

El hielo húmedo es agua congelada con un punto de fusión de 0 °C que se vuelve líquida a temperatura ambiente, lo que lo hace ideal para la preservación a corto plazo de muestras y reactivos durante el trabajo de laboratorio o el transporte. El hielo seco es dióxido de carbono sólido con un punto de fusión de -78.5 °C que experimenta sublimación —transformándose directamente de sólido a gas sin fundirse—, lo que lo hace adecuado para especímenes biológicos que requieren temperaturas muy por debajo del punto de congelación.

Question 2

¿Por qué se utiliza nitrógeno líquido en lugar de hielo seco para ciertas muestras?

Accepted Answer

El nitrógeno líquido hierve a -196 °C a presión atmosférica, proporcionando temperaturas muy inferiores a las que pueden alcanzar los congeladores de laboratorio. Resulta esencial para el almacenamiento de especímenes biológicos que requieran temperaturas ultrabajas durante periodos prolongados. El nitrógeno líquido se almacena en un termo o matraz de vacío con una tapa holgada o una válvula de alivio para evitar la acumulación peligrosa de presión debida a la formación de gas.

Question 3

¿Qué temperatura deben mantener los refrigeradores y congeladores de laboratorio para los diferentes tipos de muestras?

Accepted Answer

Los refrigeradores de laboratorio mantienen una temperatura de 4 °C para el almacenamiento temporal de muestras sensibles a la congelación, como los medios de cultivo tisular y las placas de cultivo celular. Los congeladores oscilan entre -20 °C para ácidos nucleicos y enzimas de restricción, hasta -80 °C para el almacenamiento a largo plazo de tejidos y células congelados. Los congeladores criogénicos alcanzan los -196 °C para aquellas muestras que requieren las temperaturas más bajas tras la criopreservación.

Question 4

¿Cómo evita la congelación rápida el daño de las células biológicas durante la criopreservación?

Accepted Answer

La congelación instantánea consiste en sumergir rápidamente las muestras biológicas en nitrógeno líquido o en una mezcla de hielo seco y etanol, lo que evita la formación de cristales de hielo grandes que causarían la deshidratación y el daño celular. Este proceso de enfriamiento rápido, combinado con el uso de crioprotectores, minimiza la formación de cristales de hielo y la acumulación de la concentración de solutos que perjudican la viabilidad celular durante el almacenamiento a largo plazo a temperaturas bajo cero.

Question 5

¿Qué precauciones de seguridad deben seguirse al manipular hielo seco y nitrógeno líquido?

Accepted Answer

El hielo seco y el nitrógeno líquido están extremadamente fríos y pueden causar daños tisulares graves al entrar en contacto con la piel. Use siempre guantes criogénicos y bata de laboratorio, y utilice herramientas para manipular las muestras en lugar de las manos desnudas. Nunca almacene estos agentes refrigerantes en recipientes herméticos, ya que la acumulación de presión debida a la formación de gas puede provocar explosiones. Se requiere una capacitación adecuada por parte de miembros experimentados del laboratorio antes de su manipulación.

Question 6

¿Qué es la vitrificación y cómo mejora la criopreservación de células y tejidos?

Accepted Answer

La vitrificación transforma el líquido de las muestras biológicas en un sólido vítreo no cristalino mediante un enfriamiento rápido en presencia de crioprotectores específicos. Este método avanzado de criopreservación elimina por completo la formación de cristales de hielo, evitando el daño celular y la deshidratación que ocurren con los métodos de congelación convencionales, lo que lo hace ideal para preservar tejidos delicados como embriones de oveja.

Question 7

¿Por qué no se deben almacenar nunca alimentos ni bebidas en los refrigeradores y congeladores de laboratorio?

Accepted Answer

Los refrigeradores y congeladores de laboratorio pueden contener sustancias químicas tóxicas o materiales biológicos contaminados que podrían transferirse a alimentos o bebidas, generando graves riesgos para la salud. Estas unidades están diseñadas exclusivamente para el almacenamiento de muestras y reactivos con el fin de mantener la integridad experimental y evitar la contaminación cruzada. El almacenamiento de alimentos personales requiere de refrigeración independiente y designada fuera del laboratorio.

Regulación de la temperatura en el laboratorio: preservación de muestras usando frío - Cuestionario de evaluación