Mantenimiento de Drosophila

Exitosa investigación de Drosophila melanogaster bisagras sobre el correcto mantenimiento y manejo de este organismo modelo valioso. El siguiente video discutirá las medidas necesarias para proporcionar una nutrición adecuada, vivienda y el manejo de la mosca.

Aunque más conocida como la mosca de la fruta, Drosophila melanogaster subsiste realmente en los microorganismos, como levaduras, que crecen en la fruta de la fermentación. En el laboratorio, dieta de la mosca es modificado para fines prácticos. Existen varias recetas, y todas contienen los componentes esenciales: azúcar y levadura. La siguiente receta es de la Universidad de Indiana en Bloomington, famoso por su gran variedad de poblaciones de moscas. Consta de: agua estéril, levadura, harina de soja, harina de maíz amarillo, agar para la textura, el jarabe de maíz y ácido propiónico para inhibir el crecimiento de moho y bacterias. Estos ingredientes son combinados, calienta, agita y luego distribuidos en frascos con una bomba de carcasa plástica. Después están llenos, los frascos tapados con una tapa de algodón, envuelto y enfriados a 4 ° C. Una vez solidificado, comida es esterilizada mediante autoclave.

Ahora que hemos aprendido un poco sobre lo que comen moscas, echemos un vistazo al lugar donde viven y cómo son manejados.

Una variedad de contenedores se utilizan para moscas de la vivienda. Se utilizan para el mantenimiento de la mosca y óptimo contienen a 50-100 adultos. Botellas se utilizan para las culturas más grandes y moscas adultas de 300-600 de casa. Incubadoras controlan de medio ambiente y son capaces de realizar cientos de frascos y botellas. Las condiciones normales de almacenamiento para las moscas son 25 ° C y humedad relativa de 60-65%.

Cuando se trabaja con las moscas, es importante practicar el correcto etiquetado y documentación y mantener un ambiente limpio para mantener la integridad de las líneas de mosca y experimentos. Un envase debe cambió cuando aproximadamente la mitad de las pupas tienen eclosed o había dejado la cubierta pupal. Las cubiertas aparece claro.

FYI, el estadio pupal ocurre entre las etapas larvales y adultos y es cuando las larvas incuban y convierten en un adulto. Para identificar las cubiertas pupas claro, sostenga el recipiente de una fuente de luz e inspeccione la pupa.

Moscas son transferidas a frascos con medio fresco, un nombre de fantasia para alimentos mosca — mediante un proceso conocido como &quo; cambiando moscas. &quo; antes los bancos moscas, inspeccionar los medios de comunicación para la integridad. Moscas no pueden sobrevivir en alimentos agrietado con sequedad o contaminados con moho o bacterias.

Para voltear el moscas, en primer lugar, golpee el frasco mosca suavemente en la encimera para eliminar moscas de los lados del frasco. Entonces rápidamente Quite el tapón e invertir las moscas del viejo contenedor rápidamente en una nueva. Este proceso se realiza rápidamente, para prevenir moscas de escapar o ser aplastado por el tope y para evitar que vuela suelta el frasco durante los bancos.

Mientras que vuela los bancos es el método preferido para la transferencia a granel de Drosophila, anestesia es necesaria para la clasificación de moscas. Dos métodos de anestesia serán discutidos aquí: refrigeración y el uso de dióxido de carbono. Para que enfríe de moscas colocar la cultura en un congelador de-20 ° C durante 8-12 minutos. Entonces lugar vuela en un espacio de trabajo fría y plana para la selección. Moscas también pueden ser anestesiadas con frío por refrigeración directamente sobre una superficie congelada.

Dióxido de carbono es un método preferido para la anestesia porque no causa mortalidad aguda en las moscas o peligro para el investigador. El sistema de suministro de CO2 se compone: de un tanque de CO2; un tubo conectado a una aguja, para anestesiar a moscas en frascos y botellas; y un tubo conectado a una placa de CO2 para el análisis bajo el microscopio.

Para anestesiar a moscas, inserte la aguja de CO2 a través del tapón. Alternativamente, pulse el contenedor sobre una superficie, retire el tope y rápidamente invierta las moscas sobre una placa de CO2, manteniendo un sello cerrado hasta que las moscas son inmóviles. Usando un cepillo o fórceps, mueva suavemente las moscas en el nuevo contenedor.

Para descartar moscas no deseados, volcarlos en una morgue de mosca, que consiste en una botella grande llenado de isopropanol o etanol y aceite mineral con un embudo.

Ahora que hemos visto cómo moscas son mantenidas y manejados en el laboratorio, vamos a echar un vistazo a cómo se modifican condiciones de alimentación y vivienda para diversos experimentos.

Algunos experimentos requieren una vivienda alternativa para contener una mayor cantidad de moscas.

En este experimento, el investigador utiliza una jaula de la población de moscas para recoger una gran cantidad de embriones. Una jaula de la población de moscas es claro, caja de plástico capaz de sostener miles de moscas. El investigador lanza las moscas deseadas de varias botellas en la caja de la población de moscas, luego coloca las placas de agar en la jaula para recolectar embriones.

Algunos experimentos requieren la manipulación de la dieta de la mosca.

En este experimento, el investigador quiere observar la respuesta de escape de moscas transgénicas que expresan un canal iónico activado por la luz en las neuronas que regulan la respuesta de escape de las moscas. La dieta de Drosophila se complementa con &quo; all-trans-retinal, &quo; que es un cofactor para este canal y permite que funcione. Esto se hace por fusión de los alimentos y agregar el reactivo. La mosca entonces se expone a la luz azul que el canal se activa e induce la respuesta de escape, y mide el tiempo necesario para volar.

Una variedad de vivienda y de manipulación puede ser manipulada para la experimentación.

En este experimento, una elaborada &quo; torre de la energía &quo; es creado para estudiar los efectos del ejercicio en Drosophila. La torre de la energía es una máquina que continuamente sube y baja, tomando ventaja de la respuesta natural de la mosca para mover hacia arriba, contra la gravedad, que se conoce como &quo; negativa geotaxis. &quo;

El rendimiento de las moscas en la torre de la energía se mide con un ensayo rápido iterativo Geotaxis negativa o ensayo de anillo para el cortocircuito. Moscas en frascos vacíos se colocan delante de una cámara. Los frascos están roscados, y se registran las distancias subidas. Este experimento muestra que en comparación con un ejercicio de grupo de control tuvo un impacto positivo sobre la actividad en el tiempo.

Este video de JoVE ha cubierto el mantenimiento y cría de Drosophila melanogaster. Después de ver este video debe ser capaz de preparar comida mosca media, correctamente identificar la vivienda apropiada, flip moscas y realizar experimentos sencillos. ¡Gracias por ver!