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DOI: 10.3791/64889-v
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Aquí se proporciona un protocolo detallado para establecer organoides mamarios humanos a partir de resecciones de tumores de mama derivados de pacientes o tejido mamario normal. El protocolo proporciona instrucciones completas paso a paso para el cultivo, la congelación y la descongelación de organoides mamarios derivados de pacientes humanos.
Los organoides derivados de pacientes humanos son sistemas modelo tridimensionales in vitro que representan tanto la diversidad del paciente como la heterogeneidad celular de los tumores. Este protocolo y demostración en video proporcionan una guía detallada y práctica para establecer el tumor de mama derivado del paciente y los organoides normales. Los organoides de tumores de mama derivados de pacientes son nuevos modelos emocionantes, pero difíciles de establecer.
El protocolo integral que proporcionamos aquí debería ayudar a preparar a los investigadores que intentan desarrollar organoides mamarios y familiarizarlos con los desafíos esperados. Cada línea PDO derivada de un paciente diferente es única en morfología y tasa de crecimiento. A diferencia de dos sistemas de líneas celulares 2D, los organoides crecen mejor cuando se colocan en una alta densidad, lo que permite mejores interacciones intercelulares.
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