Respiration cellulaire

1. Quantification de la respiration à l’aide de microrespiromètres Expand<ul class="lab-items">
2. REMARQUE : Dans cette expérience, vous allez mesurer le taux de respiration cellulaire pour les graines en germination en mesurant le taux d’échange pour l’oxygène. Comme l’oxygène est consommé pour fournir de l’énergie, les graines en germination libèrent du dioxyde de carbone. Ce dioxyde de carbone est absorbé par le carbonate de potassium et donc la pression gazeuse globale du respiromètre sera réduite. HYPOTHÈSES : L’hypothèse expérimentale est que les graines en germination présenteront un taux de respiration plus élevé que les billes de verre témoins. De plus, à des températures plus élevées, le taux de respiration cellulaire dans les graines augmentera. Les hypothèses nulles sont que les billes de verre et les graines en germination présenteront un taux similaire de respiration cellulaire et que la température n’a aucun effet sur la respiration.
3. Pour configurer la commande, retirez d’abord le piston d’un microrespiromètre préparé et étiquetez-le avec un « CR » ou « CH » respectivement, selon qu’il s’agit de la température de la salle de contrôle ou d’un traitement chauffé.
4. Ajoutez les microbilles de verre à chacun des microrespiromètres jusqu’à la marque de 0,5 mL, et poussez le piston de la seringue jusqu’à la marque de 1 mL.
5. Placez 3 - 4 rondelles sur l’extrémité évasée de chaque microrespiromètre pour les alourdir pendant le bain d’eau. REMARQUE : Le microrespiromètre s’installera à l’extrémité du tube capillaire.
6. Placez les appareils de contrôle sur le côté.
7. Pour configurer les respiromètres expérimentaux en position assise, retirez le piston d’un microrespiromètre préparé et étiquetez-le avec « ER » ou « EH » respectivement, selon qu’il s’agit du traitement expérimental à température ambiante ou du traitement chauffé.
8. Mesurez 0,5 mL de graines en germination dans la seringue à tuberculine du microrespiromètre.
9. Ensuite, poussez la seringue jusqu’à la marque de 1 ml.
10. Placez 3 à 4 rondelles sur l’extrémité évasée de chaque microrespiromètre pour les alourdir pendant le bain-marie.
11. Pour utiliser les microrespiromètres, enfoncez soigneusement les microrespiromètres « CR » et « ER » dans le bain-marie à température ambiante. La seringue entière doit être immergée, mais les tubes capillaires doivent être entièrement exposés. Retirez l’eau du bain jusqu’à ce que cette position soit atteinte. Assurez-vous que le haut du tube capillaire est ouvert.
12. Effectuez la même procédure (étape 9) pour les microrespiromètres « CH » et « EH » afin de configurer le groupe expérimental à haute température.
13. Attendez 5 minutes avant de passer à autre chose pour permettre à la température dans les microrespiromètres de s’équilibrer avec le bain-marie.
14. Ajoutez une seule goutte de liquide de manomètre au sommet de chacun des quatre tubes capillaires qui scelle les chambres du microrespiromètre. REMARQUE : Si les chambres fonctionnent correctement, le liquide du manomètre sera aspiré dans la chambre capillaire.
15. Utilisez le piston placé dans le bain pour aspirer le liquide du manomètre dans le capillaire. Arrêtez-vous lorsque le liquide est à peu près à mi-chemin dans le tube capillaire. IMPORTANT : Les microrespiromètres ne doivent pas être dérangés une fois qu’ils sont ajoutés au bain. Ne cognez pas la table, n’insérez pas ou ne retirez rien du bain-marie une fois que les chambres ont été scellées et égalisées.
16. Marquez le bord inférieur du fluide du manomètre qui est le plus proche de la chambre. Cela représente le point temporel zéro.
17. Règle une minuterie pour qu’elle sonne dans 5 minutes.
18. Après 5 minutes, créez un nouveau repère à l’endroit où se trouve le liquide du manomètre sur chaque microrespiromètre. Répétez l’opération toutes les 5 minutes jusqu’à ce que 25 minutes se soient écoulées ou jusqu’à ce que le liquide du manomètre ait parcouru toute la longueur du tube capillaire.
19. Ensuite, retirez les respiromètres des bains-marie.
20. Mesurez la distance entre chacune des marques et notez-les dans le tableau 1 à côté du point temporel correct. Cliquez ici pour télécharger le Tableau 1
21. Pendant le nettoyage, les manomètres doivent être soit déconstruits pour être réutilisés, soit jetés à la poubelle.
22. Résultats Expand
    • Pour analyser les données que vous avez collectées, tracez d’abord les points de données avec l’axe des x comme temps et l’axe des y comme la distance parcourue par le manomètre, représentant la consommation d’oxygène.
    • Calculez la pente de chaque ligne à l’aide de cette équation.
    • Enregistrez ces valeurs pour chaque microrespiromètre dans le tableau 2. REMARQUE : Cette valeur représente la quantité de respiration cellulaire qui a eu lieu au cours de l’expérience. Cliquez ici pour télécharger le Tableau 2
    • Tracez les taux de respiration sous forme de graphique à barres.
    • Examinez les deux graphiques. Réfléchissez à la façon dont vos résultats correspondent aux hypothèses. Notez toute différence observée dans le taux respiratoire entre les billes de contrôle et les graines en germination. Déterminez si l’augmentation de la température a eu un effet sur le rythme respiratoire.

Dans cette expérience, vous allez mesurer le taux de respiration cellulaire des graines en germination en mesurant le taux d’échange d’oxygène. Comme l’oxygène est consommé pour fournir de l’énergie, les graines en germination libèrent du dioxyde de carbone. Ce dioxyde de carbone est absorbé par le carbonate de potassium et donc la pression gazeuse globale du respiromètre sera réduite.

L’hypothèse expérimentale est que les graines en germination présenteront un taux de respiration plus élevé que les billes de verre témoins. De plus, à des températures plus élevées, le taux de respiration cellulaire dans les graines augmentera. Les hypothèses nulles sont que les billes de verre et les graines en germination présenteront un taux similaire de respiration cellulaire et que la température n’a aucun effet sur la respiration.

Pour configurer la commande, retirez d’abord le piston d’un microrespiromètre préparé et étiquetez-le avec un CR ou un CH respectivement, selon qu’il s’agit de la température de la salle de contrôle ou d’un traitement chauffé. Ajoutez les microbilles de verre à chacun des microrespiromètres jusqu’à la marque de 0,5 millilitre, et poussez le piston dans la seringue jusqu’à la marque d’un millilitre. Placez trois à quatre rondelles sur l’extrémité évasée de chaque microrespiromètre pour les alourdir pendant qu’elles sont dans le bain-marie.

Le microrespiromètre s’installera à l’extrémité du tube capillaire. Enfin, mettez ces dispositifs de commande de côté pour le moment. Pour installer les respiromètres expérimentaux en position assise, retirez le piston d’un microrespiromètre préparé et étiquetez-le avec ER ou EH respectivement, selon qu’il s’agit de la température ambiante expérimentale ou d’un traitement chauffé.

Mesurez 0,5 millilitre de graines en germination dans la seringue à tuberculine du microrespiromètre. Ensuite, poussez la seringue jusqu’à ce qu’elle atteigne le repère d’un millilitre. Placez trois à quatre rondelles sur l’extrémité évasée de chaque microrespiromètre pour les alourdir pendant qu’elles sont dans le bain-marie.

Pour utiliser les microrespiromètres, appuyez soigneusement sur les microrespiromètres CR et ER dans le bain-marie à température ambiante. La seringue entière doit être immergée, mais les tubes capillaires doivent être entièrement exposés. Retirez l’eau du bain jusqu’à ce que cette position soit atteinte.

Assurez-vous que le haut du tube capillaire est ouvert. Effectuez la même procédure pour les microrespiromètres CH et EH afin de mettre en place le groupe expérimental à température plus élevée. Attendez cinq minutes avant de passer à autre chose pour permettre à la température dans les microrespiromètres de s’équilibrer avec le bain-marie.

Ajoutez une seule goutte de liquide de manomètre au sommet de chacun des quatre tubes capillaires qui scelle les chambres du microrespiromètre. Si les chambres fonctionnent correctement, le liquide du manomètre sera aspiré dans la chambre capillaire. Utilisez le piston placé dans le bain pour aspirer le liquide du manomètre dans le capillaire.

Arrêtez-vous lorsque le liquide est à peu près à mi-chemin dans le tube capillaire. Il est très important que les microrespiromètres ne soient pas perturbés une fois ajoutés au bain. Ne cognez pas la table, n’insérez pas ou ne retirez rien du bain-marie une fois que les chambres ont été scellées et égalisées.

Marquez toujours le bord inférieur du liquide du manomètre qui est le plus proche de la chambre. Cela représente le point temporel zéro. Réglez une minuterie pour qu’elle sonne dans cinq minutes.

Après cinq minutes, créez une nouvelle marque à l’endroit où se trouve le liquide du manomètre sur chaque microrespiromètre. Répétez l’opération toutes les cinq minutes jusqu’à ce que 25 minutes se soient écoulées ou jusqu’à ce que le liquide du manomètre ait parcouru toute la longueur du tube capillaire. Retirez ensuite les respiromètres des bains-marie.

Mesurez la distance entre chacune des marques et notez-les dans le tableau un à côté du bon point temporel. Lors du nettoyage, les manomètres doivent être soit démontés pour être réutilisés, soit jetés à la poubelle. Pour analyser les données que vous avez collectées, tracez d’abord les points de données du premier graphique avec l’axe des x comme temps et l’axe des y comme la distance parcourue par le manomètre, représentant la consommation d’oxygène.

Calculez la pente de chaque droite à l’aide de cette équation. Notez ces valeurs pour chaque microrespiromètre dans le tableau deux. Cette valeur représente la quantité de respiration cellulaire qui a eu lieu au cours de l’expérience.

Tracez les taux de respiration sous forme de graphique à barres. Lorsque vous examinez cela en même temps que votre graphique de consommation d’oxygène, comment vos résultats s’accordent-ils avec les hypothèses ? Voyez-vous une différence de taux de respiration entre les billes de contrôle et les graines en germination ?

L’augmentation de la température a-t-elle eu un effet sur le rythme respiratoire ?