ADN complémentaire

- [Narrateur] Toutes les cellules du corps ont le même ADN,mais ces cellules, comme les neurones et les cellulesmusculaires, expriment des gènes différents car seulscertains gènes sont transcrits en ARN messager, ou ARNmdans chaque cellule. En laboratoire, les ARNm peuvent servir de modèlepour synthétiser l'ADN complémentaire, l'ADNc,pour étudier l'expression génétique. Une méthode courante consiste à extraire l'ARN des cellules,puis à isoler l'ARNm d'autres types d'ARN,comme l'ARN ribosomal ou l'ARN de transfert,en faisant passer l'échantillon sur une colonne de billesavec des portions de thymines nucléotides fixés.

Elles se lient à la queue Poly(A),une chaîne de nucléotides adénine spécifiquement présentssur les trois premières extrémités de l'ARNm eucaryote. Les autres ARN ne se lient pas et sont éliminés par lavage. Après l'isolement de l'ARNm, une amorce Poly(T)est liée à la queue Poly(A), fournissant un point de départaux enzymes de transcriptase inversepour transcrire un seul brin dans l'ADNc de l'ARNm.

Des produits chimiques tels que les enzymes RNase sontensuite ajoutés pour dégrader l'ARN. Les enzymes ADN polymérase sont ensuite utiliséespour synthétiser un brin complémentaire de l'ADNc,ce qui donne un ADNc double brin,qui peut être inséré dans un vecteur bactérien ou viralet utilisé en biologie moléculaire.