Étudier le cytosquelette

Les scientifiques étudient la nature dynamique et statique du cytosquelette à l’aide de différentes techniques microscopiques et biochimiques.

Les propriétés mécaniques des filaments cytosquelettiques peuvent être déterminées à l’aide de la microscopie à force atomique ou AFM.

L’AFM utilise des pointes de taille nanométrique pour tirer les deux extrémités des filaments cytosquelettiques afin de déterminer leur résistance à la traction. Les filaments intermédiaires s’étirent jusqu’à trois fois et demie leur longueur standard avant de se briser en deux, ce qui suggère qu’ils sont plus extensibles que les autres.

La microscopie à fluorescence est utilisée pour étudier les interactions entre les protéines associées au cytosquelette et les filaments.

Par exemple, les protéines motrices de la kinésine marchant sur les microtubules peuvent être visualisées à l’aide de kinésine marquée à la GFP et de microtubules marqués à un colorant fluorescent.

Pour visualiser la polymérisation de la F-actine , les monomères de G-actine purifiés sont marqués avec un colorant fluorescent et micro-injectés dans une cellule vivante, où les sous-unités marquées polymérisent en filaments d’actine.

La fluorescence détectée au microscope permet en outre de localiser ces filaments à l’intérieur de la cellule.