Technologie des Hybridomes

La technologie des hybridomes est utilisée pour produire en masse des anticorps monoclonaux qui ne peuvent se lier qu’à un seul épitope – une partie d’un antigène qui suscite une réponse immunitaire.

Le processus commence par l’injection d’un antigène cible à une souris, puis par la récolte de sa rate après quelques semaines pour isoler les lymphocytes B producteurs d’anticorps. Ces cellules ont une durée de vie limitée et ne peuvent pas être cultivées en laboratoire.

Ensuite, les lymphocytes B sont fusionnés avec des cellules myélomateuses – des globules blancs immortels et cancéreux, à l’aide d’impulsions électriques ou de polyéthylène glycol. Ainsi, formant des cellules hybrides immortelles productrices d’anticorps appelées hybridomes.

Les hybridomes sont ensuite sélectionnés sur le milieu hypoxanthine-aminoptérine-thymidine, ou HAT, en fonction de la présence d’une enzyme fonctionnelle hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase ou HGPRT.

Dans ce milieu, les cellules myélomateuses négatives HGPRT et les cellules B positives mais à courte durée de vie ne peuvent pas survivre longtemps. Cependant, les cellules hybridomes immortelles avec l’enzyme HGPRT peuvent proliférer.

Après la sélection, les cellules d’hybridome qui produisent des anticorps monoclonaux avec une forte affinité pour l’épitope cible sont identifiées et utilisées comme cellules de départ pour l’établissement de lignées cellulaires productrices d’anticorps.