Marquage et protéines de fusion

Les chercheurs peuvent marquer une protéine d’intérêt avec une séquence protéique connue, également appelée marqueur, pour faciliter sa purification et sa détection.

Pour marquer une protéine, sa séquence nucléotidique est d’abord insérée dans un vecteur d’expression contenant une étiquette de fusion.

Le vecteur est ensuite introduit dans une cellule hôte qui peut produire une protéine recombinante ou de fusion.

Différents types de balises de fusion peuvent être utilisés en fonction de l’application en aval prévue.

Les marqueurs d’épitopes peuvent être utilisés pour étudier ou détecter des protéines contre lesquelles aucun anticorps n’est disponible. Lorsqu’une protéine est marquée avec un épitope connu, tel que le peptide c-Myc, elle peut être facilement détectée ou purifiée à l’aide d’anticorps disponibles dans le commerce contre c-Myc.

Les marqueurs d’histidine contenant 2 à 10 résidus d’histidine peuvent également être fusionnés sur une protéine. Les protéines marquées à la polyhistidine peuvent être purifiées à l’aide de colonnes de chromatographie d’affinité d’ions métalliques contenant des ions nickel ou cobalt divalents.

Les étiquettes fluorescentes, comme la protéine fluor