Dosage Immuno-enzymatique

Le test immuno-enzymatique ou ELISA est un test immunologique marqué avec de nombreuses applications dans la détection et la quantification d’analytes tels que les anticorps, les peptides, les glycoprotéines, les hormones et les virus.

Les anticorps de détection qui se lient à l’antigène ou à la molécule cible sont conjugués à des enzymes spécifiques qui, lors de l’ajout de substrat, produisent des signaux mesurables.

Selon les méthodes de capture et de détection, il existe quatre principaux types d’ELISA.

L’ELISA direct utilise un anticorps primaire conjugué à une enzyme pour détecter l’antigène de l’échantillon recouvert sur la plaque.

Alors que pour l’ELISA indirect, l’antigène attaché capture l’anticorps primaire de l’échantillon, auquel l’anticorps secondaire conjugué se lie.

L’ELISA sandwich implique deux anticorps, l’un enrobé sur la plaque pour capturer l’antigène de l’échantillon, tandis que l’autre anticorps conjugué à une enzyme se lie à l’antigène-épitope spécifique formant le sandwich.

Dans l’ELISA compétitif, l’antigène et l’anticorps primaire sont pré-incubés et ajoutés à la plaque recouverte du même antigène.

Plus la concentration d’antigène de l’échantillon est élevée, plus il y a de complexes antigène-anticorps formés, ce qui laisse moins d’anticorps libres à lier à l’antigène concurrent de la plaque, générant ainsi des signaux plus faibles.