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La cryomicroscopie électronique ou cryo-EM examine des échantillons biologiques congelés à des températures cryogéniques inférieures à −150 °C.
Contrairement aux EM conventionnelles, la cryo-EM ne nécessite pas de fixer et de déshydrater un échantillon, ce qui aide à préserver l’état natif des structures biologiques.
Les électrons de haute énergie utilisés dans les EM peuvent endommager les liaisons chimiques d’un échantillon. La congélation de l’échantillon permet d’éviter ces dommages, ce qui permet d’obtenir des images à une résolution proche de l’atome.
Dans la cryo-EM, de petits échantillons biologiques en solution sont vitrifiés, c’est-à-dire rapidement congelés, dans de l’éthane liquide. La vitrification fixe l’échantillon dans son état natif dans une fine couche d’eau, et l’eau dans l’échantillon forme un état semblable à du verre sans l’apparition de cristaux de glace.
Les échantillons plus épais, tels que les cellules et les tissus, ne peuvent pas être vitrifiés dans une fine couche liquide. Par conséquent, ces échantillons peuvent être étudiés à l’aide de la méthode cryo-EM des coupes vitrées. Dans cette méthode, un échantillon est d’abord vitrifié par congélation à haute pression, puis coupé en sections ultraminces à -140 °C avant d’être observé à l’aide de la cryo-EM.
La microscopie électronique (ME) conventionnelle implique la déshydratation, la fixation et la coloration d'échantillons biologiques, ce qui déforme l…
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