Chromatographie liquide haute performance: processus d'élution

Dans un instrument HPLC, plusieurs solvants sont stockés dans des réservoirs de solvant qui facilitent la variation de la composition de la phase mobile et, par conséquent, de sa polarité.

Tout d’abord, le solvant est filtré et dégazé pour éliminer les gaz dissous, avant d’être pompé.

Parmi les pompes haute pression utilisées en HPLC, la pompe à piston est la plus utilisée.

Cette pompe est basée sur un petit piston avec deux clapets anti-retour unidirectionnels.

Lorsque le piston est ramené vers l’arrière, le solvant s’écoule par la soupape d’admission et est pompé par une soupape de sortie pendant la course vers l’avant.

La composition de la phase mobile est constante dans l’élution isocratique, tandis que dans l’élution en gradient, elle est modifiée pour faciliter la séparation.

Ici, des pompes binaires indépendantes reliées à une chambre de mélange régulent le débit et la polarité de la phase mobile.

Enfin, l’échantillon est injecté dans la phase mobile à écoulement par l’intermédiaire d’un injecteur à boucle avant d’entrer dans la colonne.