Mammaires épithéliales procédure de greffe

Résumé

Cet article montre la procédure développée par RomanDing KB Et al. (1959) et la procédure en épargnant développé par Brill B Et al. (2008) pour la compensation du 4e inguinale pad mammaires graisse de souris pubère en préparation pour la greffe de fragments de glande mammaire, les cellules épithéliales mammaires ou les cellules tumorales mammaires.

Résumé

Cet article décrit et compare la procédure de dédouanement coussinet adipeux développé par RomanDing Ko et al. ¹ et la procédure en épargnant développé par Brill B et al. ^2, suivie par la procédure de greffe épithéliales mammaires. La procédure de greffe mammaire est largement utilisée par les biologistes mammaires car il faut profiter du fait que le développement significatif de l'épithélium mammaire ne se produisent qu'après la puberté. A 3 semaines d'âge, la croissance de l'arbre épithéliales mammaires est confinée à la proximité de la tétine et le coussinet adipeux est largement dépourvue d'épithélium mammaire, mais par sept semaines d'âge de l'arbre canalaire s'étend à travers l'épithélium du pavé toute la graisse. Par conséquent, si cette petite portion du coussinet adipeux contenant l'épithélium, la région entre le mamelon et le ganglion lymphatique, est enlevé à 3 semaines d'âge, l'épithélium endogènes ne sera jamais remplir le pad mammaires graisse et le coussinet adipeux est décrit comme «effacé ». A cette époque, l'épithélium mammaire d'une autre source peut être transplantées dans le coussin effacé graisse où il a le potentiel pour étendre mammaires canalaires arbres à travers le coussinet adipeux. Cette procédure a été utilisée dans de nombreux modèles expérimentaux, y compris l'examen de phénotype tumoral dans le tissu épithélial mammaire transgéniques sans effets confondants du génotype sur l'animal entier ^3, dans l'identification des cellules souches mammaires en transplantant des cellules à une dilution limitée ^{de 4,5,} la détermination Si nodules hyperplasiques procéder à des tumeurs mammaires ^6, et d'évaluer l'effet de l'exposition aux hormones sur le comportement antérieur de l'épithélium mammaire ^7,8.

Trois souris semaine ancien hôte sont anesthésiés, nettoyés et sobre sur un stade chirurgical. Une incision médiane sagittale est faite à travers la peau, mais pas le péritoine, qui s'étend du pubis au sternum. Coupes obliques sont faites à travers la peau de l'incision médiane sagittale à travers le bassin vers chaque jambe. La peau est arrachée de le péritoine pour exposer la 4e glandes mammaires inguinales. Le coussinet adipeux est effacé en supprimant la partie antérieure du coussinet adipeux du tissu à l'envahissement ganglionnaire. Fragments épithélium ou des cellules épithéliales sont transplantées dans le coussin reste graisses effacé et la souris est fermé.

Protocole

1. Préparation de l'épithélium Transplant

Tissu du donneur frais ou congelés épithéliales peuvent être transplantées dans le coussin effacé la graisse, mais une préparation préalable de l'épithélium des bailleurs de fonds gelés est plus pratique avec une diminution minimale de l'efficacité de la transplantation (efficacité> 85%). Le protocole pour la préparation de l'épithélium des bailleurs de fonds gelés est comme suit:

Avant de préparer l'épithélium greffe des donateurs, des médias congeler pour préparer l'épithélium et aliquot environ 1 ml dans des cryotubes. Cela peut être conservé à....

Discussion

Dans ce rapport, nous présentons deux méthodes alternatives pour dégager le tapis de souris mammaires de graisse dans la préparation de greffes mammaires épithéliales. La procédure standard a été en usage depuis son élaboration en 1959 par RomanDing et al. ¹ Bien plus invasives, la méthode standard est la méthode préférée pour la formation des novices, car la structure et l'orientation de la glande mammaire sont facilement visualisés. Toutefois, la procédure en épargnant peut être préférée par le.......