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$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1.Configuration du champ magnétique avec la manipulation du champ magnétique unidimensionnel
- Mettez le bloc d’alimentation sous tension (Figure 1A).
- Placez le tunnel enroulé à l’endroit où le protocole rhéotactique sera effectué (section 3) mais maintenez-le déconnecté de l’appareil de nage (Figure 1A). Placez une sonde magnétique connectée à un Gauss/Teslamètre à l’intérieur du tunnel et vérifiez quelle tension est nécessaire pour obtenir la valeur de champ magnétique choisie le long de l’axe principal du tunnel.
REMARQUE : En raison des propriétés magnétiques d’un solénoïde, le champ est raisonnablement uniforme à l’intérieur du tunnel ; Cela peut être vérifié en déplaçant lentement la sonde à la fois horizontalement et verticalement.
- Débranchez la sonde et connectez le tunnel d’écoulement à l’appareil de nage.
- Commencez par le protocole rhéotactique (section 3).
2. Configuration du champ magnétique avec la manipulation du champ magnétique tridimensionnel
- Activez les pilotes du processeur, du DAC et de la bobine (Figure 1B).
- Réglez le champ magnétique choisi sur chacun des trois axes (x, y et z).
- Placez le tunnel au centre de l’ensemble de paires Helmholtz.
- Commencez par le protocole rhéotactique (section 3).
3. Test de la rhéotaxie du poisson zèbre dans la chambre d’écoulement
- Transférez un à cinq poissons dans le tunnel d’écoulement à l’aide d’un réservoir de 2 L avec les côtés et le fond masqués.
- Allumez la pompe et réglez le débit dans le tunnel sur 1,7 cm/s.
note: Cette eau lente maintiendra l’eau du tunnel oxygénée et facilitera la récupération des animaux.
- Laissez les animaux s’acclimater au tunnel de nage pendant 1 h.
- Démarrez l’enregistrement vidéo du comportement du poisson dans le tunnel.
note: Nous avons utilisé une caméra (par exemple, Yi 4K Action) avec une télécommande (par exemple, Bluetooth) et avons enregistré la vidéo au .mpg (30 images/s).
- Démarrer l’augmentation progressive du débit selon le protocole expérimental choisi (1,3 cm/s dans cette étude ; Figure 2).
NOTE : Pour ce protocole, nous avons utilisé de faibles débits qui, pour le poisson zèbre, varient de 0 à 2,8 BL (longueurs du corps)/s. Ces vitesses d’écoulement se situent dans la gamme inférieure des débits qui induisent une nage orientée continue chez le poisson-zèbre (3 % à 15 % de la vitesse de nage critique [Ucrit]). L’utilisation de faibles débits (suivant le protocole de Brett) est liée aux caractéristiques comportementales spécifiques de cette espèce en présence de courants d’eau. Les poissons-zèbres ont tendance à nager le long de l’axe principal de la chambre, se tournant fréquemment, même en présence d’un écoulement d’eau, et ont tendance à nager à la fois en amont et en aval. Ce comportement est affecté par le débit d’eau, disparaissant à des vitesses relativement élevées (>8 BL/s), lorsque les animaux nagent continuellement face à l’amont (réponse rhéotactique positive complète). Les déplacements verticaux et transversaux sont très rares.
- Effectuer la morphométrie des animaux (sexe et longueur totale [TL], longueur à la fourche [FL] ou BL) sur des images de poissons dans une chambre morphométrique.
- Sélectionnez l’image appropriée.
- Ouvrez l’image dans ImageJ.
- Prenez note du sexe de l’animal (les poissons-zèbres mâles sont minces et ont tendance à être jaunâtres, tandis que les femelles sont plus arrondies et ont tendance à avoir des couleurs bleues et blanches).
- Cliquez sur Analyser > Définir l’échelle et définissez l’échelle de l’image en centimètres, en utilisant toute la longueur horizontale du tunnel comme référence.
- Cliquez sur Analyser > Mesurer et enregistrer la longueur linéaire de l’animal.
- Calculer son poids corporel (PC).
note: Le BW est calculé à partir des relations sexe-FL-BW précédemment construites en laboratoire ou à partir de métadonnées. L’ensemble de la procédure évite le stress de manipulation sur les animaux.