in vivo L’électroporation : une méthode spécifique au site pour transfecter le poisson-zèbre

Résumé

Source : Durovic, T., et al. Méthode d’électroporation pour l’administration in vivo d’ADN plasmidique dans le télencéphale de poisson-zèbre adulte. J. Vis. Exp. (2019).

Cette vidéo décrit l’électroporation in vivo, qui est une technique de livraison d’ADN dans les cellules épendymogliales chez le poisson-zèbre adulte.

Protocole

1. Électroporation

1. Retirez le poisson de l’installation d’injection tout en le tenant dans l’éponge.
2. Immergez la face interne de l’extrémité des électrodes dans le gel à ultrasons.
3. Couvrez le télencéphale de poisson avec une petite quantité de gel à ultrasons.
4. Placez la tête du poisson entre les électrodes, en plaçant l’électrode positive sur la face ventrale de la tête du poisson et l’électrode négative sur la face dorsale (figure 1C), tout en maintenant le corps du poisson dans l’éponge. Celui-ci définit la direction du flux du courant nécessaire pour électropoler les éponymoglies positionnées dans la zone sous-ventriculaire.
5. Appuyez doucement et précisément les électrodes contre le télencéphale (Figure 1 C). Administrez le courant avec la pédale. Maintenez les électrodes en place jusqu’à ce que les cinq impulsions soient terminées.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Gel à ultrasons	SignaGel, laboratoires Parker INC	15 à 60	Gel d’électrode
Électrodes de pince à épiler BTX	Pince à épiler en platine, BTX Harvard Apparatus	Référence 45-0486	1 mm de diamètre
Dispositif d’électroporation	Système d’électroporation à ondes carrées BTX ECM830, appareil BTX Harvard	Référence 45-0662

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