1. Mastectomie
REMARQUE : Le moment de la mastectomie est très important. S’il est fait trop tôt, les métastases pulmonaires ne se produisent pas. Si cela est fait trop tard, la tumeur primaire a envahi les principaux vaisseaux sanguins, ce qui rend difficile une résection oncologique complète. Ainsi, plusieurs points temporels ont été testés pour la mastectomie afin de déterminer quel point temporel produisait l’équilibre approprié dans l’attente des métastases avant que la résection ne devienne trop difficile. Après l’avoir fait dans plus de 50 expériences sur des souris, il a été démontré que la mastectomie 8 jours après l’inoculation des cellules cancéreuses (ou lorsque la taille de la tumeur atteint 5 mm) était le moment idéal pour atteindre cet équilibre.
- Anesthésie une souris avec 2 à 4 % d’isoflurane et un débit d’oxygène de 0,2 L/min jusqu’à ce que les souris respirent calmement (2 à 3 min) et injecte 0,05 mg/kg de buprénorphine dans son épaule par voie sous-cutanée.
- Restreignez les membres de la souris à l’aide de ruban adhésif de laboratoire et stérilisez sa peau avec de la chlorhexidine, de l’iode et de l’éthanol à 75 %, à l’aide de cotons-tiges.
- Faites une incision cutanée de 5 mm à 2 mm à gauche de la cicatrice chirurgicale qui a été faite lors de l’inoculation initiale des cellules cancéreuses, à l’aide des ciseaux de microdissection. Étendre l’incision vers la racine du membre antérieur pour enlever la tumeur, la peau y compris la cicatrice chirurgicale, et la lésion en contact avec la tumeur, ainsi que le bassin ganglionnaire axillaire dans lequel la plupart du temps aucun ganglion lymphatique visible n’existe au moment de la mastectomie. Assurez-vous de ne pas endommager la veine axillaire.
- Fermez les défauts de la peau par couture, à l’aide de sutures stériles 5-0 non résorbables en forme de « Y ».
- Remettez la souris dans une cage propre et surveillez-la jusqu’à ce qu’elle se rétablisse et se déplace librement (après ~1 à 2 min). Si un animal ne semble pas en bonne santé dans les 24 heures suivant la chirurgie, administrez-lui de la buprénorphine (0,2 mg/kg).
- Retirer les sutures sous anesthésie (avec 2-4 % d’isoflurane et 0,2 L/min d’oxygène) 7 jours après l’intervention.