zPDX-Analyse de l’invasivité : étude du comportement invasif des cellules cancéreuses métastatiques dans les xénogreffes d’embryons de poisson-zèbre

Résumé

Source : Ren, J. et al. Comportement invasif des cellules cancéreuses du sein humain chez le poisson-zèbre embryonnaire. J. Vis. Exp. (2017).

Cette vidéo décrit une méthode de micro-injection pour l’administration de cellules cancéreuses du sein dans l’espace périvitellin d’embryons de poisson-zèbre transgénique. Après l’incubation, nous visualisons l’embryon au microscope fluorescent pour observer l’invasion, la dissémination et les métastases des cellules cancéreuses.

Protocole

1. Imagez et analysez le processus métastatique

1. Prélevez plusieurs embryons anesthésiés à l’aide d’une pipette Pasteur à pointe large et transférez-les dans le fond en verre d’une boîte en polystyrène.
2. Retirez l’excès d’eau et conservez une quantité limitée d’eau d’œuf. Manipulez l’embryon en position avec un outil de boucle de cheveux et placez un couvercle sur le verre.
3. Utilisez un microscope confocal inversé en combinaison avec des objectifs à immersion dans l’eau ou à séchage à longue distance. Positionnez l’embryon de manière à ce que la région d’intérêt soit aussi proche que possible de l’objectif.
4. Effec....

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Pipette Pasteur à pointe large (0,5-20 μL)	Eppendorf	F276456I
Microscope confocal	Leica	SP5 STED
Stéréomicroscope	Leica	MZ16FA
souche de poisson-zèbre Tg (fli :EGFP)			Aimablement fourni par Dr. Ewa Snaar Jagalska (Institut de biologie, Université de Leiden, Leyde, Pays-Bas)
Plat en polystyrène avec fond en verre	WillCo	GWST-5040
Stéréomicroscope à fluorescence	Leica	M165 FC
Tricaïne (acide 3-aminobenzoïque)	SigmaAldrich	A-5040