Injection intracanalaire chez le lapin : administration localisée de la solution d’intérêt dans la glande mammaire du lapin

1. Préparation préopératoire

1. Notez le poids corporel de chaque lapin. Comme pour toutes les études précliniques, surveiller régulièrement le poids des animaux afin d’évaluer la toxicité potentielle.
2. Avant d’anesthésier le lapin, remplissez un tube conique de 50 ml avec du gel à ultrasons disponible dans le commerce et tournez à 500 x g pendant 30 s ; il ne doit pas y avoir de bulles visibles dans le gel à la fin de la centrifugation.
3. Administrer du glycopyrrolate par voie sous-cutanée à une dose de 0,1 mg/kg et de l’acépromazine par voie intramusculaire à une dose de 0,75 mg/kg. Attendez 15 à 20 minutes pour que le sédatif fasse effet tout en surveillant les signes vitaux et le comportement.
   note: Le glycopyrrolate est un agent anti-cholinergique qui prévient la bradycardie et réduit les sécrétions respiratoires et gastro-intestinales. L’acépromazine est un sédatif qui sert de prémédication pour l’anesthésie.
4. Administrer 35 mg/kg de kétamine et 5 mg/kg de xylazine par voie sous-cutanée comme anesthésique. Cependant, à mesure que l’opérateur acquiert de l’expérience et peut effectuer l’administration intracanalaire plus rapidement, réduire les doses de médicament à 15 mg/kg de kétamine et à 3 mg/kg de xylazine par voie sous-cutanée ; Cela réduira le temps d’anesthésie et le temps nécessaire à l’animal pour se remettre de l’anesthésie.
5. Vérifiez et documentez la fréquence cardiaque, le SPO_2, la température, la fréquence respiratoire et la couleur de la muqueuse toutes les 15 min. Appliquez du lubrifiant pour les yeux sur les deux yeux.
   note: Seul le personnel qui a suivi une formation appropriée et qui a été approuvé par l'IACUC de leur établissement doit administrer ou surveiller l'anesthésie. L’utilisation d’un moniteur d’anesthésie vétérinaire peut aider à acquérir des signes vitaux et est recommandée. Le moniteur d’anesthésie vétérinaire ne remplace cependant pas la nécessité de vérifier manuellement l’animal toutes les 15 minutes. Consultez les instructions du fabricant pour l'utilisation correcte d'un moniteur vétérinaire.
6. Vérifiez le début de l’anesthésie par un léger pincement des orteils ; le lapin doit ne pas répondre avant de continuer.
7. Rasez soigneusement l’abdomen caudal du lapin dans la zone autour des troisième et quatrième paires de trayons inguinaux.
8. Une fois la majorité des poils épilés, appliquez une crème dépilatoire en vente libre sur la zone rasée. Retirer la crème 10 min après l’application à l’aide d’essuie-tout humide imbibé d’eau tiède.
   note: La peau du lapin est très fragile/sensible. La crème dépilatoire ne doit pas être utilisée plus de 10 minutes. En fait, il est plus sûr d’essayer un « point d’essai » à 5 minutes et de ne le laisser agir plus longtemps que si le point d’essai indique qu’une période plus longue est nécessaire.
9. Essuyez la zone avec des tampons de gaze imbibés d’alcool pour nettoyer le site d’injection.
10. Placez le lapin sur son dos dans une auge en forme de V doublée d’une couverture d’eau chaude à recirculation et d’un tampon absorbant.

2. Préparation de l’agent de contraste

1. Reconstituez le réactif de contraste non ciblé selon les instructions du fabricant. Pipeter doucement de haut en bas pour mélanger.
   note: L’agent de contraste utilisé dans ce protocole est stable à température ambiante pendant 4 à 6 h après reconstitution. Balancez doucement le flacon entre chaque récupération.
   REMARQUE : Le volume de solution requis dépendra du nombre de conduits à injecter. Le lapin a 4 ouvertures canalaires par trayon, et 0,2 mL de solution est suffisant pour remplir un arbre canalaire d’un lapin blanc de Nouvelle-Zélande adulte (Oryctolaguscuniculus). Ainsi, un volume total de 0,8 mL peut être délivré à une glande mammaire.

3. Accouchement intracanalaire

1. Repérer les trayons appropriés à injecter ; les 3e et 4e paires de trayons inguinaux sont recommandées, car elles sont facilement visualisables lorsque l’animal est positionné sur son dos.
2. Chargez 0,2 mL de solution saline stérile à 0,9 % dans une seringue à tuberculine Luer-lock de 1 mL avec une aiguille de 22 G. Jetez correctement l’aiguille de 22 G une fois que la solution saline est dans la seringue et remplacez-la par une aiguille stérile de calibre 25. Essuyez doucement la zone avec de l’alcool isopropylique à 85 % sur un tampon de gaze.
3. Avec le biseau de l’aiguille vers le haut et la seringue parallèle au corps de l’animal, insérez le biseau de l’aiguille sur le côté du trayon et injectez lentement 0,1 à 0,2 mL de solution saline, ce qui permettra de mieux visualiser les ouvertures canalaires.
4. Versez 0,2 mL de solution injectable dans une seringue à tuberculine Luer-lock de 1 mL.
5. Tenez doucement la tétine avec le pouce et l’index et soulevez-la légèrement pour la positionner pour l’injection intracanalaire ; une loupe oculaire portable peut aider à visualiser les ouvertures canalaires.
6. Tout en maintenant la position relevée de la tétine, canulez soigneusement le canal d’intérêt à l’aide d’une aiguille à pointe émoussée de 25 G.
7. Après la canulation, tournez doucement la seringue Luer-lock sur le moyeu de l’aiguille de perfusion à embout arrondi jusqu’à ce qu’elle soit verrouillée en place.
8. Soulevez le trayon et injectez la solution lentement pour minimiser les dommages potentiels causés par le mouvement rapide du liquide dans le conduit ; à aucun moment il ne doit y avoir de résistance lors de l’injection de la solution.