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Article de méthode

Ex vivo Chargement mécanique du tendon

9.4K vues

DOI :

10.3791/209

28 mai 2007

Dans cet article

Résumé

Un nouveau système in vitro pour charger simultanément quatre tendons dans la culture est décrite.

Résumé

Blessures au tendon (par exemple, la tendinite du poignet, epicondyltis) en raison de la surutilisation sont communes dans les activités sportives et le lieu de travail. La plupart sont associés à répétition, des activités à forte main vigueur. Les mécanismes de dommages cellulaires et structurelles dues aux charges cycliques ne sont pas bien connus. Le but de cette vidéo est de présenter un nouveau système qui peut télécharger simultanément quatre tendons en culture de tissus. La vidéo décrit les méthodes de récolte des tissus stériles et comment les tendons sont chargés sur un système de serrage qui est ensuite immergé dans les médias et maintenue à 37 ° C. Une pince est fixe tandis que l'autre est déplacé avec un actionneur linéaire. Force de traction des tendons est surveillé avec une cellule de charge en série avec la pince mobile. Les actionneurs sont contrôlés par un programme LabView. Les quatre tendons peuvent être chargés de façon répétitive avec des motifs différents de chargement, taux de redoublement, taux de chargement et la durée. Le chargement peut durer quelques minutes à 48 heures. A la fin du chargement, les tendons sont enlevées et le milieu des substances extraites des analyses biochimiques. Ce système permet de l'enquête sur les effets du chargement des motifs sur l'expression des gènes et des changements structurels dans le tendon. Finalement, les mécanismes de blessures dues à la surutilisation peuvent être des études avec les conclusions appliquées au traitement et la prévention.

Protocole

  1. Supplément médias CO 2-médiatiques indépendants avec sérum de veau fœtal, la L-glutamine, des antibiotiques et l'acide ascorbique
  2. Aliquoter 40 ml dans des tubes de 50 ml par centrifugation (1 pour chaque tendon)
  3. Aliquote de 10 ml dans des tubes de 15 ml par centrifugation (1 pour chaque tendon)
  4. Stériliser des instruments chirurgicaux, draps autoclave, une pince à épiler et une clé dynamométrique en autoclave
  5. Stériliser colliers et des conseils micrométrique vigueur par trempage dans de l'éthanol 70% pendant une nuit
  6. Récolte des tendons de la patte arrière du lapin. Lapin aurait dû être euthanasiés pas plus de 2 heu....

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Discussion

La vidéo présente un nouveau système pour le chargement simultané de jusqu'à quatre tendons vivons dans une culture tissulaire. Durées de chargement typiques sont de 2 à 48 heures. Après le chargement, les tendons sont enlevées et traitées pour l'expression des gènes. Le système permet à l'enquête de l'effet de schéma de chargement sur les changements dans les gènes associés à des changements dégénératifs dans le tendon. Ces expériences peuvent fournir un aperçu des mécanismes de blessure associés au chargement répétitif. Il.......

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Matériaux

Personnalisé 4 Actuateur Linéaire système de chargement chaud l'eau du bain tubes de 50 ml tendons (lapin) milieux stériles

Références

  1. Asundi, K., Kursa, K., Lotz, J. C., Rempel, D. In vitro system for applying cyclic loads to connective tissues under displacement or force control. Ann Biomed Eng. 35, 1188-1195 (2007).
  2. Asundi, K. R., Rempel, D. M. Cy....

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Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Chargement m canique des tendonsChargement cyclique des tendonsAire de section transversale du tendonPr l vement de tissu tendineuxSyst me de cellule de charge actionneurProgramme de contr le LabViewAnalyse de l expression g nique du tendonChangements structurels du tendonAnalyse biochimique du tendonIncubation en bain marie