Method Article

Injection mur souris vessie

DOI:

10.3791/2523

July 12th, 2011

In This Article

Summary

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Injection de mur souris vessie est une approche utile pour l'étude des cellules souches orthotopique de la vessie et la biologie du cancer. Cette méthode microchirurgicale délicates peuvent être maîtrisées avec une technique minutieuse et pratique.

Abstract

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Injection de mur souris vessie est une technique utile pour étudier les phénomènes orthotopique vessie, y compris les cellules souches, le muscle lisse, et la biologie du cancer. Avant de commencer les injections, la zone chirurgicale doit être nettoyé avec du savon et de l'eau et une solution antiseptique. Équipements chirurgicaux doivent être stérilisés avant leur utilisation et entre chaque animal. Chaque souris est placée sous anesthésie à l'isoflurane inhalées (2-5% pour l'induction, de 1-3% pour l'entretien) et sa vessie exposée par une incision abdominale médiane avec des ciseaux. Si la vessie est pleine, elle est partiellement décompressées par serrant doucement entre deux doigts. La suspension de cellules d'intérêt est intra-muros injectée dans la paroi du dôme de la vessie à l'aide d'une aiguille de calibre 29 ou 30 et 1 cc ou moins seringue. La plaie est ensuite fermée à l'aide des clips de la plaie et la souris a permis de récupérer sur un pad réchauffement. Injection de paroi de la vessie est une technique de microchirurgie délicate qui peut être maîtrisé avec la pratique.

Protocol

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1. Injection mur souris vessie

Choix de la souche de souris, l'âge et le sexe est dicté par les besoins expérimentaux. Nous utilisons des souris entre 8 et 12 semaines d'âge, puisque c'est une fenêtre de maturité immunologique avant la sénescence. En règle générale, les souris doivent arriver au moins une semaine avant la manipulation expérimentale, afin d'éviter le stress induit par des facteurs confondants.

  1. Nettoyer la surface de la table de chirurgie avec du savon et l'eau.
  2. Essuyez la surface de la table chirurgicale avec Swipes Cide ou des lingettes antiseptiques.
  3. Autoclave nettoyer les instruments chiru....

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Discussion

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Injection de la vessie mur de la souris permet l'implantation de cellules spécifiques dans des domaines précis de la paroi vésicale. Cette technique a des applications large pour les modèles murins de cancer de la vessie, le muscle lisse, et la biologie des cellules souches. Par définition, l'injection mur de souris vessie facilite l'introduction du cancer de la vessie ou de cellules souches dans un endroit orthotopique de sorte que leur croissance et leur différenciation peut être étudiée dans un contexte p.......

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Disclosures

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Aucun conflit d'intérêt déclaré.

Acknowledgements

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Nous tenons à souligner l'appui d'une subvention de projet pilote du Fonds de recherche de Stanford pédiatrique et K08DK087895-01 du NIDDK.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nom du réactif Société Numéro de catalogue
L'isoflurane (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 ou 30 aiguilles de calibre Hamilton 7803-06 7803-07 ou
Seringue de 100 microlitre Hamilton 7656-01

References

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  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. ....

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Mouse Bladder InjectionBladder Wall InjectionAbdominal IncisionCell Suspension InjectionWound Clip ClosureIsoflurane AnesthesiaSurgical Site SterilizationHistological AnalysisBladder Dome ExposureHamilton Syringe Use

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