La cholestase est une condition clinique communément rencontrés par les deux chirurgiens et les gastroentérologues. Création d'un modèle de rat cholestatique réversible peut être difficile compte tenu de la taille plus petite et unique anatomie hepatopancreatobiliary chez le rat. Cet article démontre la vidéo de création d'un modèle cholestatique réversible.
Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.
Article de méthode
Création du modèle de rat réversible cholestatique
* These authors contributed equally
Dans cet article
Résumé
Résumé
La cholestase est une condition clinique communément rencontrés par les deux chirurgiens et les gastroentérologues. Cholestase peut causer divers changements physiologiques et affectent l'état nutritionnel et des résultats chirurgicaux. Étude des changements physiopathologiques se produisant dans le foie et autres organes est d'importance. Diverses études ont été effectuées dans des modèles de rats cholestatiques.
Nous avons utilisé un modèle cholestatique réversible chez le rat dans notre étude récente portant sur le rôle de la méthylprednisolone dans les lésions de reperfusion d'ischémie. Diverses techniques de création d'un modèle cholestatique réversible ont été décrits. Création d'un modèle de rat cholestatique réversible peut être difficile compte tenu de la taille plus petite et unique anatomie hepatopancreatobiliary chez le rat. Cet article démontre la vidéo de création d'un modèle cholestatique réversible.
Ce modèle peut être utilisé dans diverses études, telles que la recherche sur les changements dans nutritionnelles, physiologiques, pathologiques, des modifications histologiques et immunologiques dans le tractus gastro-intestinal. Ce modèle peut également être utilisé pour voir les effets de la cholestase et diverses interventions thérapeutiques sur les chirurgies hépatiques majeures.
Protocole
1. Anatomie Rat biliaires
Le diamètre moyen de la bile conduit et la longueur est de 1 mm et 29 mm, respectivement. La distance moyenne entre le pylore et la papille duodénale a été de 28 mm. Il ya deux principaux canaux pancréatiques qui s'ouvrent dans le canal cholédoque - le conduit antérieure s'ouvre sur le côté gauche et le canal postérieur s'ouvre sur le côté droit. En plus de ces conduits principaux, un certain nombre de conduits qui drainent mineurs tous les trois portions du pancréas ouverts directement à la voie biliaire. 6
2. Technique
Toutes les expériences sur les animaux ont été effectuées en accord avec le National Institutes of Health des lignes directrices pour la recherche éthique et ont été approuvés par le Comité de recherche de l'institution et du Comité de protection des animaux. Des rats Sprague-Dawley âgés de 8 semaines ont été utilisés pour cette démonstration. Les rats ont été obtenus à partir de Charles River Laboratories à Wilmington, MA et toutes ont été plus de 300 grammes. Les rats ont eu accès à l'alimentation de laboratoire standard et ont été logés ensemble dans des conditions standard de laboratoire.
Les rats ont été anesthésiés avec un premier isofluorane et maintenu sous anesthésie pendant la chirurgie avec isofluorane à travers un masque. Une incision médiane de 2 cm a été faite à partir de la xiphisternum. Une fois l'aponévrose a été ouvert, les lobes du foie étaient rentrés crânialement avec un écarteur de Sen, et le duodénum était rentré caudalement utilisant Q-tips. La voie biliaire a été identifié comme une structure tubulaire entrer dans le duodénum. La voie biliaire a été mis sous tension et partiellement à ciel ouvert. Un tube de 5 cm stérile en polyéthylène de long avec un diamètre intérieur de 0,6 mm et un diamètre extérieur de 0,9 mm a été utilisée. Une extrémité de ce tube a été scellé à chaud et l'autre extrémité a été légèrement biseautés. L'extrémité biseautée est ensuite passée dans le canal biliaire. Cela a été fixé en place en utilisant 8-0 sutures en nylon proximale et distale à l'ouverture de la voie biliaire. Le tube reste avec l'extrémité scellée a été placé dans la cavité péritonéale. Le site opératoire a été irriguée avec une solution saline normale. L'abdomen a ensuite été fermé en 2 couches, avec suture Polyglactine 4-0. La ligne blanche a été fermée avec des sutures continues et les sutures interrompues dermiques ont été placés. Colle de peau a ensuite été appliqué sur la peau. Les rats ont été autorisés à récupérer dans des conditions standard de laboratoire à la surveillance de poids corporel par jour pour assurer une bonne hydratation.
Pour l'opération de retournement de cholestase, les rats ont été anesthésiés à l'aide isofluorane comme décrit précédemment. L'abdomen a été ouvert sur le site de l'incision précédente. Le tube a été identifié et mis hors de la cavité péritonéale. Adhérences épiploïques autour du tube sont libérés en utilisant dissection et pointu. Un site dans le duodénum a ensuite été identifié pour un positionnement confortable du tube duodénostomie. Une suture chaîne de bourse, 2-3 mm de diamètre, a ensuite été placé en utilisant 8-0 nylon. Le duodénum a ensuite été ouvert à l'intérieur de cette suture chaîne de bourse. L'extrémité fermée du tube a ensuite été coupé à la longueur appropriée. Libre circulation de la bile a été assurée. Cette extrémité du tube a été ensuite placé dans le duodénum et la suture chaîne de bourse a été resserré. L'abdomen a été irriguée et fermé en couches.
Dans une étude précédente, où choledochoduodenostomy été réalisée en utilisant une technique différente, les rats ont été survécu pendant 12 semaines et les rats étaient en bonne santé pendant cette période. Aussi cette étude ont confirmé l'inversion des changements biochimiques et histologiques après choledochoduodenostomy chez des rats soumis à une obstruction des voies biliaires, pour une période de 2 semaines. 7
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Discussion
Cholestase conduit à une myriade de changements dans le système gastro-intestinal. Des études ont été effectuées à la recherche des changements dans le système immunitaire et l'état nutritionnel. Cholestase 1-3 peut affecter les résultats des chirurgies hépatiques. Des études ont été effectuées pour améliorer les résultats des chirurgies hépatiques, en présence de cholestase. 4-5 avec des améliorations dans la médecine et la recherche, des études complémentaires seront effectués sur une cholest...
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Déclarations de divulgation
Aucun conflit d'intérêt déclaré.
Références
- Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
- Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
- Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
- Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
- Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
- Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
- Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).
Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.
Réimpressions et autorisations
Mots-clés
