Une méthode de transfert de gènes pour le traitement de l'insuffisance cardiaque ischémique est décrit en utilisant un modèle porcin d'infarctus du myocarde. Notre méthode simple et reproductible nous permet de facilement évaluer l'efficacité des transferts de gènes différents avec une manière très simple et reproductible.
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Article de méthode
Transfert de gènes pour insuffisance cardiaque ischémique dans un modèle préclinique
Dans cet article
Résumé
Résumé
Diverses nouvelles technologies sont développées pour les patients atteints d'insuffisance cardiaque. Bien établies des évaluations précliniques sont nécessaires pour déterminer leur efficacité et leur sécurité.
La thérapie génique utilisant des vecteurs viraux est l'une des approches les plus prometteuses pour le traitement des maladies cardiaques. La livraison de divers gènes viraux différents en changeant le gène transporteur a incommensurable potentiel thérapeutique.
Dans cette vidéo, le processus complet d'un modèle animal de la création d'une insuffisance cardiaque suivie par transfert de gènes est présentée en utilisant un modèle porcin. Tout d'abord, l'infarctus du myocarde est créé par l'occlusion proximale antérieure descendante gauche l'artère coronaire. Résultats de remodelage cardiaque dans l'insuffisance cardiaque chronique. Unique à notre modèle est une cicatrice assez importante qui reflète véritablement les patients atteints d'insuffisance cardiaque grave et qui nécessitent un traitement agressif pour des résultats positifs. Après la création du myocarde infarctus et le développement de tissu cicatriciel, une injection intracoronaire de virus est démontrée avec une perfusion de nitroglycérine simultanée. Notre méthode d'injection permet le transfert de gène simple et efficace avec l'expression génétique. Cette combinaison d'un modèle d'infarctus du myocarde porcine avec la livraison intracoronarienne virus s'est avéré être une méthodologie cohérente et reproductible, ce qui permet non seulement de tester l'effet des gènes individuels, mais aussi de comparer l'efficacité de nombreux gènes comme des candidats thérapeutiques.
Protocole
1. Infarctus du myocarde création
- Femme porcs Yorkshire (20 kg) à partir des industries animales Biotech (Doylestown, PA) sont pré-médicamenteux en utilisant télazol (tilétamine / zolazépam) (8,0 mg / kg) et la buprénorphine (0,6 mg).
- Les animaux sont intubés et ventilés, puis avec de l'oxygène à 100%. L'anesthésie générale est maintenue avec du propofol (5-8mg/kg/hr) pendant toute la procédure.
- Le site du fémur est préparé avec de l'alcool isopropylique à 70% suivie par la polyvidone iodée. Une ponction percutanée permet d'accéder à l'artère et de placement de la gaine. Après l'insertion gaine, 3000-5000 UI d'héparine est administrée I....
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Discussion
Parmi les différentes causes de l'insuffisance cardiaque, l'ischémie est de loin la plus fréquente dans l'étiologie. Pour surmonter cette grave maladie, différentes approches thérapeutiques sont en cours de développement. Évaluations soigneuses des thérapies sont nécessaires avant que ces thérapies prometteuses sont peut être appliquée à la clinique. Par conséquent, l'établissement d'un modèle d'insuffisance cardiaque ischémique, qui représente les conditions cliniques des patients est essentiell.......
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Déclarations de divulgation
Tous les auteurs ne sont pas des associations commerciales qui pourraient poser comme un conflit d'intérêts en rapport avec le manuscrit.
Remerciements
Ce travail est soutenu par la Fondation Leducq à travers le réseau Caerus (RJH), par le NIH R01 HL093183, HL088434, HL071763, HL080498, HL083156 et P20HL100396 (RJH). DL a été soutenu par la Fondation allemande de recherche. Nous tenons à remercier Lauren Leonardson pour son aide technique dans ce projet.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Telazol | Fort Dodge Animal Health | 0856-9050-49 | |
| Propofol | APP Pharmaceuticals | 63323-270-20 | |
| Héparine | APP Pharmaceuticals | 63323-540-11 | |
| Amiodarone | APP Pharmaceuticals | 63323-616-03 | |
| Sulfate d'atropine | Med-Pharmex | 54925-063-10 | |
| Acétate de potassium | American Regent Inc. | 2053-25 | |
| Nitroglycérine | American Regent Inc. | 4810-25 | |
| Salix (Furosémide) | Intervet Inc. | 710461 | |
| Cathéter en forme de bâton de hockey 5 Fr | Cordis | 556-278-0L | |
| Cathéter en forme de bâton de hockey 7 Fr | Cordis | 778-278-00 | |
| Guide coronaire | Abbott Laboratories | 1044588 | |
| Ballonnet coronaire | Abbott Laboratories | 1009447-08 | |
| Gain de 8 Fr | Terumo Medical Corp. | RSS801 |
Références
- Perez de Prado, A. Closed-chest experimental porcine model of acute myocardial infarction-reperfusion. J Pharmacol Toxicol Methods. 60, 301-306 (2009).
- Angeli, F. S. Left ventricular remodeling after myocardi....
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Réimpressions et autorisations
