Une technique d’imagerie TEP in vivo pour détecter des tumeurs dans un modèle murin à l’aide d’anticorps radiomarqués

Résumé

Source : Zeglis, B. M., et al. La bioconjugaison et la radiosynthèse de ⁸⁹anticorps marqués au Zr-DFO. J. Vis. Exp. (2015).

Cette vidéo présente une technique impliquant un radio-immunoconjugué pour l’imagerie in vivo d’une tumeur dans un modèle murin. Lors de l’injection du radio-immunoconjugué, les anticorps du conjugué se lient à un antigène membranaire spécifique sur les cellules cancéreuses. Le radiotraceur du conjugué émet des positrons qui interagissent avec les électrons voisins pour produire de l’énergie, qui est détectée par un scanner de tomographie par émission de positons (TEP) pour créer une image de la tumeur.

Protocole

Toutes les procédures impliquant des modèles animaux ont été examinées par le comité institutionnel local de protection des animaux et le comité d’examen vétérinaire JoVE.

1. Imagerie TEP in vivo avec ⁸⁹Zr-DFO-J591

ATTENTION : Cette étape du protocole implique la manipulation et la manipulation de la radioactivité. Avant d'effectuer ces étapes, les chercheurs doivent consulter le service de radioprotection de leur établissement d'attache. Toutes les mesures possibles doivent être prises pour réduire au minimum l’exposition aux rayonnements ionisants.

1. Chez les souris mâles athymiques nues, implanter par voie sous-cutanée 5 x 10⁶ cellules cancéreuses du carcinome ganglionnaire de la prostate (LNCaP) et permettre à celles-ci de se développer jusqu’à une xénogreffe de¹⁰⁰ à 150 mm (3 à 4 semaines après l’inoculation).
2. Diluer le radio-immunoconjugué ⁸⁹Zr-DFO-J591 à une concentration de 1,0 mCi/ml dans une solution saline stérile à 0,9 %.
3. Injecter 200 μl de la solution ⁸⁹Zr-DFO-J591 (DFO = déféroxamine, J591 = anticorps ciblant l’antigène membranaire spécifique de la prostate [PSMA]) (200 μCi ; 7,4 MBq) dans la veine latérale de la queue des souris porteuses de xénogreffes.
4. Au moment de l’imagerie souhaité (par exemple, 12, 24, 48, 72, 96 ou 120 heures après l’injection), anesthésez la souris avec un mélange gazeux d’isoflurane et d’oxygène à 2 %.
5. Placez la souris sur le lit du scanner TEP pour petits animaux et maintenez l’anesthésie pendant l’examen à l’aide d’un mélange gazeux d’isoflurane à 1 %. Avant de placer l’animal sur le lit du scanner, vérifiez l’anesthésie à l’aide de la méthode du pincement des orteils et appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux de la souris pour éviter le dessèchement pendant l’anesthésie.
6. Acquérez les données TEP de la souris via un balayage statique avec un minimum de 40 millions d’événements coïncidents à l’aide d’une fenêtre d’énergie de 350 à 700 keV et d’une fenêtre de temps de coïncidence de 6 nsec.
7. Après avoir terminé l’acquisition de l’image, ne laissez pas la souris sans surveillance et ne la placez pas dans une cage avec d’autres souris jusqu’à ce qu’elle ait repris conscience.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
p-SCN-Bn-DFO	Macrocycliques	B-705	Conserver à -80 °C
[89Zr]Oxalate de zr	Divers, y compris Perkin-Elmer	-	Attention : Matières radioactives