Vue d'ensemble
L'étude que nous décrivons dans ce protocole se déroule sur trois jours consécutifs, avec un design inter-sujets des trois groupes expérimentaux. Au jour 1, toutes les matières subissent conditionnement de la peur, où ils apprennent à distinguer deux indices, celui qui prédit un choc et une autre qui n'en a pas. Le jour 2, tous les sujets suivent une formation extinction, mais diffèrent quant à ce qui se passe à l'avance: Deux groupes reçoivent un signal de rappel à réactiver la mémoire crainte devant la formation d'extinction tandis qu'un troisième groupe ne reçoit aucun signal tel. Un groupe reçoit la queue de rappel 10 minutes avant l'extinction, donc ils subissent l'extinction alors que la mémoire est la peur reconsolidating. L'autre groupe reçoit la queue de rappel 6 heures avant l'extinction, donc ils subissent l'extinction après cette fenêtre a sans doute fermé. Le troisième groupe ne reçoit aucun signal de rappel avant de subir l'extinction, donc ils suivent une formation théorique d'extinction standard. Au jour 3, tous les sujets reTurn pour une autre session d'extinction. Leur niveau de peur quand ils voient d'abord la queue conditionné au jour 3 indique si la mémoire crainte demeure. Les trois jours sont effectuées dans le même cadre expérimental, qui est un son atténué, salle à température contrôlée. Les stimuli conditionnés sont des carrés colorés présentés sur un écran d'ordinateur. Nous induire et mesurer la peur avec un léger choc électrique et de conductance de la peau, respectivement, en utilisant un module de système Biopac (voir tableau 1). Un ordinateur de bureau est utilisé pour exécuter le logiciel AcqKnowledge qui permet l'enregistrement et le suivi de la résolution tandis qu'un autre ordinateur est utilisé pour exécuter le script et présenter expérimentale sur le sujet. Les sujets soumis à chacune des trois étapes dans le même temps de la journée.
1. Évaluation peur avec la réponse de conductance de la peau (SCR) - Demande d'électrodes et d'enregistrement
- La salle d'expérimentation devrait idéalement être gardés au chaud (nous avons défini nos chambres quelque part between ° 70 et 75) afin de faciliter fiable et mesurable SCR. Nettoyer le bout des doigts droite ou à gauche du sujet à l'aide d'un coton-tige imbibé d'eau distillée; nous ne recommandons pas cleansors abrasifs car ils peuvent assécher la peau, ce qui perturbe les réponses sudoripares. Veiller à portée de main sont complètement sèches avant l'application de l'électrode.
- Appliquer le gel électrolyte hautement conducteur à deux électrodes (ici nous utilisons «Signa Gel" par Parker Laboratories Inc, et des électrodes reliées à un système d'acquisition de données MP100 faite par BIOPAC Systems). Permettez-gel à augmenter légèrement au-dessus de l'électrode RCS bien et s'assurer qu'il n'ya pas de bulles d'air dans le gel, car cela peut interefere avec le signal SCR.
- Fixer une électrode à l'index et sec de la main entre le premier et phalanges sec, où le signal électrodermale est plus prononcée. S'assurer que les sangles velcro électrodes sont correctement fixés et demander au patient d'indiquer s'ils se sentent tout pulsation dans leurs doigts. Cet indic pulsationAtes les sangles ont été appliquées trop serré, ce qui peut interefere avec le signal de RCS.
- Une fois les électrodes de conductibilité sont garantis, commencer à enregistrer un échantillon de conductance de la peau pendant environ 5 minutes afin de tester signal de électrodermale du sujet. Ici, nous utilisons AcqKnowledge 3.9 du logiciel (dans Biopac Systems Inc) et l'enregistrement des formes d'onde RCS sur un ordinateur de bureau Mac. Nous utilisons un taux d'échantillonnage de 200 Hz, un niveau approprié pour un signal plus lent que RCS, mais les taux plus élevés peuvent être utilisés. L'écran d'enregistrement doit être séparée de l'ordinateur de présentation du script expérimental et hors de la vue du sujet. S'assurer que le sujet a une forte réponse SCR en dirigeant à prendre et de détenir une profonde respiration, ce qui devrait produire une augmentation substantielle des SCR (voir la figure 1 pour un exemple d'une telle réponse).
2. Induction peur avec stimulation légère décharge électrique - Demande d'électrode et de travail Procédure de
- Sur le poignet opposésite de la main avec les électrodes SCR, fixez la barre de stimulateur. Ici, nous utilisons une électrode de barre (EL350 code du produit Biopac Systems Inc), relié à un stimulateur SD9 place Pulse (faite par Technologies herbe, un groupe Atro-Med, Inc produit) avec un cordon de gel de conductance appliqué à chaque des chefs d'électrodes.
- Le déclencheur de choc doit être débranché de la boîte de stimulateur au cours de la procédure de travail en place. Placez la barre sur l'intérieur du poignet, de chaque côté du tendon long palmaire et sécuriser avec du nylon velcro afin de le maintenir en place pendant l'expérience, mais d'assurer la sangle n'est pas trop serré.
- Informer la personne qu'ils recevront chocs manuellement livrés. Commencer à un niveau bas (nous recommandons 20 v), et de travailler à un niveau qu'ils déterminent est inconfortable mais pas douloureux. Nous recommandons la durée du choc d'être fixé à 200 ms, 50 impulsions / sec, un niveau standard utilisé dans une variété de dernières études de conditionnement de la peur 21,24, alors que d'autres ontutilisé des durées légèrement différentes pour induire la même sensation 25,26.
- Déclencher manuellement les chocs, à partir de 20 volts. Continuer déclenchement des chocs simples, en augmentant progressivement l'intensité par incréments 5v, jusqu'à ce que le sujet indique que les chocs sont mal à l'aise, mais pas douloureux. Il devrait y avoir un grand RCS aux chocs (voir Figure 2 pour un exemple de réponse au choc). Noter le niveau choc final et de maintenir ce niveau de tension pour le reste de l'expérience.
3. Jour 1 - Acquisition
- Dirigez le sujet de garder les yeux sur l'écran à tout moment, trouver une position confortable qui ne nécessitera pas le mouvement et respirer naturellement depuis brusques changements respiratoires peuvent interférer avec la SCR. Les deux bras doivent être placés dans une position détendue avec poignets sur la table à / bureau en face de l'objet ou sur les bras d'un fauteuil confortable. Informer le sujet que l'on verra des stimuli visuels à l'écranet de recevoir des chocs occasionnels. Demandez au sujet de contrôler la relation entre les stimuli qu'ils voient et quand un choc est reçu.
- Branchez la gâchette en arrière dans le stimulateur et changer le réglage de déclenchement sur AcqKnowledge de OFF sur EXTERNAL. Une fois que le sujet est prêt à commencer, placez le retour de tension au niveau enregistré, et lancer le fichier de AcqKnowledge et le script expérimental. Ici, nous utilisons E-prime la version du logiciel 2.0 de Software Tools psychologie, Inc
- Lors de la session d'acquisition, un stimulus conditionné (ici, un carré jaune) co-termine avec un résultat aversif (ici, un léger choc) sur un sous-ensemble (38%) des essais; nous nous référons à ce que notre + CS. Le stimulus conditionné autre (ici, un carré bleu) n'est jamais jumelé avec les États-Unis; nous nous référons à ce que notre CS-. Nous utilisons renforcement partiel de ralentir l'apprentissage de précédents travaux ont montré que les résultats de renfort 100% en extinction rapide une fois que les sujets réalisent la relation entre leCS + et Etats-Unis ont changé 21. Un paradigme renforcement partiel nous permet également de limiter notre analyse à la non-renforcées CS + essais, ce qui exclut CS + SCR connexes qui sont potentiellement contaminés par des réponses physiologiques à choquer (voir la figure 3 pour des exemples de SCR climatisées et inconditionné à chaque type CS).
- Stimuli conditionnés (CS) sont présentés pendant 4 sec. Il ya un sec 10-12 variable aléatoire inter-essai-intervalle (ITI), au cours de laquelle les sujets afficher un écran noir avec une croix de fixation blanche au centre. Chaque séance commence par un écran indiquant l'expérience est sur le point de démarrer (* READY *) et se termine avec un écran indiquant qu'ils avaient réussi cette partie de l'expérience (* VOUS AVEZ TERMINE CETTE PARTIE DE L'EXPÉRIENCE *). Lors de l'acquisition, un nombre total de 10 essais non renforcés essais + CS et 10 CS-essais sont présentés en plus des 6 CS + essais qui sont renforcés par le choc.
- Produire deux volets distincts pseudo-randomized commandes pour l'ensemble de l'expérience de sorte qu'aucun essai de type (CS +, CS ou CS-+ US) répète plus de deux fois. Au sein de chaque ordre, contrebalancer les couleurs du CS. Cela devrait aboutir à 4 ordres dont l'attribution est aléatoire entre les individus au sein de chaque groupe. Nous recommandons d'inclure au moins une occurrence de procès consécutifs renforcés CS + États-Unis pour empêcher les sujets de supposer qu'ils ne recevront jamais de chocs consécutifs (voir le tableau 2 pour un exemple de commande à l'essai).
4. Jour 2 - Formation réactivation et l'extinction
Répartition Sujet:
Au hasard diviser tous les sujets qui ont fait preuve d'acquisition adéquate de la peur du jour 1 (voir critères d'exclusion ci-dessous) en trois groupes:
Groupe 1 (réactivation-10 min): reçoit une formation 10 minutes après l'extinction de récupération dans la fenêtre de reconsolidation
Groupe2 (réactivation h-6): reçoit une formation d'extinction après 6 heures d'extraction à l'extérieur de la fenêtre de reconsolidation
Groupe 3 (non-réactivation): reçoit une formation théorique d'extinction standard sans récupération
- À l'arrivée, chaque sujet doit être mis en place que par étapes de 1 à 2,2, avec le jeu de niveau de choc même le Jour 1 (aucun travail complémentaire est requise). Il n'y a pas de nouvelles instructions. Le sujet doit s'asseoir confortablement et de prêter attention aux stimuli présentés, de même que la veille.
- Sujets dans les groupes de réactivation (10 min à la fois et 6 h) soumettre à un seul, non armé de la présentation + CS (pas de choc) suivie d'une pause de 10-min. Les sujets du groupe non-réactivation soumettre à la procédure mise en place, mais ensuite aller directement à la pause sans réactivation de la session. Pendant la pause, arrêter l'enregistrement AcqKnowledge du SCR, tournez la tension stimulateur à l'attention des sujets zéro et direct »sur un écran séparé qui a uneémission de télévision pré-sélectionné (par exemple, ici, nous avons utilisé une partie choisie au hasard ~ 10 min d'un "Simpsons" épisode). Les sujets seront le regarder pendant 10 minutes alors que toutes les électrodes restent joint.
- Après la pause, la réactivation du groupe-10 min procède à la formation d'extinction. Les sujets du retour réactivation groupe-6 h pour la formation d'extinction 6 heures plus tard. Pour les sujets non-réactivation, la moitié immédiatement suivre une formation extinction, et le retour moitié 6 heures plus tard pour la formation. Ce groupe contrôle pour le rappel de repère, ainsi que différents laps de temps entre la formation et la réactivation d'extinction dans chaque groupe rappel. En outre, étant donné que les sujets du groupe réactivation-6 h pourrait subir l'extinction, soit dans l'après-midi ou le soir (prévoir suffisamment de temps qui doit s'écouler après la réactivation), il est important de lancer des sujets de la réactivation min-10 et sans réactivation de groupe le matin , après-midi et le soir, pour permettre une distribution uniforme de sujets à chaque moment de la journée.
- Durment l'extinction, un nombre total de 10 essais non armé CS + et 11 CS-essais sont présentés à chaque groupe de réactivation. Depuis le CS-ne sont pas présentés lors de la session de réactivation, une présentation supplémentaire devrait être ajoutée à la session d'extinction si tous les CSS sont présentés un nombre égal de fois pendant le Jour 2. Le groupe des non-réactivation devrait recevoir 11 non armé présentation de chaque CS.
- Lors de la session d'extinction, de reprendre le fichier d'enregistrement AcqKnowledge et retourner tension stimulateur au niveau fixé. Demander au sujet d'assister à l'écran expérimental où un script d'extinction est en attente sur l'écran * * READY. Un rappel des orientations de la veille est souvent utile. Reprendre avec le script de formation extinction, par laquelle le sujet reçoit deux présentations répétées du CS sans choc (voir le tableau 2).
5. Jour 3 - Essai de récupération spontanée peur
- Si le sujet démontre l'apprentissage d'extinction approprié (voirCritères d'exclusion ci-dessous), ils doivent retourner au laboratoire 24 heures après leur session d'extinction. À leur arrivée, ils doivent être mis en place selon les étapes 1 et 2,2; tension est réglé sur le même plan que la session d'acquisition. Rappelez sujets des directions des jours précédents.
- Chaque sujet serait l'objet d'une session de re-extinction, où ils sont admis à 10 présentations non renforcées à la fois de CSS (voir le tableau 2) afin d'évaluer la mesure dans laquelle les réponses de peur de récupérer en raison de l'écoulement du temps. Le premier procès au jour 3 devrait être un extra-CS (voir tableau 3) et est négligée en raison de la réponse d'orientation au début de la session. (La même chose peut être fait au début du Jour 2, cependant, puisque seules les données provenant de l'acquisition fin est utilisé pour évaluer l'apprentissage d'extinction (voir Critères d'exclusion ci-dessous) et, en dernière analyse, cette recommandation n'est pas critique pour le Jour 2.) Le prochain procès au jour 3 devrait être contrebalancée entre le CS + et CS-. Sprécupération ontaneous est mesurée en soustrayant le RCS lors du premier procès CS + pendant le re-extinction de l'essai CS + dernier cours de l'extinction.
- A la fin de la session, le sujet est un compte rendu et payé 40 $ avant le départ.
6. Pré-traitement des données & Scoring RCS
- Analyser les données hors ligne en utilisant le logiciel AcqKnowledge. Ici, nous avons fixé trois paramètres à mesurer de notre tableau de données: t (temps), delta-t (temps de latence), et pp (crête à crête). Ces mesures d'enregistrer l'amplitude point dans le temps, la latence et la crête de la SCR sélectionné. Commencer un nouveau graphique de journal pour enregistrer vos mesures. Formes d'onde passe à travers un filtre passe-bas afin de réduire les données à haute fréquence en sélectionnant Transformer → Filtre numérique → FIR → passe-bas (nous utilisons les paramètres par défaut fournis dans le Reconnaître Software Guide d': fréquence de coupure = 25; 32 coefficients; filtre entier ondes). Lisser les données afin de réduire le bruit en sélectiontion Transformer → lissage → transformée de forme d'onde entière (nous utilisons les paramètres par défaut fournis dans le Reconnaître Software Guide d': lissage valeur moyenne; facteur de lissage = 3 échantillons; filtre à onde entière, mais avec des fréquences d'échantillonnage plus élevées ou de bruit accru, le facteur de lissage peut être augmenté).
- Sélectionnez une réponse conductance de la peau au cours de chaque essai en prenant la base de la différence de pointe pour la plus grande forme d'onde (en microsiemens, ms) qui commence dans l'apparition de 0,5 à 4,5 sec de relance fenêtre ci-dessous. Le début de la SCR doit débuter dans cette fenêtre pour être considérée comme une réponse aux stimuli spécifiques, mais peut prendre plus de temps à crête. SCR peuvent être enregistrées jusqu'à ce qu'ils atteignent l'amplitude de crête, cependant, les réponses qui pointe après 5 secondes ne sont pas considérés comme stimulus spécifique et devrait être écartée. C'est précisément pourquoi les essais renforcés doivent pas être enregistrées: une SCR qui est toujours un pic à la fin de l'essai peut être entachée par le choc et produire des augmentations ultérieures des SCR qui sont not lié à la CS lui-même.
- Un critère pic de réponse de 0,02 ms devraient être utilisés, les réponses ci-dessous ce critère sont généralement considérées comme du bruit et codé à zéro. Après la notation, tous les essais non renforcés pour chaque sujet devrait être divisé par la moyenne ce sujet respectif réponse américaine. Cette valeur est calculée en prenant la moyenne RCS pour tous les essais de choc à travers la session d'acquisition et tient compte des différences individuelles de réactivité aux chocs sujet. Enfin, tous les essais doivent être transformé racine carrée de réduire l'asymétrie.
Timing
Jour 1
Préparation: 5-7 min
Script d'acquisition: ≈ 9 min
Total: 15 min
Jour 2
Préparation: 5-7 min
Script Réactivation: ≈ 30 s
Pause: 10 min
: ≈ 5,5 min
Total: 20 min
Jour 3
Préparation: 5-7 min
Re-extinction du Script: ≈ 6,5 min
Total: 15 min
7. Les résultats représentatifs pour chaque groupe
A la fin du jour 1 (acquisition), les sujets doivent démontrer différentiel SCR pour les CS, c'est plus répondre à la CS + que comparer à la CS-(voir la figure 4, l'acquisition, pour un exemple de sujets individuels). À la fin du jour 2 (réactivation / extinction), cette réponse différentielle devrait diminuer, de sorte qu'il n'y a pas plus de différence entre le CS + et CS-(voir la figure 4, l'extinction, pour un exemple de sujets individuels). Lors de l'examen guérison spontanée au jour 3, nous nous attendons à voir un manque de récupération de la peur dans le groupe réactivation-10 minpuisque ce groupe a reçu une formation d'extinction dans la fenêtre de reconsolidation, permettant ainsi la trace mnésique d'origine pour reconsolider avec cette nouvelle information, et de prévenir la reprise des réponses de peur (voir la figure 4, le panneau supérieur, pour un exemple d'un sujet individuel). Nous nous attendons à voir une récupération substantielle de la peur, cependant, pour l'+ CS (pas CS-) dans le groupe réactivation-6 h qui ont reçu une formation extinction en dehors de la fenêtre de la reconsolidation (voir la figure 4, panneau central, pour un exemple d'un individu sujet), ainsi que le groupe des non-réactivation qui ont reçu une formation théorique d'extinction standard (voir la figure 4, panneau inférieur, par exemple à partir d'un sujet individuel).

Figure 1. Exemple de RCS au cours électrode mis en place. Noir, flèches verticales indiquent le moment où l'objet a été chargé de prendreune respiration profonde qui a entraîné une augmentation marquée de la SCR. Cliquez ici pour agrandir la figure .

Figure 2. Exemple de RCS au cours du choc travail durant la procédure. Flèches noires verticales indiquent moment où choc a été administré. Les flèches grises indiquent le pic de hausse conductance de la peau en réponse au choc. Cliquez ici pour agrandir la figure .

Figure 3: Exemple de réponse conditionnée (RC) pour le début de la CS + suivie d'une plus grande réponse inconditionnée (UR) pour la livraison de choc (États-Unis);. Procès est celui d'un CS-. Les flèches grises indiquent le déclenchement CS et offset, noir indic flèchesmangé la livraison des États-Unis. Cliquez ici pour agrandir la figure .

Figure 4 Exemple de récupération d'acquisition, d'extinction et spontanée chez un sujet individuel de chaque condition expérimentale (panneau supérieur: réactivation-10 min; panneau central: la réactivation-6 h; panneau inférieur: pas de réactivation)..

Tableau 1. Tableau des produits et équipements pertinents.

Protocole Reconsolidation Tableau 2. Et le calendrier.

Tableau 3. Un exemple de commande à l'essai pour chaque phase de laexpérience. Notez un extra-CS doit être ajoutée à jour 2.2 (extinction) dans les deux groupes de rappel afin de tenir compte de la réactivation de l'+ CS. Le premier procès sur CS-Jour 3 (notée avec un fond gris) est ignoré en raison de la réponse d'orientation au début de la session.
Mise en place expérimentale
L'installation comprend un PC fonctionnant sous E-prime, un Mac exécutant reconnaître, un système MP100 Biopac, et une boîte de choc. En ligne de code est programmé dans le script E-prime pour communiquer avec le logiciel Reconnaître et la boîte de choc. Cela permet à E-prime d'envoyer des signaux d'accusé de réception onsets événement dénotant, et les signaux à la boîte de choc pour déclencher l'administration choc. La sortie de l'E-prime est envoyé via un port imprimante au système Biopac, qui à son tour envoie le signal d'événement à la physiologie d'enregistrement Mac avec Reconnaître via une connexion USB fourni avec le système Biopac, ainsi que la boîte de choc (voir Tableau 1 pour les produitsduit d'informations).
Critères d'exclusion
Les sujets doivent être exclus avant de terminer toutes les sessions expérimentales ou à partir de l'analyse des données si elles démontrent une des situations suivantes:
- Le défaut de montrer détectable ou fiable RCS - lors de l'application et de tester la réaction conductance de la peau, les sujets peuvent démontrer plat RCS. Si cela se produit, il est recommandé d'attendre 5 min de plus que les réponses ne soient pas immédiatement émerger, ou vérifiez les bulles avec du gel de conductance (dans ce cas, les électrodes doivent être enlevés, nettoyés et remplis). Les sujets qui ont RCS plate réponse, même après ces stratégies de dépannage devrait être dispensé de l'expérience.
- L'incapacité à démontrer l'acquisition de la réaction de peur (le Jour 1): différentiel RCS à l'+ CS et CS-à la fin de la session d'acquisition (moyenne de la seconde moitié des essais d'acquisition) qui est dans la mauvaise direction (c.-à-CS-> CS +) ou qui est trop petit pour Conclude apprentissage s'est produit (par exemple, la différence est inférieure à 0,1 ms).
- L'incapacité à démontrer l'extinction de la réaction de peur (le Jour 2): différentiel RCS à l'+ CS et CS-à la fin de la session d'extinction (sur la dernière épreuve) qui est supérieure à 0,1 ms.