Ischémie Photothrombotic: A photochimique modèle de lésion corticale minimalement invasive et reproductible pour les études de course de souris

Vivien Labat-gest; Simone Tomasi

doi:10.3791/50370

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Article de méthode

Ischémie Photothrombotic: A photochimique modèle de lésion corticale minimalement invasive et reproductible pour les études de course de souris

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DOI :

10.3791/50370

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9 juin 2013

Vivien Labat-gest¹^,²^,³ , Simone Tomasi²^,³^,⁴

¹Department of Neuroscience, University of Turin , ²Neuroscience Institute of Turin (NIT), University of Turin , ³Neuroscience Institute Cavalieri-Ottolenghi (NICO), University of Turin , ⁴Department of Anatomy, Pharmacology and Forensic Medicine, University of Turin

Dans cet article

Résumé

Photothrombosis est une technique rapide, peu invasive pour induire petite et bien délimitée du myocarde dans les domaines d'intérêt de façon très reproductible. Il est particulièrement adapté pour étudier les réponses cellulaires et moléculaires qui sous-tendent la plasticité du cerveau chez les souris transgéniques.

Résumé

Le modèle de course photothrombotic a pour but d'induire une altération ischémique dans une zone corticale donnée au moyen de photo-activation d'un colorant sensible à la lumière précédemment injecté. Après illumination, le colorant est activé et produit de l'oxygène singulet qui endommage les composants de membranes de cellules endothéliales, de l'agrégation des plaquettes et la formation subséquente de thrombus, qui détermine la suite de l'interruption de la circulation sanguine locale. Cette approche, initialement proposé par Rosenblum et El-Sabban, en 1977, a ensuite été améliorée par Watson en 1985 dans le cerveau de rat et a jeté les bases du modèle actuel. En outre, la disponibilité accrue des lignées de souris transgéniques a également contribué à susciter l'intérêt sur le modèle de photothrombosis. En bref, un colorant photosensible (rose Bengale) est injecté par voie intrapéritonéale et pénètre dans la circulation sanguine. Lorsqu'ils sont éclairés par une source de lumière froide, le colorant devient activé et induit des lésions endothéliales avec l'activation des plaquettes et de la thrombose, entraînant localel'interruption de la circulation sanguine. La source de lumière peut être appliquée sur le crâne intact sans avoir besoin d'une craniotomie, ce qui permet un ciblage d'une zone corticale d'intérêt de façon reproductible et non invasive. La souris est ensuite suturée et autorisé à se réveiller. L'évaluation des lésions ischémiques peut être rapidement accompli par le chlorure de triphényl-tétrazolium ou coloration au violet de crésyl. Cette technique produit un infarctus de frontières bien délimitées petite taille et, ce qui est très avantageux pour la caractérisation des cellules précises ou des études fonctionnelles. En outre, il est particulièrement adapté pour étudier les réponses cellulaires et moléculaires qui sous-tendent la plasticité du cerveau chez les souris transgéniques.

Introduction

Au début du 21ème siècle, accident vasculaire cérébral ischémique est une maladie dévastatrice qui représente la deuxième cause d'invalidité à long terme ¹ et la deuxième cause de mortalité dans le monde de la course, dans lequel représentait environ 5,7 millions de décès en 2004 ^2. En dépit des nombreux efforts qui ont été mis en, il n'y a toujours pas de traitement efficace pour améliorer la récupération fonctionnelle après un AVC. Les modèles animaux d'AVC sont largement utilisés dans le domaine de la recherche sur l'AVC, car ils permettent la modélisation de la physiopathologie des lésions ischémiques et de tester l'effic....