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Article de méthode

Un modèle de souris induite par laser de l'hypertension oculaire chronique pour caractériser les défauts d'apparence

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DOI :

10.3791/50440

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14 août 2013

Dans cet article

Résumé

Hypertension oculaire chronique est induite en utilisant la photocoagulation au laser du trabéculum dans les yeux de souris. La pression intraoculaire (PIO) est élevée pendant plusieurs mois après le traitement au laser. La diminution de l'acuité visuelle et la sensibilité au contraste des animaux expérimentaux sont surveillés en utilisant le test optomoteur.

Résumé

Le glaucome, souvent associé à une pression intraoculaire (PIO) élevée, est l'une des principales causes de cécité. Nous avons cherché à établir un modèle de souris de l'hypertension oculaire pour imiter haute tension humaine glaucome. Ici illumination laser est appliqué sur le limbe cornéen à photocoagulate l'écoulement aqueux, induisant fermeture de l'angle. Les variations de pression intraoculaire sont surveillés à l'aide d'un tonomètre à rebond avant et après le traitement au laser. Un test de comportement optomoteur est utilisé pour mesurer les changements correspondants dans la capacité visuelle. Le résultat représentatif d'une souris qui a développé élévation de la PIO soutenue après l'illumination laser est affiché. Une diminution de l'acuité visuelle et la sensibilité au contraste est observé dans ce oculaire souris hypertensive. Ensemble, notre étude introduit un système modèle intéressant d'étudier la dégénérescence neuronale et les mécanismes moléculaires sous-jacents chez les souris glaucomateux.

Protocole

Procédures

C57BL/6J souris (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) sont portées à la Facilité de protection des animaux de l'Université Northwestern. Tous les animaux sont utilisés conformément aux protocoles approuvés par Northwestern University Institutional Animal Care et du Comité de l'utilisation et conforme aux lignes directrices sur l'utilisation des animaux en recherche en neurosciences du NIH.

1. La photocoagulation au laser

La procédure de photocoagulation laser est modifiée à partir de protocoles publiés précédemment 5-7.

  1. Anesthésier une vieil....

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Résultats

Comme décrit dans les procédures, illumination laser est dirigé vers le trabéculum dans la région limbique à photocoagulate l'écoulement aqueux, provoquant la fermeture de l'angle (figure 1). La plupart des yeux sérigraphiés au laser ne présentaient pas de dommages physiques importants, le détachement de pigment ou d'une infection, en accord avec les résultats antérieurs 6. Quand un petit groupe de souris (moins de 5% de tous les animaux sérigraphiés au laser) a montré des signes .......

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Discussion

Nous rapportons ci-dessus que l'hypertension oculaire soutenue peut être induite par illumination laser dans les yeux de souris. Par rapport au modèle d'injection saline 18 et le modèle de cautérisation de la veine 11 qui exigent tous deux de vastes compétences de microchirurgie, l'illumination laser est relativement simple et facile à réaliser. Habituellement, nous pouvons réaliser l'illumination laser pour 4-6 souris dans 2-3 heures. Les étapes essentielles pour atteindre élévatio.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun intérêt financier concurrents.

Les auteurs sont des employés à temps plein de l'Université Northwestern.

Les auteurs n'a reçu aucun financement qui ont été fournis par les entreprises qui produisent des réactifs et des instruments utilisés dans le présent article.

Remerciements

Le travail présenté dans ce document a été soutenu par le Dr Douglas H. Johnson Award pour recherche sur le glaucome de la Fondation américaine de la Santé Assistance (XL), la Grève Scholar Award spécial William & Mary de la recherche pour prévenir la cécité (XL), le Illinois Société pour la Prévention de la Cécité (HC) et NIH R01EY019034 (XL).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Réactif
moxifloxacineAlcon Labs, Inc.NDC 0065-4013-030,5 %, Rx uniquement
Chlorhydrate de proparacaïneBausch LombNDC 24208-730-060,5 %, Rx uniquement
Solution ophtalmique USPBausch LombNDC 24208-730-06,5%, Rx uniquement
kétamineButler Schein Santé animaleNDC 11695-0550-1100 mg / kg
xylazineLLOYD Inc. de l’IowaNADA 139-23610 mg / kg
solution de sulfate d’atropineAlcon Labs, Inc.NDC 61314-303-021 %, Rx uniquement
Equipment
Slit Lamp, TOPCON Visual Systems IncSL-3Epowered by PS-30A
OptoMotry 1.8.0 virtualCerebralMechanics Inc.
système d’essais optocinétiquesCerebralMechanics Inc.
Tonomètre, TonoLab, pour sourisColonial Medical Supply
Coussin chauffantSunbeam Products Inc722-810
Laser à argon Coherent IncUltima 2000SE
DECAPICONE Porte-cône en plastique Braintree Sci Inc.MDC-200pour souris

Références

  1. Gupta, N., Yucel, Y. H. Glaucoma as a neurodegenerative disease. Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).
  2. Quigley, H. A. Neuronal death in glaucoma. Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).
  3. McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W.

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Réimpressions et autorisations

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