Différences Évaluation de la capacité concurrentielle de sperme dans Drosophila

Résumé

Différentiel capacité concurrentielle des spermatozoïdes chez les Drosophila Mâles avec des génotypes distincts peuvent être vérifiées par des expériences double contact. Chacune de ces expériences implique l'un des hommes d'intérêts et un mâle de référence. Marqueurs facilement identifiables dans la descendance permettent d'inférence de la fraction d'individus engendrés par chaque mâle.

Résumé

La concurrence entre les mâles conspécifiques pour féconder l'ovule est l'un des mécanismes de la sélection sexuelle, à savoir la sélection qui fonctionne sur la maximisation du nombre d'événements d'accouplement réussi plutôt que sur la survie et la viabilité maximisation ^1. Compétition spermatique représente la compétition entre les mâles après accouplement avec la même femelle ^2, dans lequel leur sperme sont une coïncidence dans le temps et l'espace. Ce phénomène a été rapporté dans plusieurs espèces de plantes et d'animaux ^3. Par exemple, sauvage capturé D. melanogaster femelles contiennent généralement des spermatozoïdes 2-3 mâles ^4. Les spermatozoïdes sont stockés dans des organes spécialisés ayant une capacité de stockage limitée, ce qui pourrait mener à la concurrence directe du sperme de différents hommes ^2,5.

En comparant sperme compétitivité des mâles différents types d'intérêts (mâles expérimentaux) a été réalisée à travers contrôlée expérimentale double accouplementts dans le laboratoire ^6,7. En bref, une seule femelle est exposé à deux mâles différents consécutivement, un mâle expérimental et un mâle de référence croisée accouplement. Le même schéma d'accouplement est suivie par d'autres types d'expérimentation, facilitant ainsi la comparaison indirecte de la capacité concurrentielle de leur sperme à travers une référence commune. La fraction d'individus engendrés par les expériences et les mâles référence est identifié en utilisant des marqueurs, qui permet d'estimer la capacité concurrentielle du sperme en utilisant des expressions mathématiques simples ^7,8. En outre, la capacité concurrentielle sperme peut être estimée à deux scénarios différents selon que le mâle expérimentale est la deuxième ou la première à s'accoupler (infraction et le dosage de la défense, respectivement) ^9, qui est supposé être le reflet de différents attributs de compétences.

Nous décrivons ici une approche qui permet d'interroger le rôle des différents facteurs génétiques qui sous-tendent putativement tIl phénomène de la capacité concurrentielle sperme dans D. melanogaster.

Introduction

Depuis Geoff Parker a noté la prévalence de la compétition spermatique chez les insectes et ses implications évolutives ^2, une vague d'études chez la drosophile et d'autres espèces ont tenté de faire la lumière sur ce phénomène à différents niveaux. Quelques exemples de domaines d'intérêt ont fait l'étude de sa variation dans les populations naturelles ^9,10, son architecture génétique et la pertinence des facteurs sous-jacents génétiques ^11-14, et son rôle dans la coévolution entre les sexes ^15,16 conduite. Dans D. melanogaster femelles, la capacité limitée des organes de sperme stockage sp....

Protocole

Expériences à petite échelle doivent être effectuées afin de se familiariser avec la procédure.

1. Collecte femelles vierges et les mâles Naïve

La version la plus simple de l'expérience décrite se compose de quatre types de croisements initiaux, qui impliquent la combinaison suivante des adultes: A) W individus ¹¹¹⁸ afin de recueillir des femelles vierges, b) Oregon-R individus afin de recueillir les mâles de référence naïfs, c ) P {sw} mâles homozygotes et les femelles vierges à partir d'une ligne de commande qui porte l'organisation de type sauvage de Sdic<....

Résultats

Le tableau 2 résume quelques traits saillants de deux expériences d'infractions (essais 1 et 2) dans laquelle D. melanogaster mâles expérimentaux avec et sans (Type I et II, respectivement) un cluster Sdic fonctionnel sont comparées ^14. Après prise en compte des incidences différentes rencontrées avec certaines répliques, 58-83% des femelles ont été trouvés à être informatif et donc les comptes de la paternité de leur progéniture pourraient être utilisées pour le calcul de P.......

Discussion

Nous avons décrit le protocole expérimental pour évaluer les différences dans la contribution relative des organismes génétiquement distincte D. melanogaster mâles à la descendance dans des expériences contrôlées en double accouplement ^7,8. Cela a été fait dans le cadre d'un facteur génétique hypothèse d'influer sur la capacité concurrentielle sperme et il a été illustré dans le dosage de l'infraction même si une procédure similaire s'applique à l'analyse de la défense (Fi.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Tube en latex ambré	VWR	62996-473	1/4 pouce ID, 1/6 pouce Wall
1 ml pointes de filtre XL graduées	USA Scientific	1126-7810	N’importe quelle pointe de pipette de 1 ml peut être utilisée, mais les pointes semi-transparentes et longues sont meilleures comme récepteur de mouches. Si des pointes de filtre sont utilisées, sortez et jetez le filtre à l’aide d’une aiguille après avoir coupé l’extrémité de la pointe Parafilm
	Sigma	P-7793
Mesh Fabric			Fin et lisse
Stéréomicroscope	Leica	S6D
CO2 Tank	Airgas	CD-50	Utilisez FlyNap (Carolina Biological Supply Company) comme alternative si le CO2 n’est pas disponible
FlyStuff Clapet de pied, système complet	Genesee Scientific	59-121C	Pas nécessaire si FlyNap est utilisé
Flacons en plastique	Genesee Scientific	32-109	Livré avec des plateaux en carton qui peuvent être réutilisés pour contenir des flacons
Boules de coton	Fisher Scientific	AS-212
Levure sèche active	Red Star		Trouvée en épicerie générale
Marqueurs			Différentes couleurs peuvent être utilisées pour marquer différents génotypes