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Séché Blood Spot Collection de biomarqueurs de santé pour maximiser la participation à des études de la population

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DOI :

10.3791/50973

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28 janvier 2014

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1Center for Population and Development Studies, Harvard School of Public Health, 2Department of Medicine, Brigham and Women's Hospital, 3Division of Sleep Medicine, Harvard Medical School, 4Department of Biobehavioral Health, Pennsylvania State University

Dans cet article

Résumé

Les biomarqueurs sont des indicateurs biologiques directement mesurées de la maladie ou de la santé. Dans la population et les sciences sociales, les biomarqueurs doivent être faciles à obtenir, le transport, et à analyser. Séché tache de sang (DBS) collection répond à ce besoin, peuvent être recueillies sur le terrain avec des taux de réponse élevés et analysé pour une variété de biomarqueurs.

Résumé

Les biomarqueurs sont des indicateurs biologiques directement mesurées de la maladie, la santé, les expositions, ou d'autres informations biologiques. Dans la population et les sciences sociales, les biomarqueurs doivent être faciles à obtenir, le transport, et à analyser. Taches de sang séché répondre à ce besoin, et peuvent être recueillies sur le terrain avec des taux de réponse élevés. Ces éléments sont particulièrement importants dans la conception des études longitudinales, y compris des interventions où l'attrition est essentielle pour éviter, et des taux de réponse élevés améliorent l'interprétation des résultats. Collecte d'échantillons secs de tache de sang est simple, rapide, relativement indolore, moins invasive, puis ponction veineuse, et nécessite des besoins de stockage de champ minimale (échantillons n'ont pas besoin d'être immédiatement congelé et peut être stocké pendant une longue période de temps dans un environnement de congélateur stable avant test). Les échantillons peuvent être analysés pour une variété d'analytes différents, y compris le cholestérol, la protéine C-réactive, l'hémoglobine glycosylée, de nombreuses cytokines, et outres analytes, ainsi que de fournir le matériel génétique. Collection DBS est dépeinte comme employé dans plusieurs études récentes.

Introduction

Les biomarqueurs peuvent fournir des informations précieuses sur les processus biologiques normaux ou pathogènes qui peuvent contribuer à la maladie cliniquement identifiables 1. Dans les milieux de la recherche, des taches de sang séché (DBS) sont de plus en plus préférée à une ponction veineuse comme une méthode de collecte des biomarqueurs dans le sang total. Collection DBS est simple, relativement indolore, moins invasive puis la ponction veineuse, et nécessite des exigences de stockage minimales (par exemple les échantillons n'ont pas besoin d'être immédiatement congelé et peut être stocké pendant une longue période de temps dans un milieu de congélation stable avant le dosage). Échantillons DBS peuvent être testés pour une variété d'analytes différents, y compris le cholestérol, la protéine C-réactive, l'hémoglobine glycosylée, les anticorps du virus d'Epstein-Barr, et de plusieurs cytokines.

Ponction veineuse a longtemps été la norme d'or pour la collecte de biomarqueurs dans le sang. Toutefois, l'obtention, le stockage et l'expédition des échantillons de sang nécessite adherenCE à un certain nombre de protocoles et codes de santé, ce qui peut ne pas être possible dans certains protocoles de recherche. Phlebotomists doivent être officiellement certifiés pour la ponction veineuse, tandis que les procédures d'échantillonnage SRD sont plus simples et ne nécessitent pas une certification officielle. Collecte de sang veineux nécessite également plus de matériel que le fait collection DBS (c.-à-aiguilles, tubes, tourniquets), et des efforts plus après la collecte. Des échantillons de ponction veineuse doivent être traités (par exemple le sérum ou le plasma extrait de l'échantillon de sang par centrifugation ou par abandon à la température ambiante pendant une période de temps donnée) et on les congèle entre -20 ° C et -70 ° C immédiatement, afin d'éviter la dégradation des analytes , tandis que les échantillons DBS doivent simplement être séchés à l'air et peuvent être conservés à température ambiante pendant une semaine ou plus en fonction de l'analyte, avant le transfert à un congélateur 2. Échantillons DBS sont moins coûteuses à collecter que les échantillons de ponction veineuse pour des raisons décrites ci-dessus. Échantillons DBS aussiprendre moins de place, réduisant les coûts de transport et de stockage avant le test.

L'utilisation de la salive comme biomarqueur est devenu essentiel dans les études biobehavioral. La salive est une méthode simple, non invasive pour recueillir des biomarqueurs et est devenu la norme pour les travaux sur le terrain visant à mesurer le cortisol ou la cotinine 3-5. L'urine est un autre spécimen qui peuvent être recueillies de manière non invasive et peuvent être utilisés dans des études de niveau de la population pour les essais de la mélatonine ou de la toxicologie. Bien que l'urine et la salive offrent simple des procédures de collecte qui sont en mesure de remplir par les participants eux-mêmes, tous les analytes peuvent être mesurés dans ces milieux.

DBS offrent un moyen simple, rentable, alternative à la ponction veineuse et deviennent un outil de recherche de plus en plus mis en œuvre dans le domaine et étudie population 6.

Protocole

Le protocole suivant a été approuvé par le comité d'examen institutionnel applicable et a été menée en conformité avec la Déclaration d'Helsinki.

Une. Avant de commencer: Standard Precuations

Assurer tout le personnel de prélèvement des échantillons ont dépassé le NIOSH nécessaire à diffusion hématogène d'agents pathogènes (BBP) de formation.

  1. Contrôles d'ingénierie
    1. Utilisez Food and Drug Administration a approuvé boîtes de sécurité de disposer de, à usage unique stériles lancettes utilisées. Utilisez un baril de biodéchets correctement étiquetés pour tout autre matériel qui entre en contact avec le matériel éventuellement infectés.
    2. Ne pas trop remplir le récipient pour objets tranchants. Ne remplissez un contenant pour objets pointus à 3/4 capacité avant de remplacer le récipient pour éviter les blessures. Il est un indicateur de plénitude compartimentée, sur chaque conteneur de dièses.
    3. Ne jetez des objets tranchants dans le récipient pour objets tranchants. Ne pas utiliser le conteneur pour instruments tranchants pour tout otsa déchets.
    4. Éliminer toute matière nonsharp qui entre en contact avec un potentiel BBP dans un baril de biodéchets correctement étiquetés.
  2. Équipement de protection individuelle (EPI)
    1. Toujours utiliser correctement les EPI destinés à protéger contre l'infection du BBP. EPI utilisés pendant la collecte de DBS comprend des gants, des blouses de laboratoire, des lunettes de protection, des pantalons longs et des chaussures fermées embout.
    2. Porter des gants pour manipuler du sang, ou tout ce qui a contacté le sang ou d'autres matières potentiellement infectieuses (OPIMS). Les gants doivent pas être trop serré ni trop lâche, car cela pourrait entraver le processus de "traite" (qui sera décrit plus tard). Ne pas porter de bagues tout en collectant des taches de sang car ils pourraient percer le gant.
    3. Porter une blouse de laboratoire pour protéger la peau et les vêtements du sang et OPIMS. Une blouse de laboratoire qui ont été en contact avec un BBP doivent être lavés dans une solution à 10% de javel / eau avant de les réutiliser. Indépendamment de l'exposition, la blouse de laboratoire doivent être lavés régulièrement pour le garder cpencher.
    4. Portez des chaussures fermées doigts pour protéger les pieds contre possible contact avec le sang et OPIMS.
    5. Si vous le souhaitez, porter des lunettes pour se protéger contre un éventuel contact avec le sang et OPIMS en raison de l'éclaboussure.
    6. Pour maintenir la propreté de l'espace de travail, enlever tous les EPI avant de quitter la zone de travail pour éviter de contaminer les éléments en dehors de la zone de laboratoire.
  3. contrôle des pratiques de travail
    1. Se laver les mains avec de l'eau chaude et au savon pendant 20 secondes avant et après le contact physique avec chaque participant. Utilisez une serviette pour éteindre l'eau courante. Si un évier n'est pas disponible, utiliser un désinfectant pour les mains d'au moins 60% d'alcool.
    2. Indépendamment de la possibilité de se laver les mains, utiliser de l'alcool désinfectant pour les mains avant de l'appliquer et après le retrait des gants. Utilisez suffisamment de désinfectant pour couvrir toutes les surfaces des deux mains et frottez les mains ensemble jusqu'à sec. Ne pas rincer ou essuyer les mains sèches avec une serviette car cela réduirait l'efficacité du désinfectant.
    3. Ne pas manger ouboire ou appliquer des lentilles de maquillage ou de contact dans les zones de collecte de sang. Exposition personnelle à la PDH pourrait se produire à travers ces chemins qui sont des liaisons directes vers les muqueuses.
    4. Ne pas manipuler des produits à risques sans gants et ne pas manipuler un matériau non dangereux avec des gants qui ont déjà touché matières infectieuses.
  4. Ménage bon
    Un bon entretien continuera à aider à protéger contre l'exposition à une BBP et permettra d'éviter la contamination croisée de l'environnement.
    1. Utilisez virucides des lingettes désinfectantes microbiennes à bien des endroits propres contaminés lors de la collecte DBS.
    2. Gardez un danger biologique ou des déchets contaminés séparément des ordures ménagères, des matériaux contaminés sont ceux qui ont du sang visible ou OPIM sur eux.
  5. Réponse de l'exposition
    En cas d'exposition à un BBP, répondre de la manière suivante.
    1. Laver la zone exposée immédiatement et abondamment avec de l'eau et du savon.Une action rapide peut réduire le risque d'infection.
    2. Identifier la source et la voie de l'exposition pour être en mesure d'expliquer la situation au superviseur de terrain et / ou le médecin de répondre.
    3. Aviser le superviseur de garde se produit immédiatement après l'exposition. Il est souligné à obtenir l'appui d'un superviseur de terrain pour comprendre le niveau de risque pour l'infection de sorte qu'il peut être évalué si l'attention médicale immédiate est nécessaire. Directives énoncées dans les plans de contrôle de l'exposition spécifiques (PCU) doivent être fournis à tous ceux qui sont en danger d'être exposé à BBP.

2. Configuration de Chambre Collection et Matériaux

  1. Sélectionnez un emplacement de prélèvement de l'échantillon qui n'est pas conçu pour manger, comme une salle de repos, et qui est exempt de tout l'équipement de projet indépendant. On ne veut pas être dans une zone qui est bondé, il est important d'avoir la facilité de mouvement. Ce qui suit décrit comment mettre en place la collecte de sang séché sur place (lzone ab).
  2. Mettre en place le canon de déchets biologiques dangereux et la ligne à l'intérieur d'un sac de déchets biologiques dangereux. Le baril de déchets devrait être accessible en position assise.
  3. Nettoyer la zone de collecte à fond avec lingettes désinfectantes ou produit similaire. Disposer de tout le matériel utilisé pour nettoyer la zone de laboratoire dans le canon de déchets biologiques dangereux. Porter des gants lors de cette étape pour protéger la peau contre l'exposition à des produits chimiques nocifs.
  4. Remplacer les gants et mettre en place des fournitures restantes de collecte.
    1. La place des gants et alcool désinfectant pour les mains sur la table de la collection.
    2. Placez le récipient de dièses à la portée de la chaise du collecteur. Récipient à aiguilles doit être manipulé avec des gants en tout temps et éliminés de manière appropriée lorsqu'il est plein.
    3. Placer tous les matériaux restants nécessaires à la collecte DBS sur un sous-tapis de protection dans la zone de collecte. Inclure une carte de collection de papier-filtre, quelques lancettes, des tampons d'alcool, tampons de gaze, et Band-Aids, mais pas trop si la zone est encombrée. Fairepas mis en place plus de ce qui pourrait être utilisé pour chaque participant.

3. DBS Cellection de l'échantillon

Toujours porter des EPI (blouse de laboratoire, des gants, un pantalon long, chaussures fermées doigts et si vous le souhaitez, des lunettes de sécurité) lors de la collecte et de placer une alèse de protection (chux) sur les genoux pour protéger ses vêtements de ville.

  1. Préparation du participant:
    1. Après l'obtention du consentement, demander au participant si il / elle préfère utiliser la gauche ou la droite pour la collecte et sélectionnez un doigt pour la collecte. Évitez les doigts très calleuses ou endommagés (lacérés) et des doigts bagués. Typiquement l'auriculaire et le pouce ne sont pas choisis de manière à minimiser la douleur des participants et de faciliter la collecte, respectivement. Les côtés des bouts de doigt sont utilisés en tant que le point de collecte pour la cohérence et la facilité de collecte.
    2. Avez participant se frotter les mains pour se réchauffer les mains et stimuler la circulation sanguine. Un wa mainplus ferme peut être utilisé, ou le participant peut exécuter leurs mains sous l'eau chaude si un évier est disponible. Une autre technique pour stimuler la circulation sanguine serait d'avoir le participant alternativement serrer et détendre la main cible, puis reposer entièrement avant le bout du doigt.
    3. Nettoyez le doigt sélectionné avec un tampon imbibé d'alcool et lui permettre de sécher complètement. Répéter l'opération avec un deuxième tampon d'alcool pour supprimer complètement toutes les contaminants ou lotions pour les mains. Le doigt doit être complètement sec avant de procéder avec le bâton de doigt ou de l'alcool vont contaminer l'échantillon de sang. Comme avec tous les matériaux de collecte utilisées, disposer immédiatement des tampons imbibés d'alcool dans le récipient pour déchets biologiques dangereux.
  2. Préparation du site de ponction sur le doigt du participant:
    1. Fixez le bras du participant pour empêcher le mouvement lors de la collecte et de détendre le bras et les muscles de la main. Reposer le coude du participant sur le bord de la table ou sur les genoux. Gardez la pos part du participantitioned confortablement en dessous du niveau du cœur et les muscles détendus pour faciliter l'écoulement de sang.
    2. Saisissez le doigt choisi entre le pouce et l'index et le lait doucement le doigt par lentement et fermement en serrant le doigt tout en se déplaçant à la portée de la paume du bout des doigts pour tirer le sang vers le bout du doigt.
    3. Appuyez sur la micro-lancette fermement contre le doigt du participant perpendiculaire à l'empreinte digitale et de s'acquitter de la lancette. Ne pas percer le centre du doigt ou à proximité du lit de l'ongle, mais plutôt viser entre ces deux points, sur le côté cubital du doigt. Disposer immédiatement de la lancette dans le conteneur pour instruments tranchants.
  3. Collecte des taches de sang:
    1. Essuyez la première goutte de sang avec un tampon de gaze stérile pour éliminer le liquide tissulaire de l'échantillon et de disposer immédiatement de la gaze dans le canon de déchets biologiques dangereux.
    2. Tout en maintenant la main du participant en dessous de leur cœur avec un angle vers le bas, gentraire TLY le départ de la main au niveau du poignet et de travailler jusqu'à la base du doigt pour produire du sang. Ne pas serrer le doigt, car cela permettra de réduire le flux sanguin. Traire le doigt jusqu'à ce qu'une grosse goutte est suspendu au bout du doigt.
    3. Recueillir les taches à l'aide du papier de collection.
      1. Positionner délicatement le papier de la collection ci-dessous le doigt et laissez la chute de tomber de son propre poids. Ceci permet la collecte des taches de sang de volume maximum. Si piscines de sang sur du papier filtre, c'est à dire "perles", appuyez doucement sur ​​la carte pour encourager sang pour saturer dans le papier.
      2. Si le sang est trop visqueux ou gouttes sont trop petits pour tomber de leur propre poids, porter lentement le papier de collection en contact avec la goutte de sang pour absorber le sang du doigt par capillarité sans toucher du doigt. Si le doigt touche le papier de collection, se déplacer à un autre endroit sur le papier comme étant la zone de collecte a été compromise. Doigt sho du participantULD jamais toucher le papier filtre.
      3. Ne pas placer des gouttes de sang sur le dessus de l'autre, même si une tache de sang ne remplit pas le cercle de collection.
      4. Ne laissez pas le sang couler le doigt ou sur l'ongle car cela rend la collecte de grandes taches plus difficile.
    4. Si le sang du participant coagule tout moment pendant le processus de collecte, de demander la permission pour piquer un autre doigt, puis nettoyer et panser le site de ponction initiale et recommencer si la demande est acceptée.
      1. Pour empêcher la coagulation, continuer traite le doigt de l'participant à faire circuler le sang ou essayez d'essuyer fermement la ponction avec une gaze stérile de perturber la formation de caillots.
        Remarque: doigts bâtons ultérieures peuvent être nécessaires pour plusieurs raisons: Une chambre froide peut provoquer la coagulation plus rapide, et aussi la viscosité du sang de participants peut-être pas idéal, ou des techniques de traite pauvres peut aussi avoir un impact flux sanguin. Poignées chauffantes, ou de l'eau chaude courante, utilisée avant Puncture peut inverser l'effet d'une chambre froide.
    5. Une fois les DBS ont été recueillis, ou si le participant ne veut pas doigts bâtons ultérieures, nettoyer le site de ponction de tout sang étranger.
    6. Bander le site de ponction pour éviter la contamination potentiel une fois que le participant quitte la zone de collecte de l'échantillon.
  4. Contrôle de la qualité FI (QC) Évaluation:
    Au terme de la collecte de l'échantillon, évaluer les échantillons de qualité. Assurez-taches sont 1) d'au moins 0,375 de diamètre mesuré à l'arrière de la zone de collecte; 2) imbibé de manière adéquate à travers le papier de collecte de façon à être de taille similaire sur les deux côtés du papier du filtre, les taches ne répondant pas à ce critère indiquent collection par contact du doigt sur le papier de collection et probablement bavures; 3) n'est pas en contact avec l'autre (les zones de chevauchement de points ne sont pas dosable).
  5. Fin de la collecte de l'échantillon
    1. Après guidelines décrites à l'étape 1.1, disposent de tout matériel de collecte contaminés restants, y compris tous les éléments qui peuvent avoir été en contact avec des matières potentiellement infectieuses.
    2. Tenir le papier de collection sur une alèse de protection à sécher. Espacez les cartes de collecte pour permettre une bonne circulation de l'air entre eux. Le montant minimum de temps à l'air sec est de 15 min, de préférence au moins 30 min. Pour permettre un écoulement d'air maximum, il est important de plier le dos de la carte de collection de manière à pouvoir supporter librement et à fournir un écoulement d'air derrière les échantillons sur le papier de recouvrement.
    3. Avec toutes les étapes terminée, retirez PPE.
  6. Réponse à une faible réserve de sentiment ou pas bien
    Bien que peu probable, un participant peut devenir étourdi, étourdi, ou faible pendant ou après le bout du doigt. Soyez à l'affût des signes tels que la pâleur, la transpiration sur le visage et le front, les plaintes de vision floue, tombantes ou flottant paupières, ou les plaintes de nausées. Le début de la tsymptômes es est souvent soudaine; préleveurs doivent être prêts à réagir rapidement si l'un des symptômes sont visibles. Si un de ces symptômes sont présents à tout moment de la procédure, de réagir selon les procédures suivantes.
    1. Si un participant se sent faible, étourdi, étourdi, ou montre des signes de perte de connaissance, prendre les mesures suivantes:
      1. Arrêter la procédure.
      2. Veillez à ce que le participant ne puisse ni tomber ni se blesser.
      3. Calmement rassurer le participant et le cas échéant, demander au participant de se plier à la taille et mettre son / sa tête entre ses / ses jambes. Si la mobilité est limitée et le participant peut être déplacé d'un emplacement adjacent rembourré peut être utilisé pour se reposer.
      4. Demandez au reste des participants pour 10 min.
      5. Reprendre la procédure si le participant consent à continuer.
    2. Si un participant s'évanouit, prendre les mesures suivantes:
      1. Arrêter la procédure.
      2. Veillez à ce quele participant ne tombe pas ou se blesser.
      3. Avoir le mensonge de participant sur sa / son dos aussi rapidement que possible avec les pieds élevés. Le participant sera invité à s'allonger directement à partir de la position assise sans se lever.
      4. Demandez au participant de desserrer les vêtements serrés.
      5. Demandez au reste des participants pour 10 min.
      6. collection spot de sang ne doit pas continuer.
      7. Si le participant ne répond pas après 1 min, appeler le 911.
  7. Briser la zone laboratoire:
    Une fois la collecte des taches de sang a été effectuée, la zone de collecte doit être décomposé et la zone décontaminée afin de s'assurer que les passants ne sera pas infecté par BBP. La zone de collecte de sang, les conteneurs d'équipement, matériels de collecte, et les conteneurs de déchets doit être propre de BBP. Comme toujours, porter des EPI lors de la manipulation des matériaux potentiellement infectieux.
    1. Retirer de la zone de collecte etremballer tous les matériaux non contaminés.
    2. Débarrassez-vous des déchets contaminés restant dans le cylindre de biodéchets.
    3. Fermez le contenant pour objets pointus et de le stocker dans un endroit qui offre une protection contre la contamination. Si le collecteur d'aiguilles est au 3/4, disposer convenablement de lui et le remplacer par un nouveau contenant pour objets pointus.
    4. Essuyez l'ensemble de la zone de prélèvement d'échantillons et virucides des lingettes désinfectantes microbiennes.
    5. Une fois tous les matériaux biologiques dangereux a été supprimé, le sac de risque biologique peut être stérilisé à l'autoclave. Lorsque vous retirez le sac du baril de déchets, être prudent pour ne toucher l'extérieur du sac et pour sceller le sac hermétiquement. Il est également recommandé d'utiliser microbienne virucide lingettes pour nettoyer l'extérieur de tous les équipements pour prévenir la contamination croisée.

4. Formation pour collecter DBS

Vérifiez tout collectionneur de taches de sang séché est certifiée par une personne qualifiée avant d'effectuer la procédureDure sur les patients ou sujets de recherche. Assurez collectionneurs preuve de respect pour les participants, la confiance et la maîtrise de l'utilisation des EPI et des fournitures de collecte de sang, dans la collection de points de volume suffisant, et en fin de la procédure d'une manière opportune et efficace, idéalement en moins de 10 min.

5. Conditionnement et stockage échantillon

  1. Assurez-échantillons DBS ont séché pendant au moins 15 min avant qu'ils ne soient mis en sac pour le stockage, une carte saturée peut prendre 30 minutes ou plus à suffisamment sec. Fermez le couvercle de la carte de collection, en veillant à l'échantillon est complètement sec pour éviter toute bavure et de contaminer l'échantillon.
  2. Prenez un sac de spécimen de risque biologique et placer une poche de déshydratant dans le sac de l'échantillon. Placer l'échantillon DBS dans le sac biohazard de l'échantillon. Toujours porter des gants lors de la manipulation des échantillons DBS. Ne pas laisser les échantillons de sang à toucher l'extérieur du sac à échantillon.
  3. Placez chaque échantillon dans son propre biohazard sac de prélèvement d'espritha paquet de déshydratant. Aplatissez le sac pour enlever l'excès d'air et fermer le sac hermétiquement. Placer l'échantillon dans un refroidisseur en sac de stockage pour le transport ou le stockage temporaire. Eviter les températures élevées.
  4. De geler ou de dosage des échantillons DBS dans les deux semaines de collecte, que des échantillons DBS peuvent être généralement stockés à température ambiante pendant deux semaines sans dégradation significative en fonction de l'analyte 7,2.

6. Transport des échantillons et envoi

  1. Sauf connu pour contenir des agents infectieux, navire séché échantillons ponctuels de sang que des spécimens humains exonérées en vertu de règlements du ministère des Transports des États-Unis et conformément à la partie 2, chapitre 6, § 6.3.2.3.6 de l'Organisation de l'aviation civile internationale (OACI) Instructions techniques 8 .
  2. Si gelé, des échantillons de navires durant la nuit sur de la glace sèche avec les précautions supplémentaires requises pour les substances dangereuses, ou avec gelpaks congelés à -80 ° C. Ship lundi-mercredipour éviter dégel en transit en raison de retards ou week-end / vacances, avec la confirmation du site de réception qu'ils attendent et prêt à recevoir et congeler les échantillons.

7. évaluation de contrôle de la qualité

  1. Après la collecte et avant l'essai (de préférence avant la congélation afin de minimiser le nombre de cycles de congélation-décongélation) pour évaluer la qualité des échantillons.
  2. Inclure les critères suivants dans l'évaluation de la qualité de l'échantillon, l'emballage approprié, déshydratant code couleur reste intacte (sec), la saturation des points, la taille des taches, des méthodes de collecte appropriés, y compris les taches ne se chevauchent ou enduits sur la carte indiquant le contact avec l'objet doigt.

8. Congélateur de stockage

Bien que les temps de dégradation diffèrent par analyte, congeler les échantillons DBS dans les deux semaines de collecte pour de meilleurs résultats. Congeler les échantillons avec déshydratant dans un congélateur de laboratoire de qualité. Comme avec tout prélèvement biologique, réduire de gel-dégel cycles, bien que certains tests dans des échantillons DBS n'ont montré aucun signe de dégradation de jusqu'à six cycles de gel-dégel 9-11.

Résultats

figure-results-1
Figure 1. Gouttes de sang séchées échantillon. Une carte de collection est représenté avec quatre taches recueillies valides dans le processus de séchage. Cliquez ici pour agrandir l'image.

figure-results-2
Figure 2. Bonne et mauvaise secs échantillons ponctuels de sang. Résultats de succès (à droite) et échec (à gauche) collection DBS sont présentés. Cliquez ici pour agrandir l'imâge.

figure-results-3
Figure 3. Des des attitudes et des pratiques associées à un risque employé de la maladie cardiométabolique 6 des gestionnaires. Ce chiffre a été modifié depuis Berkman, LF, Buxton, l'OM, ​​Ertel, K. & Okechukwu, les pratiques de C. Gestionnaire liés au travail familial équilibre prédisent cardiovasculaire des employés risque et la durée du sommeil en milieu de soins de longue durée. Journal de psychologie de la santé au travail 115, 316-329 (2010). Les employés exposés à des gestionnaires avec des scores travail-famille milieu ou bas de l'ouverture et de la créativité pour aider avec le travail de leurs employés et des besoins de la famille, ont des cotes augmentation statistiquement significative d'avoir deux ou plusieurs risques cardiovasculaires (fumeur actuel, l'obésité, l'hypertension artérielle ou battagertension, taux de cholestérol élevé, et une grande hémoglobine glycosylée (Hb A1C) ou le diagnostic de diabète). Panneaux supérieurs et intermédiaires représentent les valeurs moyennes ± écarts-types pour le cholestérol total évalué par taches de sang séché et Hb A1C évalué par point de dispositif de soins (qui peut également être mesurée de façon fiable par des taches de sang séché). Panneau inférieur montre que le risque de maladies cardio-vasculaires par le score de gestionnaire. L'analyse est limitée aux infirmières et autres employés qui fournissent des soins directs indiquent que l'exposition aux gestionnaires ayant peu de créativité et d'ouverture des questions connexes à travail-famille peut être particulièrement important pour ces personnes (ou faible score WF = 6,4, p = 0,01). Tous les modèles de contrôle pour l'âge, le sexe, le salaire, l'éducation, la race / l'origine ethnique, et lieu de travail. Cliquez ici pour agrandir l'image.

Discussion

Les biomarqueurs sont des outils extrêmement utiles dans de multiples disciplines, comme la médecine, la biologie cellulaire, la génétique, la psychologie, la sociologie, la démographie et l'épidémiologie sociale. Dans chaque discipline, la recherche de biomarqueurs de validité de phase précoce et la fiabilité a été utilisée afin de découvrir à la fois le risque de maladie cachée et fournir prédiction longitudinale des résultats de santé. Dans ces cas, les biomarqueurs qui sont exacts, durable (c'est à dire qu'ils peuvent survivre le décalage entre la collecte et la mise en œuvre de l'analyse de laboratoire échantillon pour extraire le biomarqueur) et polyvalent (c.-à-utile dans une variété de modèles) sont requis.

Tandis que la collecte DBS est une procédure relativement simple, plusieurs techniques peuvent aider à maximiser le volume de taches recueillies. Avant le début de la collecte, en veillant à la main d'un participant est chaud, et donc que les vaisseaux sanguins sont dilatés, aidera la circulation sanguine une fois que le doigt est percé. Utilisation de chauffe-mains ou d'avoir unparticipant exécuter leurs mains sous l'eau chaude peut aider à ce processus. Traite le doigt avant la collecte va tirer le sang au bout du doigt et réchauffer la main pour aider la circulation sanguine. La traite est un processus qui s'améliore avec la pratique. Les collectionneurs devraient utiliser quelque soit la technique, ils trouvent plus confortable et efficace, mais l'approche la plus courante consiste à traire la main du participant avec la main opposée du collecteur. Cette méthode permettra de pouce du collectionneur de travailler en profondeur dans la paume de la participant tandis que la main opposée peut stabiliser le poignet du participant. Par exemple, si l'on recueillaient le sang d'un doigt sur la main gauche du participant, le collecteur devrait se stabiliser le poignet du participant avec la main gauche et le lait avec leur main droite. Erreurs courantes faites pendant la traite comprennent pas l'aide d'une prise ferme, tirant sur la peau au-dessus de la main de travail et non dans les muscles pour tirer le sang vers le bout du doigt. Il est également important d'éviter la brocheching le doigt de la main de traite ou de préhension étroitement le poignet du participant avec la main nonmilking, les deux qui entravent la circulation sanguine.

Lorsque la perforation du doigt, faire la ponction aussi profondément que possible en appuyant fermement la lancette dans le doigt avant rejet. Une ponction peu profond en résulte moins de la circulation sanguine et la coagulation plus rapide. Après perforation du doigt, travailler rapidement est la clé. Fluidifier le sang conduit à faciliter la collecte et grandes taches. Après la ponction, le sang devient plus visqueux et plus jusqu'à ce que la coagulation. Le moins de temps nécessaire pour recueillir les taches de sang sur la carte plus leur volume.

Idéalement le sang du participant sera suffisamment minces que les gouttes tomberont de leur propre poids, mais ce ne sera pas le cas pour tous les participants, que le sang de certaines personnes est plus épais ou des caillots plus vite que d'autres. Si le sang est trop épais pour tomber du doigt, la carte de filtrage doit être portée à la collecte du sang pour. When apportant de la carte dans le sang, il est important de maintenir la carte en contact avec la goutte alors qu'il est suspendu à partir du doigt le plus longtemps possible, plutôt que de simplement en tamponnant le sang à la carte. Cela aidera le sang de traction du doigt afin de maximiser la taille de la tache. Cette technique nécessite une main ferme pour maintenir le contact entre le sang et la carte. Avec les deux mains, l'une pour stabiliser la main et un participants à tenir la carte, et en gardant les deux mains en contact avec une autre aide à stabiliser la carte et le sang ensemble.

Domaines de recherche de pointe, tels que l'évaluation du risque cardiométabolique, ont longtemps compté sur les biomarqueurs tels que la protéine C-réactive (CRP), l'insuline, et l'hémoglobine glycosylée (HbA1c) pour la détection précoce des risques et de prévention, ainsi que des biomarqueurs de "points de terminaison dur" pour les maladies cardiovasculaires (MCV) de risque et la mortalité des maladies cardiovasculaires associées 12. Épidémiologie clinique évalue souvent biomarqueurs pour prospectively prédire les résultats de risque cardiométabolique tels que les maladies cardiaques et le diabète de type II. Peut-être le plus largement utilisé de tous les biomarqueurs est le score de risque de Framingham, un composite qui comprend la pression artérielle, taux de cholestérol HDL et les niveaux totaux de cholestérols qui a démontré l'utilité pour prédire les maladies cardiovasculaires 13. Cependant, le score de Framingham a connu des controverses techniques, et a des limites dans les études ont porté sur les liens entre les facteurs sociaux et environnementaux pour la santé, ce qui suggère la nécessité de biomarqueurs plus précises et spécifiques liées à la recherche cardiovasculaire.

Il existe un certain nombre de kits ELISA disponibles dans le commerce en utilisant des techniques semblables ou disponibles pour l'analyse d'échantillons de DBS. Nécessaire pour le dosage d'échantillons de DBS sont l'utilisation de mesures spécifiques et optimisés élution pour amener les échantillons séchés dans la solution 2. C'est un domaine de recherche en expansion que des essais pour plusieurs analytes sont actuellement en cours d'élaboration 1. Parmi èmedosages e déjà validés et largement utilisés sont le taux de cholestérol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, la leptine 17, et cyotkines 18. Il ya un certain nombre de laboratoires spécialisés dans l'analyse de la SCP, y compris l'Université de Washington Département de médecine de laboratoire (UW Lab Med) biomarqueurs de laboratoire (Réalisateur: Mark Wener).

Gardant à l'esprit que d'un panel de biomarqueurs, plutôt que d'un biomarqueur solitaire, est le plus utile dans les domaines de la recherche cardiovasculaire et le diabète, les biomarqueurs doivent être considérés avec une variété de facteurs contextuels, afin de maximiser leur utilité. la recherche de biomarqueurs peut être coûteux mais, à la fois financièrement et en temps pour la collecte de données. Ainsi, alors qu'il est essentiel de choisir des biomarqueurs qui sont exacts, durable et polyvalent, la recherche de biomarqueurs travail et la famille doit être enraciné dans pratique en sélectionnant biomarqueurs qui sont peu coûteux, appropriée, et peut être collecté rapidement wie facilité. De plus, des considérations pratiques donnent souvent lieu à une incapacité à optimiser simultanément le prix et la qualité, et la vitesse à l'intérieur d'une procédure. Ici se trouvent les prochaines étapes de la recherche de biomarqueurs de la santé au sein des études de terrain et de la population. Le champ de recherche de biomarqueurs est actuellement dans une période de croissance spectaculaire, mais la plupart du travail est encore à venir.

Déclarations de divulgation

Orfeu Buxton a reçu une subvention menée à l'initiative de Sepracor Inc (maintenant Sunovion; ESRC-0977, ClinicalTrials.gov Identifier NCT00900159); sert de consultant et témoin expert pour Dinsmore LLC, membre du Conseil consultatif scientifique de Matsutani Amérique, et a reçu le conseil frais du centre médical de Wake Forest University.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par le travail, la famille et le Réseau de santé (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), qui est financé par un accord de coopération à travers les National Institutes of Health et les Centers for Disease Control and Prevention: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health et le développement humain (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), l'Institut National sur le Vieillissement (Grant # U01AG027669), Bureau of Behavioral Science et recherche en sciences, le National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240), et l'Institut national d'hygiène et sécurité et la santé (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Subventions de la Fondation William T. Grant, Alfred Sloan Foundation P, et l'Administration pour les enfants et les familles ont fourni des fonds supplémentaires. Le contenu de cette publication relève de la seule responsabilité des auteurs et ne représentent pas nécessairement les positions officielles de ces instituts et bureaux.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Lingettes microbiennes Asepti IIEcoLabD12330345expédition par une tierce partie
Sacs de déchets BiohazardVWR14220-092Sacs biodangereux en polypropylène autoclavable haute résistance, baril de déchets Biohazard de 2 mil
Tyco58578-0928 g Couvercle coulissant
Conteneur pour objets tranchantsBD MedicalBD3054871,4 qt
ChuxVWR82020-845Sous-matelas absorbants pour banc  ;
GantsVWRXSmall : 89038-267Gants en nitrile non poudrés et sans latex Small
 : 89038-268
Medium : 89038-270
Large : 89038-272
XLarge : 89038-274
Désinfectant pour les mains ( par exemple Purell)Johnson Johnson89040-210Expédition par une tierce partie
Lingettes imbibées d’alcoolWebcol et Curity82003-856Tampons de préparation
GazeVersalon82004-826Éponges non tissées
Band-AidsNutramax Stat Strips15431-475
LancesOwen Mumford82028-0603,0 mm, 21 G  ;
Cartes de collecte en papier protéinéWhatmanCustom-build903 Protein Saver Collection paper
DesiccantVWR61161-319Éponges d’humidité Sacs
échantillonsLab Guard Sacs refermables pour risques biologiques, ITW Minigrip56766-3706 po x 9 po
Glacière de stockage d’échantillonsIglooPlaymate Mini4 qt ; directement du fabricant
à

Références

  1. McDade, T. W., Williams, S., Snodgrass, J. J. What a drop can do: dried blood spots as a minimally invasive method for integrating biomarkers into population-based research. Demography. 44, 899-925 (2007).
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  14. McDade, T. W. Measuring Stress in Humans. A Practical Guide for the Field. Ice, G. H., James, G. D. , Cambridge University Press. 181-207 (2007).
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  16. Miller, A. A., Sharrock, K. C., McDade, T. W. Measurement of leptin in dried blood spot samples. Am. J. Hum. Biol. 18, 857-860 (2006).
  17. Miller, E. M., McDade, T. W. A highly sensitive immunoassay for interleukin-6 in dried blood spots. Am. J. Hum. Biol. , (2012).

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