Analyse fonctionnelle du circuit d&#39;alimentation des larves dans Drosophila</i

Résumé

Le circuit de l'alimentation chez la drosophile larves melanogaster propose un modèle simple mais puissant qui permet de modifier la fréquence d'alimentation pour être en corrélation avec des modifications dans les circuits neuronaux stomatogastrique. Ce circuit est composé de neurones sérotoninergiques centraux qui envoient des projections vers les crochets buccaux ainsi que l'intestin antérieur.

Résumé

Le circuit d'alimentation sérotoninergique chez Drosophila melanogaster de larves peut être utilisé pour étudier les substrats neuronaux d'une importance critique au cours de la mise au point du circuit. Utilisation de la sortie fonctionnelle du circuit, l'alimentation, les changements dans l'architecture neuronale du système stomatogastrique peut être visualisée. Le comportement alimentaire peut être enregistrée par l'observation du taux de rétraction des crochets de la bouche, qui reçoivent l'innervation du cerveau. comportement locomoteur est utilisé en tant que contrôle physiologique pour l'alimentation, étant donné que les larves utilisent leurs crochets de la bouche à parcourir à travers un substrat de gélose. Les changements dans le comportement alimentaire peuvent être corrélées avec l'architecture axonale des neurites innervant l'intestin. Utilisation de l'immunohistochimie, il est possible de visualiser et de quantifier ces modifications. Une mauvaise manipulation des larves pendant paradigmes de comportement peut modifier les données car ils sont très sensibles aux manipulations. Imagerie appropriée de l'architecture des neurites innervantl'intestin est critique pour la quantification précise du nombre et de la taille des varicosités ainsi que de l'étendue de noeuds de branche. L'analyse de la plupart des circuits de permettre seulement à la visualisation de l'architecture des neurites ou des effets comportementaux, mais ce modèle permet de corréler la sortie du circuit fonctionnel avec les déficiences de l'architecture neuronale.

Introduction

Drosophile est un système modèle extrêmement puissant pour étudier le développement des circuits neuronaux en raison du temps de génération rapide, à faible coût expérimental, et la capacité de manipuler et contrôler les facteurs génétiques et environnementaux. Neurogenèse, recherche de chemin neuronal et la synaptogenèse sont conservés entre l'homme et la drosophile, par conséquent les mécanismes de création, le maintien et la modification des circuits de neurones sont conservés ainsi.

Neurotransmetteurs classiques, tels que la sérotonine (5-hydroxytryptamine ou 5-HT) peuvent servir de facteurs de croissance avant l....

Protocole

Une. Entretien de Cages Population

1. Maintenir les cages de la population à 25 ° C sur un cycle lumière-obscurité de 12 h. Tant que les groupes témoins et expérimentaux sont exposés aux mêmes conditions d'éclairage, alors cette technique peut être réalisée dans un environnement de laboratoire standard.
2. Permettre aux femmes de nuit pondent des œufs sur les pommiers plaques jus-agar.
3. Recueillir les larves nouvellement écloses par le maintien des plaques avec des oeufs nouvellement déposés à 25 ° C pendant 24 heures. Placer une petite cuillerée de levure dans le centre de la plaque d'attirer larves écloses.
4. Recueillir 1

Résultats

Le circuit d'alimentation sérotoninergique dans la larve de drosophile peut servir de modèle extrêmement efficace pour observer l'influence de certains facteurs sur le développement du système nerveux. En quantifiant le taux d'alimentation, il est possible de relier l'architecture axonale du circuit d'alimentation dont la sortie fonctionnelle (figure 1). Le dosage locomotrice est utilisé en tant que contrôle physiologique pour les rétractions de la bouche des crochets, étant.......

Discussion

Développement aberrant du circuit stomatogastrique sérotoninergique, qui se produit à la fin de l'embryogenèse, aura une incidence sur sa fonction mature. Les changements dans l'architecture des neurites innervant l'intestin peut être corrélée à la sortie fonctionnelle du circuit, qui est le taux d'alimentation (mesurée par la bouche contractions de crochet dans une solution de levure) (Figure 1). L'utilisation du système bipartite UAS-Gal4 chez la drosophile permet de cible.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Microscope Eclipse E-800 Nikon	Instruments
Neuroleucida	MBF Biosciences	NL-15	Utilisé pour analyser l’architecture des fibres intestinales, pas besoin d’avoir
Northern Eclipse	Empix Inc		Logiciel d’imagerie
G-2E/C TRITC EX 528-553	Nikon Instruments	96312	Filtre pour anticorps
secondaire spécifiqueN.A. 0,75 ; L. 0,72 mm ; Prisme DIC : 40xI, 40x I-C ;	Instruments Nikon à	MRH00400	Objectif utilisé pour l’imagerie
Neurite Tracer	NIH Image J		http://fiji.sc/Simple_Neurite_Tracer

ressort Simple