En Vivo mesures électrophysiologiques sur les nerfs sciatiques souris

Résumé

Les mesures de propriétés de conduction nerveuses in vivo illustrent un outil puissant pour caractériser différents modèles animaux de maladies neuromusculaires. Ici, nous présentons un protocole simple et fiable qui analyse électrophysiologique sur les nerfs sciatiques des souris anesthésiées peut être effectuée.

Résumé

Les études électrophysiologiques permettent une classification rationnelle des diverses maladies neuromusculaires et sont de l'aide, ainsi que des techniques neuropathologiques, dans la compréhension de la physiopathologie sous-jacente ^1. Nous décrivons ici une méthode pour réaliser des études électrophysiologiques sur les nerfs sciatiques de souris in vivo.

Les animaux sont anesthésiés avec de l'isoflurane, afin d'assurer une analgésie pour les souris testées et perturbées environnement de travail au cours des mesures qui ont environ 30 min / animal. A température constante de 37 ° C est maintenue par une plaque de chauffage et de mesure en continu par une sonde thermo rectale ^2. En outre, un électrocardiogramme (ECG) est régulièrement enregistré au cours des mesures afin de surveiller en permanence l'état physiologique des animaux étudiés.

Des enregistrements électrophysiologiques sont effectués sur le nerf sciatique, le plus grand nerf de ee système nerveux périphérique (SNP), en fournissant le membre postérieur de la souris avec des faisceaux de fibres à la fois motrices et sensorielles. Dans notre protocole, les nerfs sciatiques rester in situ et par conséquent n'ont pas besoin d'être extrait ou exposé, ce qui permet des mesures sans aucune irritation des nerfs indésirables avec des enregistrements réels. En utilisant des électrodes à aiguilles appropriées ^3, nous effectuons tous les deux proximale et distale stimulations nerveuses, l'enregistrement des potentiels transmises avec des électrodes de détection à muscles jumeaux. Après traitement des données, fiable et valeurs très cohérentes pour la vitesse de conduction nerveuse (NCV) et le composé potentiel d'action du moteur (CMAP), les paramètres clés pour la quantification de fonctionnement brut de nerf périphérique, peuvent être atteints.

Introduction

Mesures électrophysiologiques sont un outil indispensable pour étudier l'intégrité fonctionnelle des nerfs périphériques dans des environnements cliniques et de laboratoire. Chez l'homme, un grand nombre de troubles neuromusculaires et des neuropathies diagnostic repose sur des mesures électrophysiologiques. En mesurant les propriétés nerveuses que la vitesse de conduction et l'amplitude possibles du signal, il est possible de caractériser l'origine grossière de maladies des nerfs périphériques.

La vitesse de conduction nerveuse est très dépendante de propagation de signal rapide est activée par la myélinisation. Par consé....

Protocole

La présente étude a été réalisée selon la protection des animaux Loi de la République fédérale d'Allemagne (Tierschutzgesetz der Bundesrepublik Deutschland) et a été approuvé par l'Office d'Etat de Thuringe pour la sécurité alimentaire et la protection des consommateurs (Thüringer Landesamt für Lebensmittelsicherheit und Verbraucherschutz).

1. Configuration des mesures

1. Anesthésier les souris par isoflurane / O ₂ inhalation - pour l'initiation de l'anesthésie à 3%, pour l'entretien 2% d'isoflurane dans de l'oxygène à 100% (Figure 1). Confirmez l'anesthésie suffisamm....

Résultats

Nous avons effectué une série de mesures électrophysiologiques in vivo sur les nerfs sciatiques de 12 souris au total pour cette étude: 6 animaux de chaque sexe. Les mesures ont été réalisées avec le protocole présenté et livrés aux résultats suivants:

Les deux souris mâles et femelles présentent une vitesse sciatique moyen de conduction nerveuse de l'ordre de 20 m / sec (figure 5). Ceci est cohérent avec d'autres mesures dans la littérature. En outre,.......

Discussion

Le protocole décrit fournit une méthode simple et fiable pour déterminer nerf sciatique propriétés de conduction sur des souris anesthésiée sans la nécessité d'exposer le nerf d'intérêt. Néanmoins, cette procédure expérimentale provoque des lésions du tissu par ponction à l'aiguille. Il est donc raisonnable d'une option de sacrifier les animaux après la fin des enregistrements. Cependant, par rapport à d'autres procédures plus invasives, qui nécessitent l'exposition du nerf avant enregistrements,.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Électrodes à aiguille concentrique (stimulation)	Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA	9013S0901
Électrodes annulaires numériques (enregistrement)	Natus Medical Incorporated, San Carlos, CA, USA	9013S0302
ToM - Tower of Measurement (convertisseur A/N)	GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, Allemagne
AtisaPro, logiciel d’acquisition et d’analyse de données	GJB Datentechnik GmbH, Langewiesen, Allemagne
HSE-stimulator T	Hugo Sachs Elektronik, Hugstetten, Allemagne