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Article de méthode

Un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité

13K vues

DOI :

10.3791/51235

28 mai 2014

Dans cet article

Résumé

L'insuffisance respiratoire est la principale cause de décès suite à une blessure de la moelle épinière cervicale. Avoir un modèle animal pré-clinique reproductible, quantifiable et fiable de l'insuffisance respiratoire provoquée par une blessure cervicale partielle aidera à comprendre la neuroplasticité respiratoire et non respiratoire ultérieure et permettra de tester des stratégies de réparation putatifs.

Résumé

Une lésion de la moelle épinière cervicale induit une paralysie permanente, et conduit souvent à une détresse respiratoire. À ce jour, aucun thérapeutiques efficaces ont été développées pour améliorer / améliorer l'insuffisance respiratoire suite à une blessure cervicale haute de la moelle épinière (SCI). Ici, nous proposons un modèle pré-clinique murin de haute SCI au col de l'utérus 2 (C2) niveau métamérique à étudier divers neuroplasticité respiratoire post-lésionnelle. La technique consiste en une lésion chirurgicale partielle au niveau de C2, qui va induire une hémiparalysie de la membrane due à une désafférentation des motoneurones phréniques des centres respiratoires situés dans le tronc cérébral. Le côté opposé de la blessure reste intacte et permet la récupération des animaux. Contrairement à d'autres SIC qui affectent la fonction locomotrice (au niveau thoracique et lombaire), la fonction respiratoire ne nécessite pas la motivation de l'animal et la quantification du déficit / récupération peut être facilement réalisée (diaphragme et l'enregistrement du nerf phréniques, la ventilation du corps entier). Ce modèle C2 SCI pré-clinique est un modèle pré-clinique puissant, utile et fiable pour étudier divers événements de neuroplasticité respiratoires et non respiratoires à différents niveaux (moléculaires à la physiologie) et de tester différentes stratégies thérapeutiques putatifs qui pourrait améliorer la respiration en patients blessés médullaires.

Introduction

Traumatisme de la moelle épinière est une blessure courante observée dans la population humaine avec des incidences dramatiques, comme une paralysie permanente. Cependant, la gravité de la blessure est fonction du niveau et de l'étendue du traumatisme initial. L'insuffisance respiratoire est la principale cause de mortalité à la suite du col des blessures de la moelle épinière supérieure (SCI) 1. Actuellement, le seul traitement thérapeutique consiste à placer le patient sous assistance ventilatoire. Depuis quelques patients peuvent être sevrés de l'assistance ventilatoire 2, en raison de la récupération spontanée qui se produit avec....

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Protocole

Ce protocole a été approuvé par le comité d'éthique de la chaise RBUCE-UP d'excellence (Université de Paris Sud, accord de subvention n ° 246556) et l'Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines.

1. Préparation des instruments chirurgicaux stérilisés

  1. Nettoyer les instruments chirurgicaux avec détergent de laboratoire.
  2. Autoclave les instruments avant la chirurgie.
  3. Dans une session chirurgicale, stériliser les outils en plaçant les pointes dans un stérilisateur à billes à chaud pendant 10 minutes à 180 ° C entre deux interventions chirurgicales.

2. Préparatio....

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Résultats

Ampleur de la blessure

Le succès et la reproductibilité de ce modèle expérimental particulier dépendent de l'expérience de chaque manipulateur / chirurgien. La quantité suivante de récupération respiratoire (activité du nerf phrénique et le diaphragme d'activité) à la suite d'une blessure de C2 est en corrélation avec le restant ventrolatérale épargné substance blanche 21. Depuis la blessure est "fait main" et nécessite une certaine pratique .......

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Discussion

Les difficultés techniques de Faire la blessure modèle C2

Le modèle murin de blessures C2 est un outil intéressant pour étudier la plasticité synaptique respiratoire post-lésionnelle. Cependant, les étapes nécessaires pour produire un modèle reproductible et fiable sont nombreux et chacun pourraient avoir une incidence sur les résultats de l'étude. Par exemple, au cours du processus d'intubation, un soin extrême doit être pris puisque le tube orotrachéal peut produir.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun intérêt financier concurrents.

Remerciements

Ce travail est soutenu par un financement du programme de l'Union européenne septième cadre (FP7/2007-2013) sous convention de subvention n ° 246556 (projet RBUCE-UP européenne), HandiMedEx attribué par l'Office d'investissement public français. Marcel Bonay a été soutenue par la Chancellerie des Universités de Paris (Legs Poix), le Fonds de Dotation Recherche en Santé Respiratoire, et le Centre d'Assistance Respiratoire à Domicile d'Île de France (CARDIF)

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Animal
Male Sprague Dawley RatJanvier225-250 g
Surgical Instruments
Student Dumont #5 forcepsFine Science Tool91150-20
Student Standard Pattern ForcepsFine Science Tool91100-12
Mayo-Stille CiseauxFine Science Tool14013-15
Curved Student Vannas Spring ScissorsFine Science Tool91500-09Ciseaux à
ressort droits - Lames de 8 mmFine Science Tool15025-10Straight Blunt/Blunt
Friedman Pearson RongeurFine Science Tool16121-14
Couteau de dissection incurvé - Fine TipFine Science Tool10055-12
Porte-aiguille droit Olsen-HegarOutil de science fine12002-14
Écarteur Weitlaner-Locktitedentelé Outil de science fine17012-112x3
Blunt Suture résorbableCentravetBYO001Taille de suture 4-0
Équipement
Stérilisateur à billes chaudes FineScience Outil18000-45
Cathéter  ;CentravetCAT18816 G
Laryngoscope
Fil
Miroir laryngéCentravetMIR011
Sonneurs lactiquesCentravetRIN020
SeringueCentravet
AiguilleCentravet
O2Air LiquidI1001M20R2A001
683 Ventilateur Rongeurs 115/230VHarvard Apparatus55-0000
Vaporisateur autonomeWPIEZ-155
Lit chauffant à ligne minceWPIEZ-211
Cartouche d’airWPIEZ-258
Drugs
CarprofèneCentravet
RimadylCentravetRIM011
BuprénorphineCentravetBUP001
BaytrilCentravetBAY001
DexmédétomidineCentravetDEX010
AtipamezoleCentravetANT201
Bétadine solutionCentravetVET002
IsofluraneCentravetVET066
de guidage

Références

  1. Frankel, H. L., et al. Long-term survival in spinal cord injury: a fifty year investigation. Spinal Cord. 36, 266-274 (1998).
  2. Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. Progress in spinal cord research - a refined strategy for the Internatio....

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Réimpressions et autorisations

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