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Article de méthode

L'échographie diagnostique de souris membrane Fonction

16.2K vues

DOI :

10.3791/51290

21 avril 2014

Dans cet article

Résumé

L'imagerie par ultrasons de diagnostic s'est avéré être efficace dans le diagnostic de diverses maladies respiratoires chez les sujets humains et animaux. Nous démontrons un protocole d'échographie complet utilisé par le laboratoire du Dr Zuo pour analyser la cinétique de diaphragme spécifiquement dans les modèles de souris. C'est aussi une technique de recherche non-invasive qui peut fournir des informations quantitatives sur la fonction des muscles respiratoires de la souris.

Résumé

Analyse fonctionnelle des muscles squelettiques respiratoires rongeurs, en particulier le diaphragme, est généralement réalisée en isolant des bandes de muscles en utilisant des procédures chirurgicales invasives. Bien que ce soit une méthode efficace pour évaluer l'activité in vitro de la membrane, il s'agit d'une chirurgie non-survie. L'application de l'imagerie par ultrasons non invasif comme une procédure in vivo est bénéfique, car elle réduit non seulement le nombre d'animaux sacrifiés, mais est également approprié pour la surveillance de la progression de la maladie chez des souris vivantes. Ainsi, notre procédé d'imagerie par ultrasons peut vraisemblablement contribuer à la mise au point de nouvelles thérapies qui atténuent blessure musculaire induite par diverses maladies respiratoires. En particulier, dans le diagnostic clinique de maladies pulmonaires obstructives, l'imagerie par ultrasons a le potentiel pour être utilisé en conjonction avec d'autres tests standards pour détecter l'apparition précoce de la fatigue musculaire diaphragme. Dans le protocole actuel, nous décrivons comment évaluer précisément diaphragme contractilité dans un modèle de souris en utilisant une technique d'imagerie par ultrasons de diagnostic.

Introduction

Récemment, des techniques d'imagerie de diagnostic à ultrasons ont été appliqués à des modèles murins de l'hypertension rénovasculaire et 1,2 de cancer pancréatique. Cependant, ces techniques n'ont pas été largement utilisés dans respiratoire dosage de la fonction musculaire de rongeur. Par conséquent, nous avons développé une méthode d'imagerie par ultrasons de diagnostic comme un outil précieux pour l'évaluation in vivo longitudinales de la mobilité de la membrane chez la souris.

Il existe plusieurs avantages à l'imagerie par ultrasons de diagnostic. Par exemple, il est non invasive, sûre, por....

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Protocole

Toutes les procédures impliquant des sujets animaux ont été approuvés et achevés conformément et la conformité avec le soin et l'utilisation des animaux institutionnel Comité Ohio State University (IACUC) les règlements et les lignes directrices.

1. Souris anesthésie

  1. Mettre en place un tableau de la procédure de nettoyage avec un tampon isotherme chauffée enveloppée dans une serviette chirurgicale. Le coussinet chauffant doit être maintenue entre 30 ° C et 34 ° C pour stabiliser la température interne de l'animal, tout en réduisant le stress potentiel de l'animal.
  2. Placez la souris dans une chambre d'in....

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Résultats

Une image ultrasonore typique d'un diaphragme de souris est représentée sur la Figure 1A. Le diaphragme de la souris déplacement vertical maximal a été enregistré. Cette distance a été calculée en mesurant avec précision la profondeur du mouvement de la membrane de relaxation de la contraction à l'aide des étriers électroniques qui font partie du logiciel d'ultrasons. Tableau 1 affiche ces indications de mesures de distance des contractions du diaphragme à partir de trois so.......

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Discussion

Le protocole expérimental actuel au point des techniques d'imagerie par ultrasons de diagnostic propres à l'activité de la membrane dans un modèle de souris par le biais d'une approche non invasive, in vivo. Les réglages de l'appareil d'anesthésie sont des valeurs approchées, qui peuvent être légèrement ajustés pour chaque animal puisque les souris individu peut réagir différemment à l'anesthésie. Pour éviter l'administration de l'anesthésie inappropriée, il est important de surv.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu'ils n'ont aucun intérêt financier concurrents.

Remerciements

Ce travail est soutenu par des subventions du Fonds général et du Fonds OU G110 d'excellence en recherche de l'OSU-HRS Fonds 013000 la recherche biomédicale et. Les auteurs tiennent à remercier Lauren Chen pour son aide dans la préparation de ce manuscrit.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Système d’imagerie diagnostique par ultrasons numérique vétérinaireEdanDUS 3 VETparamètres d’échographie comprennent : fréquence de 6,5 MHz, profondeur de 29 mm. Remarque : Un échographe équivalent peut être utilisé pour ce protocole
Transducteur à réseau micro-convexeEdanC611Ou
unité portative (HCU) équivalente GE Logiq i  ;GE HealthcareGE Logiq i unité portative (HCU)Ou sonde
linéaire GE 12 MHzGE Healthcare12L-RSOu
vaporisateur anesthésique vétérinaireWebsterVeterinary Serial # : W422021L’isoflurane a été exclusivement utilisé avec ce vaporisateur (ou équivalent). Une chambre d’induction sur mesure pour l’anesthésie a été assemblée pour l’anesthésie initiale. L’anesthésie d’entretien a été réalisée à l’aide d’un cône nasal
Isothesia (Isoflurane, USP)Butler Schein29405 250MLPVL Ou un
bidon absorbant l’anesthésie Enviro-pureSurgivet Smiths Medical PM, Inc.Partie # : 32373B10Ou équivalent
Gel de transmission d’ultrasonsHM SonicN/AOu équivalent  ;
Pommade vétérinairePuralube PuralubeNDC 17033-211-38Ou tampon
isotherme DeltaphaseBraintree Scientific Inc.39DPou équivalent
ÉpilateurNairN/AOu équivalent
Rasoir électriqueRemingtonHC-5015Ou équivalent
Ruban chirurgical3M Micropore1530-1Ou équivalent
Éponges de gazeDynarex3262Ou équivalent
Les équivalente équivalent équivalent équivalent

Références

  1. Snyder, C. S., et al. Complementarity of ultrasound and fluorescence imaging in an orthotopic mouse model of pancreatic cancer. BMC Cancer. 9, 106(2009).
  2. Franchi, F., et al.

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