Le critère de jugement principal dans les essais cliniques pour les maladies neuromusculaires est généralement amélioré la fonction musculaire. Par conséquent, l'évaluation de l'effet des composés thérapeutiques potentiels sur la performance musculaire pré clinique dans des modèles de souris est d'une grande importance. Nous décrivons ici plusieurs tests fonctionnels pour y remédier.
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Article de méthode
Évaluation de la performance fonctionnelle dans le
Dans cet article
Résumé
Résumé
Dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) est une musculaire sévère et progressive perdre trouble pour lequel aucun traitement n'est disponible. Néanmoins, plusieurs composés pharmaceutiques potentiels et des approches de thérapie génique ont progressé dans des essais cliniques. Avec l'amélioration de la fonction musculaire soit le point final le plus important dans ces essais, beaucoup d'accent a été mis sur la mise en place fiable, reproductible et facile à effectuer des tests fonctionnels de pré clinique évaluer la fonction musculaire, la force, l'état et la coordination dans le modèle de souris mdx de DMD. Les deux tests invasifs et non invasifs sont disponibles. Tests qui ne aggravent la maladie peuvent être utilisés pour déterminer l'histoire naturelle de la maladie et les effets des interventions thérapeutiques (p. ex. Des tests de résistance préhension des membres antérieurs, deux essais de suspension différents en utilisant soit un fil ou une grille et rotarod fonctionnement). Sinon, course sur tapis roulant forcé peut être utilisé pour améliorer la progression de la maladie et / ou évaluereffets protecteurs des interventions thérapeutiques sur la pathologie de la maladie. Nous décrivons ici comment effectuer ces tests fonctionnels les plus couramment utilisés d'une manière fiable et reproductible. L'utilisation de ces protocoles basés sur des procédures d'exploitation standard permet de comparer les données entre les différents laboratoires.
Introduction
Dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) est la maladie neuromusculaire la plus fréquente chez les garçons nouveau-nés 1:5000. Cette maladie du dépérissement musculaire sévère et progressive est causée par des mutations dans le gène DMD qui perturbent le cadre de lecture ouvert et empêchent la synthèse de la protéine dystrophine fonctionnelle. Les fibres musculaires qui n'ont pas la dystrophine sont vulnérables à exercer dommages induits. Lors de l'épuisement de la capacité de régénération du muscle, et en raison de l'inflammation chronique des muscles endommagés, les fibres sont remplacées par du tissu conjonctif et de la graisse, ce qui conduit ....
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Protocole
Les expériences décrites ici ont été approuvés par le Comité d'éthique animale (DEC) de la Leiden University Medical Center (LUMC). Les souris ont été élevés par l'animalerie du LUMC et gardés dans des cages individuellement ventilées avec 12 h de lumière de cycles sombres. Ils ont eu accès à volonté à l'eau et une nourriture standard.
Lors de l'un des tests fonctionnels décrits ci-dessous, les conditions expérimentales doivent être strictement contrôlée pour réduire la variation. De préférence, les souris appariés par âge et sexe devraient être utilisés, comme la performance diffère entre l'âge et les sexes. ....
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Résultats
La force de préhension des membres antérieurs de type sauvage et des souris mdx augmente entre l'âge de 4-12 semaines et réduit de nouveau chez les souris âgées. Déficiences en vigueur peuvent déjà être observés chez les jeunes souris mdx. Des données représentatives de 9 semaines les souris femelles sont présentés dans les figures 1A et 1B. Bien que la fatigue ne diffère pas entre les souches encore à cet âge, les souris mdx sont plus faibles que les sour.......
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Discussion
Les tests fonctionnels présentés ici sont reproductibles, faciles à réaliser et applicable au type sauvage et une souris dystrophique indépendamment de leur âge. Les tests fournissent des outils utiles pour pré clinique évaluer la fonction musculaire, la force, l'état et la coordination. Quand tester les effets d'un composé sur l'histoire naturelle de la maladie, les tests non invasifs décrits ici (force préhension des membres antérieurs, les deux tests suspendus et le test de la tige tournante) peut être bi.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n'ont rien à révéler.
Remerciements
Nous tenons à remercier Margriet Hulsker pour son aide photographique et d'aider à obtenir des images de la souris et les examinateurs pour leurs commentaires très constructifs. Ce travail a été soutenu par ZonMw, TREAT-NMD (numéro de contrat LSHM-CT-2006-036825) et la Duchenne Parent Project.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Compteur de force de préhension de la souris | Chatillon DFE (revendu par Columbus Instruments) | # 80529 | |
| Fil de suspension Dispositif à 2 membres | Cintre en tissu ou appareil | ||
| Fil de suspension Dispositif à 4 membres | Couvercle de cage à rats ou appareil sur | ||
| Rotarod | Ugo Basil | # 47600 | |
| Tapis de course pour souris Exer 3/6 | Columbus Instruments | # 1055SRM |
Références
- Blake, D. J., Weir, A., Newey, S. E., Davies, K. E. Function and genetics of dystrophin and dystrophin-related proteins in muscle. Physiol. Rev. 82, 291-329 (2002).
- Hoffman, E. P., Brown, R. H., Kunkel, L. M. Dystrophin: the protein product of the Duchenne muscular dystroph....
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Réimpressions et autorisations
