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Article de méthode

Localisation, identification, et l'excision des dépôts adipeux murin

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DOI :

10.3791/52174

4 décembre 2014

Dans cet article

Résumé

Grâce à la connexion drastique et négative entre l'obésité et d'autres comorbidités, la recherche sur le rôle adipeux joue dans la maladie et la santé globale est justifiée. Nous présentons un protocole pour l'isolement et l'excision de dépôts adipeux permettant l'étude du tissu adipeux à l'aide in situ et des procédés in vitro.

Résumé

L’obésité a considérablement augmenté au cours des dernières décennies et touche plus d’un tiers de la population adulte américaine. L’effet économique de l’obésité en 2005 a atteint une somme stupéfiante de 190,2 milliards de dollars en coûts médicaux directs seulement. L’obésité est un facteur de risque majeur pour un large éventail de maladies. Historiquement, on savait peu de choses sur le tissu adipeux et ses fonctions majeures et essentielles dans le corps. L’adipeux brun et blanc sont les deux principaux types d’adipeux, mais la littérature actuelle a identifié un nouveau type de graisse appelé brite ou adipeux beige. La recherche a montré que les dépôts adipeux ont des profils métaboliques spécifiques et que certains dépôts permettent une propension à l’obésité et à d’autres troubles connexes. L’objectif de ce protocole est de fournir aux chercheurs la capacité d’identifier et d’exciser les dépôts adipeux qui permettront d’analyser différents effets factoriels sur le tissu adipeux ; ainsi que le rôle bénéfique ou préjudiciable que joue le tissu adipeux dans la maladie et la santé globale. L’isolement et l’excision des dépôts adipeux permettent aux enquêteurs d’examiner les changements morphologiques globaux ainsi que les changements histologiques. L’isolat adipeux peut également être utilisé pour des études moléculaires afin d’évaluer les changements transcriptionnels et translationnels ou pour des expériences in vitro afin de découvrir des cibles d’intérêt et des mécanismes d’action. Cette technique est supérieure aux autres techniques publiées en raison de sa conception permettant d’isoler plusieurs dépôts avec simplicité et une contamination minimale.

Introduction

Adipeux fait une apparition remarquée sous les projecteurs des médias, due à l'augmentation spectaculaire de l'obésité au cours des dernières décennies du 20e siècle. L'obésité touche actuellement plus d'un tiers des adultes et 17% des enfants et des adolescents aux États-Unis (US) 1. Couvrant tous les groupes ethniques, les recherches statistiques entourant l'épidémie d'obésité a montré que les Noirs non hispaniques ont le plus haut taux ajusté selon l'âge de l'obésité (49,5%) par rapport aux Américains d'origine mexicaine (40,4%), les tous les Hispaniques (39,1%), et non hispaniques blancs (34,3%) 2. L'e....

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Protocole

NOTE: Toutes les procédures d'animaux ont été effectuées avec l'approbation de la Commission institutionnelle de protection des animaux et l'utilisation (IACUC) de l'Université de Cincinnati et en conformité avec le Guide de soin et l'utilisation des animaux de laboratoire des National Institutes of Health (NIH Publication Aucun . 85-23, révisée en 1996).

1. Euthanasier et stériliser la souris

  1. Placez la souris dans une sélection contenant une dose supratheraputic de l'isoflurane et de permettre de respirer à l'effet. Une fois que la souris est euthanasié, retirer de la boîte.
  2. Cervicale disl....

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Résultats

Identification et la localisation du tissu adipeux inguinal sous-cutanée, adipeux brun interscapulaire, adipeux de l'épididyme viscérale (figure 1), ainsi que le tissu adipeux arc périvasculaire aortique, adipeux de l'aorte thoracique, adipeux aortique surrénale et adipeux aorte abdominale (figure 2) a été réalisée avec succès en utilisant la méthode chirurgicale décrite. L'examen histologique et la différenciation entre les échantillons sur les MTD et Wat ont été évalués positivement u.......

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Discussion

L'obésité peut mener à une grande foule de morbidités et la pleine compréhension du rôle que joue adipeux ne est pas bien compris; recherche donc poursuivi dans le domaine de adipeux est nécessaire. Des modèles animaux, en particulier des modèles murins sont idéales pour la recherche initiale à la progression des maladies et des essais de traitements pharmaceutiques potentiels. En utilisant ces modèles, l'isolement et l'excision des dépôts adipeux précise est un outil extrêmement important et nécessaire dans.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents ou d’autres conflits d’intérêts.

Remerciements

Les auteurs n’ont aucune reconnaissance.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
IsofluraneMed-Vet International#RXISO-250
70 % EthanolFisher07-678-001
DMEF-12Sigma AldrichD-6421Réchauffer au bain-marie avant de mettre le mouchoir.
2 ml Tubes à microcentrifugerMidsciMCT-200-C-S
Saline tamponnée au phosphateSigma AldrichP5368-10PAK

Références

  1. Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010. NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).
  2. Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index....

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