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Article de méthode

Souris Pneumonectomie modèle de croissance compensatoire Lung

13.2K vues

DOI :

10.3791/52294

17 décembre 2014

Dans cet article

Résumé

La pneumonectomie chez la souris est un modèle couramment utilisé de croissance pulmonaire compensatoire. Cette procédure peut être utilisée en conjonction avec le traçage de la lignée ou des modèles de souris transgéniques pour élucider les mécanismes sous-jacents.

Résumé

Chez l’homme, la réparation et le remodelage perturbés des poumons lésés contribuent à une foule de troubles pulmonaires aigus et chroniques qui peuvent finalement conduire à l’invalidité ou à la mort. Les modèles animaux de réparation et de régénération pulmonaires basés sur les lésions sont limités par des réponses spécifiques aux blessures, ce qui rend difficile de différencier les changements liés à la réponse et à la résolution des lésions des changements liés à la réparation et à la régénération pulmonaires. Cependant, l’utilisation de modèles animaux pour identifier ces voies de signalisation de réparation et de régénération est essentielle au développement de nouvelles thérapies visant à améliorer la fonction pulmonaire après une lésion pulmonaire. Le modèle de pneumonectomie chez la souris utilise la croissance pulmonaire compensatoire pour isoler ces signaux de réparation et de régénération afin de définir plus clairement les mécanismes de re-septation alvéolaire. Ici, nous décrivons notre technique pour réaliser une pneumonectomie de souris et une pneumonectomie simulée. Cette technique peut être utilisée en conjonction avec le traçage de la lignée ou d’autres modèles de souris transgéniques pour définir le mécanisme moléculaire et cellulaire de la réparation et de la régénération pulmonaires.

Introduction

La fonction principale du poumon est de fournir de l'oxygène et du dioxyde de carbone échange entre un organisme et l'atmosphère. Chez l'homme, une multitude de conditions congénitales et acquises entraîner une diminution de la surface des poumons qui résulte de la fonction pulmonaire réduite. Bien que de nombreuses thérapies tels que les corticostéroïdes inhalés, les bronchodilatateurs, l'oxygène supplémentaire, et la ventilation mécanique chronique sont utilisés pour atténuer les conséquences de la fonction pulmonaire 1-3, la thérapie idéale pour ces conditions serait favoriser la repousse du tissu pulmonaire fonctionnelle - ce est à ....

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Protocole

utilisation déclaration animale:: NOTE Toutes les procédures dans cette étude ont été menées avec l'approbation et en suivant les lignes directrices du Comité des soins (IACUC) Institutionnel utilisation des animaux et à l'Hôpital pour enfants de Cincinnati. Huit semaines C57BL / 6J mâles ont été obtenus auprès de Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME) et on les laisse se acclimater pendant une semaine avant utilisation. Jusqu'à la chirurgie, les animaux ont été logés dans un établissement de barrière exempts d'agents pathogènes et à condition chow autoclave et filtré de l'eau ad libdium. Chaque cage de la souris a été fournie avec un air ....

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Résultats

. Une parcelle de PNX et le poids de souris subi une opération fictive est fourni à la figure 6 Dans nos mains, la survie est toujours de 95 à 100% pour les deux PNX et imposture pneumonectomie. Pour une description de la façon dont le poumon droit re-pousse dans ce modèle et l'évolution dans le temps prévu, nous renvoyons le lecteur aux manuscrits de Gibney et al. 15 et Wang et al. 14

Plusieurs écueils les plus courants doivent êt.......

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Discussion

Nous avons fourni la description la plus détaillée des procédures de PNX de PNX de la souris et de la souris faux rapportés à ce jour. Nous avons fait le lecteur au courant de plusieurs des écueils les plus courants que les enquêteurs de la procédure d'apprentissage rencontrent couramment, et nous avons présenté plusieurs techniques développées par notre laboratoire pour atténuer ces écueils. D'autres laboratoires qui utilisent ce modèle peuvent avoir développé d'autres modifications de technique ou d'ut.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Les auteurs tiennent à remercier la Division des services vétérinaires de l’Hôpital pour enfants de Cincinnati pour son aide. Ce manuscrit a été soutenu par les National Institutes of Health K12 HD028827. Anna Perl, PhD, a enseigné aux auteurs cette procédure chirurgicale.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Applicateur à clip vasculaire de 6 poucesTeleflex Medical (WECK)137062
Horizon petit clip rouge titaneTeleflex Medical (WECK)1201
Pince incurvée à motif étroit 12 cmOutils de science fine11003-12
Pince Graefe dentelée incurvée 10 cmOutils de science fine11052-10
Porte-aiguilleCastroviejoFine Science Tools12565-14
Ciseaux droits 9 cm Strabisme (pointe émoussée)Fine Science Tools14075-09
Ciseaux fins trempés droits 8,5 cmFine Science Tools14090-09
Pointe droite et émoussée Ciseaux à ressort Cohan-VannasFine Science Tools15000-12
Colle pour peauGluture32046
22 G Angiocathéter
24 G Angiocathéter
3 ml Seringue
4 Écarteurs
2 Écarteurs
5-0 Prolene sur aiguille coupante incurvéeEthicon8698G
0,5 ml Seringue sur aiguille
Saline
Buprénorphine
Press-n-Seal wrapGlad Products Company
12 x 12 pouces Pile de panneaux de liègeOffice Depot
70 % Ethanol
Bétadine
Ventilateur de sourisHugo Sachs ElektronnikMinivent Type 845
Vaporisateur d’isofluraneOHMEDAExcel 210 SE
Pommade pour larmes artificiellesPuralubeNDC : 17033-211-38
Luer lockcourtslongs 27 Gnormale

Références

  1. Strueby, L., Thebaud, B. Advances in bronchopulmonary dysplasia. Expert review of respiratory medicine. , (2014).
  2. Donn, S. M., Sinha, S. K. Recent advances in the understanding and management of bronchopulmonary dysplasia. Seminars in fetal & neonatal med....

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