Un poisson-alimentation Laboratoire d'essais biologiques pour évaluer l'activité antiprédatrices des métabolites secondaires dans les tissus d'organismes marins

Résumé

Ce bio-essai emploie un poisson prédateur de modèle pour évaluer la présence de métabolites alimentation-dissuasion à partir d'extraits organiques des tissus d'organismes marins à des concentrations naturelles en utilisant une matrice d'aliments comparable nutritionnel.

Résumé

L’écologie chimique marine est une discipline jeune, issue de la collaboration de chimistes de produits naturels et d’écologistes marins dans les années 1980 dans le but d’examiner les fonctions écologiques des métabolites secondaires des tissus d’organismes marins. Il en a résulté une progression de protocoles qui ont permis d’affiner de plus en plus la pertinence écologique de l’approche expérimentale. Nous présentons ici la version la plus récente d’un essai biologique en laboratoire sur l’alimentation des poissons qui permet aux chercheurs d’évaluer l’activité antiprédatrice des métabolites secondaires des tissus d’organismes marins. Les métabolites organiques de toutes polarités sont extraits de manière exhaustive des tissus de l’organisme cible et reconstitués à des concentrations naturelles dans une matrice alimentaire adaptée à la nutrition. Des granulés alimentaires expérimentaux sont présentés à un prédateur généraliste dans des tests d’alimentation en laboratoire pour évaluer l’activité antiprédatrice de l’extrait. La procédure décrite dans le présent document utilise la tête à tête bleue, Thalassoma bifasciatum, pour tester l’appétence des invertébrés marins des Caraïbes ; Cependant, la conception peut être facilement adaptée à d’autres systèmes. Les résultats obtenus à l’aide de cet essai en laboratoire sont un prélude important aux expériences sur le terrain qui reposent sur les réponses alimentaires d’un ensemble complet de prédateurs potentiels. De plus, cet essai biologique peut être utilisé pour diriger l’isolement des métabolites dissuasifs de l’alimentation par fractionnement guidé par essai biologique. Cet essai biologique sur l’alimentation a fait progresser notre compréhension des facteurs qui contrôlent la distribution et l’abondance des invertébrés marins sur les récifs coralliens des Caraïbes et pourrait éclairer les investigations dans divers domaines de recherche, notamment la pharmacologie, la biotechnologie et l’écologie évolutive.

Introduction

l'écologie chimique développé grâce à la collaboration de chimistes et écologistes. Alors que le sous-discipline de l'écologie terrestre chimique a été autour depuis un certain temps, celle de l'écologie marine chimique est âgé de seulement quelques décennies, mais a fourni des informations importantes sur la structure des organismes marins ^1-8 l'écologie et de la communauté de l'évolution. Profitant des technologies émergentes de plongée sous-marine et la spectroscopie RMN, chimistes organiques générés rapidement un grand nombre de publications décrivant de nouveaux métabolites invertébrés et les algues marines benthiques dans les anné....

Protocole

REMARQUE: L'étape 3 de ce protocole implique des sujets sur des animaux vertébrés. La procédure a été conçu afin que les animaux bénéficient d'un traitement le plus humain possible et a été approuvé par le Comité institutionnel de protection des animaux et l'utilisation (IACUC) à l'Université de Caroline du Nord Wilmington.

1) Extraction de tissus

1. Utilisez tissu qui est dans son état naturel d'hydratation et pas pressé, desséché ou trop humide que ceci modifie la concentration volumétrique de métabolites secondaires. Couper ou couper le tissu en morceaux ou en tranches qui peuvent être insérés dans un tube d....

Résultats

Nous rapportons ici les résultats de cet essai biologique pour six espèces d'éponges commun des Caraïbes (figure 2). Ces données ont été initialement publiés en 1995 par Pawlik et al. ¹² et démontrent la puissance de cette approche pour étudier les différences dans les stratégies de défense chimiques entre taxons concomitants. Les résultats ont été rapportés comme un nombre moyen de pastilles d'aliments consommés + erreur standard (SE) pour chaque espèce. Presque pas de pasti.......

Discussion

La procédure décrite ici fournit un protocole de laboratoire relativement simple, écologiquement pertinent pour évaluer défenses chimiques antiprédatrices dans les organismes marins. Ici nous passons en revue les critères importants qui sont satisfaits par cet ensemble de méthodes:

(1) prédateur appropriée. Ce test alimentation utilise le labre bluehead, Thalassoma bifasciatum, l'un des poissons les plus abondantes sur les récifs coralliens dans les Caraïbes. Le bluehea.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Dichlorométhane	Fisher Scientific	D37-20
Méthanol	Fisher Scientific	A41220
Chlorure de calcium anhydre	Fisher Scientific	C614-500
Fluide caloporteur cryocool	Fisher Scientific	20-548-146	Pour concentrateur sous vide
Acide alginique Sel de sodium à haute viscosité	MP Biomedicals
Anneaux de manteau de calmar	N/A	N/A	Peut être acheté à l’épicerie
Benzoate de dénatonium	Aldrich	D5765
50 ml Tube à centrifuger gradué	Fisher Scientific	14-432-22
Flacon à scintillation de 20 ml	Fisher Scientific	03-337-7
Pipettes Pasteur jetables	Fisher Scientific	13-678-20D
Ampoules en caoutchouc pour pipettes Pasteur	Fisher Scientific	03-448-24
Ampoules rouges pour la distribution de granulés	Fisher Scientific	03-448-27
Fiole à fond rond de 250 ml	Fisher Scientific	10-067E
Adaptateur de flacon à scintillation pour rotavap	Fisher Scientific	K747130-1324
Weightboats	Fisher Scientific	02-202B
Microspatule	Fisher Scientific	21-401-10
Seringue graduée de 5 ml	Fisher Scientific	14-817-53
Seringue graduée de 10 ml	Fisher Scientific	14-817-54
Lame de rasoir	Fisher Scientific	S17302

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