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Article de méthode

Test pour Odeur discrimination et l'accoutumance chez la souris

18.4K vues

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DOI :

10.3791/52615

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5 mai 2015

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Dans cet article

Résumé

Ce manuscrit décrit un protocole pour examiner le système olfactif des rongeurs. Le test d’habituation/déshabituation olfactive permettra aux enquêteurs de déterminer si une souris s’habitue à une odeur présentée à plusieurs reprises et si la souris démontre une déshabituation lorsqu’on lui présente une nouvelle odeur.

Résumé

Cette vidéo montre une technique pour établir la présence d’un système olfactif fonctionnant normalement chez une souris. Le test permet de déterminer si la souris peut faire la distinction entre les odeurs non sociales et les odeurs sociales, si la souris s’habitue à une odeur présentée à plusieurs reprises et si la souris démontre une désaccoutumance lorsqu’elle est confrontée à une nouvelle odeur. Étant donné que de nombreux tests de comportement social mesurent la réponse de l’animal de laboratoire à une souris familière ou nouvelle, les faux positifs peuvent être évités en établissant que les animaux peuvent détecter et discriminer les odeurs sociales. Il existe des considérations similaires dans les tests d’apprentissage, tels que le conditionnement de la peur qui utilisent l’odeur pour créer un nouvel environnement ou des indices olfactifs comme stimulus associatif. Les déficits du système olfactif nuiraient à la capacité de distinguer les contextes et de former une association avec un signal olfactif pendant le conditionnement de la peur.

Dans le test d’habitation/déshabituation des odeurs, la souris est présentée à plusieurs reprises avec plusieurs odeurs. Chaque odeur est présentée trois fois pendant deux minutes. L’enquêteur enregistre le temps de reniflement dirigé vers l’odeur comme mesure de la réactivité olfactive. Une souris typique montre une diminution de la réponse à l’odeur au cours de présentations répétées (habituation). L’expérimentateur présente alors une nouvelle odeur qui suscite une augmentation du reniflement vers la nouvelle odeur (déshabituation). Après la présentation répétée de la nouvelle odeur, l’animal montre à nouveau une accoutumance. Ce protocole implique la présentation de l’eau, de deux odeurs non sociales ou plus et de deux odeurs sociales. En plus de réduire les facteurs de confusion expérimentaux, ce test peut fournir des informations sur la fonction des systèmes olfactifs de nouvelles lignées de souris knock-out, knock-in et conditional knockout.

Introduction

Les souris sont dépendants de l'olfaction pour naviguer nouveaux environnements, trouver de la nourriture, pour reconnaître d'autres personnes, et le comportement sexuel 1-3. Il est essentiel que les enquêteurs d'établir si oui ou non les animaux de laboratoire ont un sens de l'odorat de fonctionnement avant d'administrer des tests de comportement qui impliquent la nourriture, l'interaction sociale, ou les odeurs destinés à obtenir une réponse de la souris. Anosmie ou de l'impossibilité de faire la distinction entre les différentes odeurs, peut entraîner des faux positifs ou négatifs dans une grande variété de paradigmes comport....

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Protocole

Les souris mâles adultes utilisés dans l'expérience suivante ont été générées et logés à l'Université Baylor à une température ambiante de 22 ° C, avec une lumière de 14 h et 10 h foncé (20:00-06h00 h) cycle diurne. Les souris ont reçu un accès ad libitum à la nourriture et de l'eau. Toutes les procédures aux souris étaient en conformité avec les Instituts nationaux de la santé Lignes directrices pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire et le protocole des animaux a été approuvé par l'Université Baylor de protection des animaux et l'utilisation Comité. Les souris ont été testés en fin de matinée / début d'après midi. Pour toutes les pr....

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Résultats

Suivant le protocole décrit, les résultats ont été enregistrés à l'aide de dix adultes (de jour postnatal 90-120) mâles C57BL / 6J et huit hommes FVB souche mixte fond (jour postnatal 50-70). Le test a été effectué par un seul enquêteur sur plusieurs jours. Chaque point sur les graphiques représente le temps moyen passé enquête une odeur.

Lorsque le coton-tige trempé dans de l'eau est d'abord introduit, les souris passent beaucoup de temps à étudier ce roman objet (Figure.......

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Discussion

Les résultats fournis dans le présent document sont optimales pour les souris. Les souris démontrent une réponse forte à un roman odeur, puis habituent rapidement. Une des étapes clés de cette méthode est la préparation des odeurs. L'enquêteur doit prendre grand soin d'isoler les odeurs un de l'autre pour éviter la contamination. Un autre aspect important est la présentation du coton-tige. L'enquêteur doit résoudre le meilleur emplacement de la pointe de coton de sorte que la souris peut enquêter sur la .......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Ce travail est soutenu par une subvention du Conseil de recherche de l’Université Baylor et par une subvention de recherche de la Fondation pour l’épilepsie.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Cage à sourisAllentownCage
Couvercle en fil métalliqueAllentownBCU Souris WBL 2500
LiterieHarlan7090 Sani-Chips
VWR89031-270Manche en bois 6"
Extrait de bananeMcCormick
Extrait d’amandeMcCormick
Ruban de laboratoireVWR89098-062
ChronomètreVWR62374-000
Gants en nitrileVWR82026
Dispositif de chronométrageVWR61161-350
Tubes coniques de 15 mlVWR89003-294
Béchers de 2 L.Pyrex1003
ParafilmParafilmPM-9924" x 250'
Bouteille de 1 L avec bouchonVWR89000-240
à souris standardCotons-tiges

Références

  1. Doty, R. L. Odor-guided behavior in mammals. Experientia. 42, 257-271 (1986).
  2. Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in respon....

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Réimpressions et autorisations

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