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Article de méthode

Ex Situ Normothermique machine perfusion de foies de donneurs

11.7K vues

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DOI :

10.3791/52688

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26 mai 2015

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Dans cet article

Résumé

Nous présentons ici un protocole décrivant ex situ oxygénée machine à perfusion de greffes de foie donateurs. Cet article contient une étape par étape protocole de se procurer et de préparer la greffe du foie pour la machine perfusion, préparer le liquide de perfusion, amorcer la machine à perfusion et d'effectuer oxygénée normothermique machine à perfusion de la greffe de foie.

Résumé

Contrairement à la conservation à froid statique conventionnelle (0-4 ° C), ex situ machine à perfusion peut fournir une meilleure préservation des foies de donneurs. Perfusion continue d'organes offre la possibilité d'améliorer la qualité des organes et permet ex situ évaluation de la viabilité des foies de donneurs avant la transplantation. Cet article vidéo fournit une étape de protocole d'étape pour ex situ de perfusion de la machine normothermique (37 ° C) de foies de donneurs humains en utilisant un dispositif qui fournit une pression et une température contrôlée irrigation sanguine pulsatoire de l'artère hépatique et la perfusion en continu de la veine porte. Le fluide de perfusion est oxygéné par deux creux oxygénateurs à membrane de fibres et la température peut être réglée entre 10 ° C et 37 ° C. Au cours de la perfusion, l'activité métabolique du foie, ainsi que le degré de lésion peut être évaluée par l'analyse biochimique des échantillons prélevés dans le liquide de perfusion. Machine de perfusion est un outil très prometteurà augmenter le nombre de foies qui sont appropriés pour la transplantation.

Introduction

La méthode actuelle de préservation d'organe dans la transplantation du foie est à débusquer avec et le stockage ultérieur des foies de donneurs dans le froid (0-4 ° C) liquide de conservation (tels que l'Université du Wisconsin solution ou une solution d'histidine-tryptophane-Ketoglutarate). Cette méthode est appelée stockage à froid statique (SCS). Bien que le taux métabolique de foies à 0-4 ° C est très faible, il existe toujours une demande pour / min / g de tissu hépatique 0,27 pmol d'oxygène, qui ne peut être assurée pendant SCS 1. La méthode classique de SCS, par conséquent, entraîne un certain degré de blessure (supplémentaire) de f....

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Protocole

Ce protocole a été approuvé par la commission médicale éthique (Medisch Ethische Toetsingscommissie) de l'Université Medical Center Groningen, aux Pays-Bas.

1. Préparation du liquide de perfusion

Remarque: Le volume total du fluide de perfusion préparée pour perfusion normothermique Machine selon ce protocole est 2233 ml et l'osmolarité ciblée du fluide de perfusion est 302 mOsmol / l.

  1. A partir des composants du fluide de perfusion décrit dans le tableau 1, maintenir les humains concentré de globules rouges, du plasma frais congelé et séparé de l'albumine humaine. Mélang....

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Résultats

12 foies humains qui ont été refusé pour la transplantation pour des raisons diverses ont été utilisés après avoir obtenu le consentement éclairé pour la recherche de familles de donneurs. Caractéristiques des donateurs sont décrits dans le Tableau 2. Les foies de donneurs humains ont été perfusés normothermically pendant 6 heures en utilisant le protocole décrit dans le présent document. La qualité des greffes de foie ont été évalués par la surveillance de l'homogénéité macroscopique de la perfusio.......

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Discussion

Cette vidéo fournit une étape par étape pour protocole de la machine normothermique perfusion de foies de donneurs humains en utilisant un dispositif qui permet contrôlée double pression de perfusion dans l'artère et la veine porte hépatique. En suivant ce protocole, les défaillances techniques de la machine de perfusion n'a pas eu lieu et tous les greffes étaient bien perfusé et bien oxygénée. Les foies perfuses ex situ ont hémodynamique étaient stables et métaboliquement actif, tel que défini par la p.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs de ce manuscrit ont pas de conflit d'intérêt à divulguer.

Remerciements

Ce travail de recherche a été soutenue financièrement par des subventions fournies par Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan De Cock Kornelis Stichting et Tekke Huizingafonds, le tout dans les Pays-Bas. Nous sommes reconnaissants à tous les coordinateurs de transplantation néerlandais pour identifier les potentiels jeté foies et obtention du consentement éclairé.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Liver AssistOrgan AssistOA. Li.Li.140Dispositif de perfusion
Liver Assist paquet jetableOrgan AssistOA. Li.DP.540Set et canules jetables
Meredith No.8Vygon Nederlands B.V.1362082Canule biliaire
Albumine humaine 200 g/L / ALBUMANSanquin15522598100 ml
Nutrition parentérale modifiéeBaxter Nederland B.V.N14G30E7,35 ml
Multivitamines pour perfusion / CERNEVITBaxter International Inc.98009277 &mu ; l
Oligo-éléments concentrés pour perfusion / NUTRITRACEB. Braun Melsungen AG148113327,35 ml
Métronidazole 5 mg/mlBaxter Nederland B.V.9818188240 ml
de céfazoline / SERVAZOLINSandoz B.V.156113372 ml
Insuline à action rapidedivers fournisseurs20 ml
Glubionate de calcium, solution intraveineuse 10 %, 137,5 mg/mlSandoz9703869540 ml
H2Ostérile Fresenius Kabi Nederland B.V.9808445351,3 ml
de NaCl 0,9 %Baxter Nederland B.V.15262510160 ml
d’héparine 5 000 IE/ml pour administration intraveineuseLEO Pharma B.V.980261784 ml
Bicarbonate de sodium 8,4 %B. Braun Melsungen AG97973874La quantité dépend du pH
Globule rouge tassé (en SAGM)Banque de sang (Sanquin N0012000750 ml
Plasma frais congeléBanque de sang (Sanquin)N04030A0/N04030B0900 ml

Références

  1. Plaats, A., et al. Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium. Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).
  2. op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J.

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Réimpressions et autorisations

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