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Article de méthode

Souris Direct Trauma / Graver Modèle d'ossification hétérotopique

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DOI :

10.3791/52880

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6 août 2015

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Dans cet article

Résumé

Un modèle de ténotomie d’Achille et de brûlure de l’ossification hétérotopique permet l’étude fiable de la formation osseuse ectopique induite par un traumatisme sans l’application de facteurs exogènes.

Résumé

L’ossification hétérotopique (OH) est la formation d’os à l’extérieur du squelette qui se forme à la suite d’un traumatisme majeur, de brûlures et d’interventions chirurgicales orthopédiques. La majorité des modèles animaux utilisés pour étudier l’OH reposent sur l’application de substances exogènes, telles que les protéines morphogénétiques osseuses (BMP), les constructions cellulaires exogènes ou les mutations génétiques dans la signalisation BMP. Bien que ces modèles soient utiles, ils ne reproduisent pas avec précision les états inflammatoires à l’origine de la majorité des cas d’OH. Nous décrivons ici un modèle de brûlure/ténotomie chez la souris qui produit de manière fiable une OH focalisée. Ce protocole consiste à créer une brûlure de contact de 30 % de la surface corporelle totale, une brûlure de contact d’épaisseur partielle sur la peau dorsale ainsi qu’une division du tendon d’Achille à son point médian. Le fait de s’appuyer uniquement sur une lésion traumatique pour induire une OH à un endroit prévisible permet d’étudier dans le temps la formation osseuse hétérotopique endochondrale à partir des processus physiologiques intrinsèques et de l’environnement uniquement. Cette méthode pourrait s’avérer déterminante dans la compréhension des voies inflammatoires et ostéogéniques impliquées dans l’OH induite par un traumatisme. De plus, comme l’OH se développe dans un lieu et une évolution temporelle prévisibles dans ce modèle, il permet la recherche pour améliorer les stratégies d’imagerie précoce et les modalités de traitement afin de prévenir la formation d’OH.

Introduction

L’ossification hétérotopique (OH) est la formation d’os ectopique dans lequel les cellules ostéo-puissantes sont induites de manière aberrante à former de l’os endochondral à l’extérieur du squelette. Bien que les détails de la voie de formation des OH soient encore largement inconnus, un paradigme accepté comprend trois facteurs clés : un incident inflammatoire incitatif, une niche permissive et des cellules souches mésenchymateuses capables de former de l’os. 1-3 L’OH est une comorbidité courante qui complique plus de 60 % des brûlures graves, 65 % des blessures liées au combat et 10 % des cas de chirurgie orthopédique invasive. 4,5 Cependant,....

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Protocole

Déclaration éthique: Toutes les procédures d'animaux ont été effectuées en stricte conformité avec les bonnes pratiques de l'animal tel que défini dans les directives fournies dans le Guide pour l'utilisation et l'entretien des animaux de laboratoire: huitième édition de l'Institute for Laboratory Animal Research (ILAR, 2011) et ont été approuvé par le soin et l'utilisation Commission institutionnelle animale de l'Université du Michigan (PRO0001553).

1. Souris Interventions chirurgicales

REMARQUE: Utilisez 8-10 semaine vieille souris C57BL / 6. Autres âges, des origines et souches de ....

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Résultats

Dans la présente étude, le protocole est décrit par le modèle de souris précédemment publié des traumatismes / brûler induite HO. 14-17 Cela implique la création d'une blessure musculo-squelettique localisée concurrente avec une ténotomie Achille et agression inflammatoire mondial avec une épaisseur partielle brûlures. Il en résulte la formation fiable de l'os au niveau du site réactif de ténotomie qui peut être suivie à l'imagerie en série. À ce jour, toutes les souris (plus de 50) qui ont souten.......

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Discussion

L’ossification hétérotopique représente une déficience fonctionnelle majeure à laquelle sont confrontés les patients qui subissent des traumatismes, des brûlures et des procédures musculo-squelettiques invasives. La population la plus à risque est celle des soldats dans les conflits modernes qui ont subi d’importantes blessures dues à des explosions dues à des mécanismes tels que les engins explosifs improvisés (EEI). 18 L’amélioration du gilet pare-balles et des unités médicales positionnées à l’avant perme.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à révéler

Remerciements

Nous remercions Amanda Fair, la CMI, ainsi que Kathy Sweet et l’ORL de l’UM pour leur aide avec l’imagerie et l’analyse μCT. Financement : BL Financé par 1K08GM109105-01 et Plastic Surgery Foundation National Endowment Award.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
C57BL/6 sourisJackson Laboratory6648-10 semaines
Isoflurane &ndash ; FlurisoVET one, Boise, IDV1 501017
Buprénorphine &ndash ; BuprenexReckitt Benckiser HealthcareNDC 12496-0757-10,3 mg/ml solution
BetadineOwens and Minor, Mechanicsville, VA2047PVP202
5-0 Vicryl suturesEthicon, Summerville, NJJ493
Tegaderm Film, 6 cm x 7 cm3M1624WCouper en deux pour couvrir correctement le site de brûlure
et micro ; CT - GE eXplore Locus SPGE Healthcare Pre-Clinical Imaging, London, ON, Canada
Microview 2.2 Advanced Bone Analysis ApplicationHealthcare Pre-Clinical Imaging, London, ON, Canada
GE

Références

  1. Leblanc, E., et al. BMP-9-induced muscle heterotopic ossification requires changes to the skeletal muscle microenvironment. J Bone Miner Res. 26 (6), 1166-1177 (2011).
  2. Shore, E. M. Osteoinductive signals and heterotopic ossification. J Bon....

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Réimpressions et autorisations

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