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Article de méthode

Stimulation du nerf vague comme un outil pour induire la plasticité dans les voies pertinentes pour l'extinction d'apprentissage

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DOI :

10.3791/53032

21 août 2015

Dans cet article

Résumé

Stimulation du nerf vague (VNS) a émergé comme un outil pour induire la plasticité synaptique ciblée dans le cerveau antérieur de modifier une gamme de comportements. Ce protocole décrit comment mettre en œuvre VNS pour faciliter la consolidation de la mémoire la peur de l'extinction.

Résumé

Extinction décrit le processus d’atténuation des réponses comportementales aux stimuli neutres lorsqu’ils ne fournissent plus le renforcement qui a maintenu le comportement. Il existe une correspondance étroite entre la peur et l’anxiété humaine, et par conséquent, les études sur l’apprentissage de l’extinction pourraient donner un aperçu de la nature biologique des troubles liés à l’anxiété tels que le trouble de stress post-traumatique, et elles pourraient aider à développer des stratégies pour les traiter. La recherche préclinique vise à faciliter l’apprentissage de l’extinction et à induire une plasticité ciblée dans les circuits d’extinction pour consolider la mémoire nouvellement formée. La stimulation du nerf vague (VNS) est une approche puissante qui fournit une libération temporelle et spécifique au circuit de neurotransmetteurs, entraînant une modulation des réseaux neuronaux engagés dans une tâche en cours. Le VNS améliore la consolidation de la mémoire chez le rat et l’homme, et l’appariement du VNS avec l’exposition à des signaux conditionnés améliore la consolidation de l’apprentissage de l’extinction chez le rat. Nous fournissons ici un protocole détaillé pour la préparation des pièces sur mesure et les procédures chirurgicales requises pour le VNS chez le rat. En utilisant ce protocole, nous montrons comment la VNS peut faciliter l’extinction des réponses de peur conditionnée dans une tâche de conditionnement de la peur auditive. De plus, nous fournissons des preuves que VNS module la plasticité synaptique dans la voie entre le cortex préfrontal médial infralimbique (IL) et le complexe basolatéral de l’amygdale (BLA), qui est impliqué dans l’expression et la modulation de la mémoire d’extinction.

Introduction

Classique conditionnement de la peur fournit un modèle animal largement utilisé pour étudier la base biologique des troubles anxieux. Au cours de conditionnement de la peur, un stimulus aversif (le stimulus inconditionné, États-Unis, par exemple, un choc électrique) est présenté en conjonction avec un stimulus neutre, comme un ton et / ou un contexte (le stimulus conditionné; CS). Au cours de conditionnement de la peur, les associations entre le CS et les États-Unis sont formés. Finalement, la présentation de la CS seul déclenche une réaction de peur (la réponse conditionnée; CR). Dans la crainte d'extinction, le CS est présenté à plusieurs reprises en l....

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Protocole

Toutes les procédures décrites dans le présent protocole sont effectués en conformité avec le Guide NIH pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire, et ils ont été approuvés par le soin et l'utilisation des animaux Commission institutionnelle de l'Université du Texas à Dallas.

1. Construction de VNS Poignets

  1. Créer un outil de forage par scier l'extrémité pointue d'une aiguille 22 G ½.
  2. Lancez maintenant la fin brutale de l'aiguille 22 G ½ sur un fichier de métal à plusieurs reprises pour l'aplatir. Tenez l'aiguille à un angle de 45 degrés vers le fichier et lancez plusieurs ....

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Résultats

Cet article donne des exemples de résultats qui peuvent être obtenus en utilisant VNS apprentissage en combinaison avec d'extinction à réduire l'expression de la réaction de peur conditionnée chez le rat. Pour les jours 1 et 2 (auditif conditionnement de la peur), les rats ont été formés sur une tâche peur de conditionnement auditif dans lequel footshocks ont été jumelés avec un ton. Le Jour 3 (Pré Traitement Test), les tons ont été présentés en l'absence de footshocks pour mesurer les niveaux de congélation.......

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Discussion

Nous présentons ici un protocole qui est utilisé pour faciliter l'extinction de la peur conditionnée au cours d'une seule séance d'exposition à des indices conditionné 19 et de moduler la plasticité dans la voie entre le cortex infralimbic et l'amygdale basolatérale qui peuvent servir de médiateur extinction apprentissage 20. Une étape cruciale pour le succès de ce protocole est la bonne livraison de VNS pendant la formation de l'extinction. Par conséquent, une attention particu.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont pas d’intérêts concurrents ou de conflits.

Remerciements

Cette recherche a été soutenue par l’Institut national de la santé mentale MH 086960-01A1 (Christa K. McIntyre).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Alcool
AtropineFisherA0132-5G
BétadineHenry Schein69066950
Peroxyde d’hydrogène  ;CVS209478
KétamineHenry Schein  ;1129300
MarcaineHenry Schein6312615
Huile minéraleCVS152355
NeosporinCVS629451
OxygenHome Depot304179
PennicillinFisherPENNA-10MU
PropaneHome Depot304182
XylazineHenry Schein4019308
Tools
Jewelery TorchSmith Equipment23-1001D
Aiguille à coudreWalgreens441831
#5 Forceps (2)Fine Science Tools11254-20
Fer à souderHome Depot  ;
AmScope SM-4TX-144A 3.5X-45X Circuit imprimé Boom Stéréo Microscope + 144 LEDAmScopeSM-4TX-144A
Helping HandsA-M Systems  ;726200
Porte-lame de scalpelOutils de science fine10003-12
Lime en métalHome Depot6601
RègleHome Deopt202035324
Hémostats incurvés  ;Outils de science fine130009-12
Ciseaux finsOutils de science fine14058-09
Spatulede science
Petit tournevisHome Depot646507
Fixateur magnétique Système de rétractionOutils de science fine18200-04, 18200-01, 18200-05
Coussin chauffantWalgreens30294
TondeusesWalgreens277966
SharpieAgrafes125328
Pince à anneauOutils scientifiques fins11103-09
Outils en verre micropipette personnalisés (forme en J et droits) - Verre borosilicatéInstrumentSutter B150-110-10
Pince AdsonOutils scientifiques fins11006-12
Brassards
TubeBraintree Scientific IncMRE-065
Platine Iridium FilMedwire10IR9/49T
Broches en orMill-Max1001-0-15-15-30-27-04-0
Fil de sutureHenry Schein100-5797
22 G aiguillesFisher  ;14-815-525
Ruban de papierFisher  ;03-411-602
SoudureHome Depot327793
Flux  ;Home Depot300142
Lame de scalpel, 10 ou 15Stoelting52173-10
Tube de laboratoire silastique .51 mm ID x .94 mm ODFisher  ;508-002
Pièces de connecteur d’embouts (mâle)Omnetics Connector CorporationA25001-004
Pièces d’embouts
Teets Dental Acrylic, Liquid and PowderA-M Systems525000, 526000
1016882   ;
Vis à os chirurgicaux
Stoelting+CB33 :C6151457
Lames de scalpel, 10 ou 15Stoelting52173-10
Seringues de 1 mlFisher14-826-261
Aiguilles de 22 gFisher  ;14-815-525
Aiguilles de 27 gFisher14-826-48
Gaze Fisher 2 » x 222-362-178
ÉcouvillonsFisher19-120-472
Coussinets pour chiotsPetCo1310747
Kim LingettesFisher06-666-A
Réglage de la chambre et du comportement  ;
Armoire de base avant en métal Husky (30WX19DX34H)Home Depot100607961
Barrière silencieuse et timide ; Matériau d’insonorisation HD (feuille) (PSA)soundproofcow.com10203041
Panneau en mousse acoustique alvéoléesoundproofcow.comStimulateur d’impulsions isolé 10432400
modèle 2100A-M Systems720000
Appareil photo numérique - Logitech Webcam C210LogitechB003LVZO88
MatLabMathworks.com
Sinomètre 10 MHz Oscilloscope monocanalSinomètreCQ5010C
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5k ohm potentiomètreAlpha ElectronicsB00CTWDHIO
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DSCK-C Dual Output, brouillé shockerKinder Scientific Co
203525863 Outils fine (femelle)Omnetics Connector Corporation A24001-004 Agrafes en fil de cuivre solide de calibre 26  »

Références

  1. Quirk, G. J., Mueller, D. Neural mechanisms of extinction learning and retrieval. Neuropsychopharmacol. 33 (1), 56-72 (1038).
  2. Milad, M. R., Orr, S. P., Lasko, N. B., Chang, Y., Rauch, S. L., Pitman, R. K. Presence and acquired origin of reduced recall ....

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