Quantification du commerce intra-péritonéale Cancer de l&#39;ovaire Métastase

Kyle A. Lewellen; Matthew N. Metzinger; Yueying Liu; M. Sharon Stack

doi:10.3791/53316

Un abonnement JoVE est requis pour visualiser ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre période d'essai gratuite.

Article de méthode

Quantification du commerce intra-péritonéale Cancer de l'ovaire Métastase

10.8K vues

⸱

DOI :

10.3791/53316

⸱

18 juillet 2016

Kyle A. Lewellen^*¹ , Matthew N. Metzinger^*¹ , Yueying Liu¹ , M. Sharon Stack¹

¹Department of Chemistry & Biochemistry, Harper Cancer Research Institute, University of Notre Dame

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Les métastases du cancer de l’ovaire sont caractérisées par de nombreuses lésions intra-péritonéales diffuses, de sorte qu’il est difficile de quantifier visuellement avec précision la charge tumorale. Nous décrivons ici une méthode de quantification in situ et ex vivo de la charge tumorale métastatique à l’aide de cellules tumorales marquées à la protéine fluorescente rouge (RFP) et de l’imagerie optique.

Résumé

Le cancer épithélial de l’ovaire (EOC) est la principale cause de décès par malignité gynécologique aux États-Unis. La mortalité est due au diagnostic chez 75 % des femmes d’une maladie à un stade avancé, lorsque des métastases sont déjà présentes. L’EOC se caractérise par des métastases intra-péritonéales diffuses et largement disséminées. Les cellules excrétées de la tumeur primaire s’ancrent dans le mésothélium qui tapisse la cavité péritonéale ainsi que dans l’épiploon, entraînant des métastases multifocales, souvent en présence d’ascite péritonéale. Les efforts de notre laboratoire visent à une compréhension plus détaillée des facteurs qui régulent le succès métastatique des COE. Cependant, la quantification de la charge tumorale métastatique représente un défi technique important en raison du grand nombre, de la petite taille et de la large distribution des lésions dans tout le péritoine. Nous décrivons ici une méthode d’analyse des métastases EOC à l’aide de cellules marquées par la protéine fluorescente rouge (RFP) couplée à une imagerie multispectrale in vivo. Après l’injection intra-péritonéale de cellules tumorales marquées RFP, les souris sont imagées chaque semaine jusqu’au moment du sacrifice. À ce moment, la cavité péritonéale est exposée chirurgicalement et les organes sont imagés in situ. Les organes disséqués sont ensuite placés sur un modèle transparent étiqueté et imagés ex vivo. L’élimination de l’autofluorescence tissulaire pendant le traitement de l’image à l’aide du démélange multispectral permet une quantification précise de la charge tumorale relative. Cette méthode est utile dans une variété d’applications, y compris les études thérapeutiques pour évaluer les composés qui peuvent inhiber les métastases et ainsi améliorer la survie globale.

Introduction

Cancer de l' ovaire épithélial (COE) est la cause la plus fréquente de décès par cancer gynécologique, avec une estimation 21,290 nouveaux diagnostics aux États - Unis en 2015 et environ 14.180 décès ^1. La grande majorité (> 75%) des femmes sont diagnostiquées avec la maladie à un stade avancé (stade III ou IV) caractérisée par diffuse des métastases intra-péritonéale et de mauvais pronostic. La maladie récidive dans la cavité péritonéale après une chimiothérapie de première ligne est également courante et représente une cause majeure de mortalité ^2,3. COU métastase par un mécanisme unique impliquant à la fois dans le prolongement direct de ....