Method Article

Tuning une colonne sectorielle écoulement parallèle et Activation de la détection multiplexée

DOI:

10.3791/53448

December 15th, 2015

In This Article

Summary

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Ici, nous présentons un protocole pour le fonctionnement et le réglage de colonnes de chromatographie en flux segmenté parallèle afin de permettre la détection multiplexée.

Abstract

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La technologie AFT (Active Flow) est une nouvelle forme de technologie de colonne conçue pour surmonter l’hétérogénéité de l’écoulement, augmenter les performances de séparation en termes d’efficacité et de sensibilité et permettre la détection multiplexée. Cette forme d’AFT utilise une colonne à flux segmenté parallèle (PSF). Un embout de sortie colonne PSF se compose de 2 ou 4 ports, qui peuvent être multiplexés pour connecter jusqu’à 4 détecteurs. La colonne PSF permet non seulement une plate-forme pour la détection multiplexée, mais aussi la combinaison simultanée de détecteurs destructifs et non destructifs, sans tube à volume mort supplémentaire. La quantité de débit à travers chaque orifice peut également être ajustée par la gestion de la pression pour répondre aux exigences d’un ou de plusieurs détecteurs spécifiques. Pour réaliser une détection multiplexée à l’aide d’une colonne PSF, il existe un certain nombre de paramètres qui peuvent être contrôlés pour garantir des performances de séparation optimales et la qualité des résultats ; C’est-à-dire les dimensions du tube pour chaque orifice, le choix de l’orifice pour chaque type de détecteur et le réglage du débit. Ce protocole est destiné à montrer comment utiliser et régler une colonne PSF fonctionnant dans un mode de détection multiplexé.

Introduction

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Colonnes Flow Technology actifs

La technologie de flux actif (AFT) colonnes de chromatographie ont été récemment développés pour surmonter l'inefficacité dans les séparations associés aux flux hétérogénéité 1-6 et également pour permettre la détection multiplex. Dans ce détail particulier de la communication, nous le processus opérationnel du parallèle segmentée flux colonne (PSF) avec détection multiplex. Les avantages fonctionnels de la colonne de fibres discontinues de polyesters sont les suivants: (1) le flux à partir de la région centrale radiale du lit de colonne est isolé de la zone périphérique ou d....

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Protocol

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Remarque: Ce protocole contient des instructions sur la façon d'utiliser une colonne de PSF sur un système HPLC couplée avec plusieurs détecteurs pour la détection multiplex. Le protocole a été écrit en supposant que le lecteur a les connaissances de base et de l'expérience en chromatographie et diverses méthodes de détection HPLC.

Attention: S'il vous plaît se référer à des fiches de données de sécurité (FDS) pour tous les matériaux et les réactifs avant utilisation (par exemple, la fiche signalétique pour le méthanol). Assurer l'utilisation de toutes les pratiques de sécurité appropriées lors de la manipulation ....

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Results

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Une analyse par HPLC en multiplex est effectuée en utilisant une colonne AFT en mode PSF (figure 1) et mis en place comme illustré sur la figure 2. Ce type de configuration laisse un échantillon de café à analyser simultanément à l'aide d'UV-Vis, DPPH et MS dans Total Ion comte de mode (TIC). Les composés de l'échantillon de café qui ont répondu au DPPH pourraient alors être facilement adaptés à la hauteur des UV-Vis et MS - Réponses TIC sur la.......

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Discussion

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Cette étude implique la caractérisation et le profilage de café en utilisant HPLC avec détection multiplex employant une colonne parallèle courant segmenté (PSF). Multiplexé HPLC en utilisant des colonnes de PSF permet la caractérisation et l'identification des entités chimiques clés en réduisant la complexité des données de l'échantillon tout en obtenant un degré plus élevé de l'information spécifique à molécule en une fraction du temps nécessaire en utilisant des procédés multi-détection classiques. La col.......

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Disclosures

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Acknowledgements

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Ce travail a été soutenu par UWS et ThermoFisher Scientific. L’un des auteurs (DK) accuse réception d’une bourse australienne de troisième cycle.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
HPLCPlusieurs détecteurs au choix pour la détection multiplexée. Les détecteurs de choix peuvent nécessiter des instruments supplémentaires, par exemple , pompe.
Colonne HPLC à flux segmenté parallèleThermo Fisher ScientificNon définiBientôt commercialisé
MéthanolN’importe quelle marquePEEK de qualité HPLC
N’importequelle marqueDifférentes longueurs et insignifiance.
Stoppeurs de colonneN’importe quelle marquePour bloquer les ports périphériques inutilisés.
Coupe-tube PEEKN’importe quelle marque
Balance analytiqueN’importe quelle marque
ChronomètreN’importe quelle marque
Récipients de collecte d’éluantsN’importe quelle marqueLes flacons d’échantillons de 1 à 2 ml de marque peuvent être utilisés comme récipients de collecte d’éluants
Instrument Tube

References

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. The design of a new concept chromatography column. Analyst. 136 (24), 5127-5130 (2011).
  2. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. Enhanced separation performance using a new column technol....

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Parallel Segmented Flow ColumnMultiplexed DetectionActive Flow TechnologyHPLC ProcedureFlow Rate AdjustmentDetector ConfigurationPort TuningMobile Phase PreparationDPPH Radical AssayRetention Time Alignment

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