Le lait est une source primaire de nutrition pour le nouveau-né. L’analyse des composants du lait peut donner un aperçu des facteurs maternels qui affectent la santé de la progéniture. Ce protocole décrit une méthode manuelle de prélèvement d’échantillons de lait sur le rat allaitant, qui peut ensuite être utilisé pour une analyse ultérieure en aval.
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Article de méthode
La collecte du lait dans le rat en utilisant tubes capillaires et estimation de la teneur du lait en matières grasses en Creamatocrit
Dans cet article
Résumé
Résumé
Le lait, en tant que seule source de nutrition pour le mammifère nouveau-né, fournit les nutriments et l’énergie nécessaires à la croissance et au développement de la progéniture. Il contient également un grand nombre de composés bioactifs qui affectent grandement le développement du nouveau-né. L’analyse des composants du lait aidera à élucider les facteurs clés qui lient le métabolisme et la santé maternels à la croissance et au développement de la progéniture. Le rat de laboratoire représente un organisme modèle populaire pour les études maternelles, et le lait de rat peut être utilisé pour examiner l’effet de diverses interventions physiologiques, nutritionnelles et pharmacologiques maternelles sur les composants du lait, ce qui peut ensuite avoir un impact sur la santé de la progéniture. Ici, une méthode simple de collecte manuelle du lait du rat allaitant, qui peut être effectuée par un seul enquêteur, ne nécessite pas d’équipement spécialisé d’aspiration ou d’aspiration et fournit suffisamment de lait pour une analyse ultérieure en aval est décrite. Une méthode d’estimation de la teneur en matière grasse du lait en mesurant le pourcentage de crème dans l’échantillon de lait, connue sous le nom de creamatocritre, est également présentée. Ces méthodes peuvent finalement être utilisées pour mieux comprendre la santé mère-enfant et pour élucider les facteurs maternels qui sont impliqués dans la croissance et le développement appropriés de la progéniture.
Introduction
Le lait est la seule source de nutrition pour les mammifères nouveau-nés, la fourniture d'énergie et de nutriments pour la croissance du nourrisson et le développement 1,2. Bien que le lait se compose principalement de cellules, des lipides et des protéines 1, il contient également une pléthore de composés bioactifs qui modulent le développement du début de la vie de la progéniture y compris des enzymes, des glucides, des hormones, des anticorps, des facteurs de croissance, des cytokines, des exosomes, des microvésicules et de petits ARN tels comme microARN 1,2. Le rôle fondamental du lait maternel dans l'établissement de la p....
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Protocole
Ce protocole a été approuvé par l'Université de Calgary Comité de protection des animaux et conforme à la Guide pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire.
1. Dam séparée de Offspring
- Séparer le barrage de sa progéniture pour un minimum de 5 min avant la traite 12.
NOTE: Le barrage peut traire jusqu'à 5-6 h après la séparation 1,6,13, mais les périodes de séparation de plus de 4 heures peuvent modifier la composition du lait 14. Alors que le temps de la séparation ne semble pas influer sur le volume de collecte de lait 12, il est conseillé que....
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Résultats
Lait a été recueilli comme décrit au sevrage des barrages Wistar (âgés d'environ 22 semaines, pesant 350 à 400 g) qui a consommé un contrôle (AIN-93G, n = 5), riche en protéines (40% de caséine poids / poids, n = 5) , ou de la fibre prébiotique élevé (21,6% en poids / poids, ratio 1: 1 d'oligofructose et l'inuline, n = 4) régime alimentaire pendant la grossesse et l'allaitement. La dose d'ocytocine était de 2 UI. Le lait a été collecté en utilisant des tubes capillaires, et un tube a été centrifugé e.......
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Discussion
Les recherches sur les composants du lait maternel se sont multipliées à mesure que l’intérêt pour la recherche sur le développement de la petite enfance augmente. En tant que seule source de nutrition pendant la période néonatale, les composés bioactifs du lait sont essentiels à une croissance et à un développement idéaux, en particulier dans le contexte de la santé intestinale et immunitaire3. La méthode présentée ici est une méthode simple et non invasive de collecte du lait du rat allaitant en quantités su.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs ont aucun conflit d'intérêt à divulguer. Toutes les expériences animales ont été menées conformément aux protocoles du CCPA approuvé.
Remerciements
Ce travaux ont été soutenus par des subventions du Conseil de recherches en génie du Canada (RGPIN 238382-2011) en sciences naturelles et Instituts de recherche en santé (MOP115076) canadiennes. Heather Paul a été soutenu par une bourse d'études supérieures du Conseil de recherches en génie du Canada en sciences naturelles et et une bourse de l'Alberta Innovates Health Solutions. Megan Hallam a été soutenue par une bourse d'études en sciences naturelles et en génie Conseil de recherches de troisième cycle, une bourse Frederick Banting et Charles Best études supérieures du Canada, et de recherche de l'Hôpital Institut de formation Award en génétique, d....
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Equipment - Traite | |||
| Seringues de 1 ml | BD-Canada | 309602 | |
| aiguilles de 25 g | BD-Canada | 305122 | |
| 18 g | BD-Canada | 305196 | |
| 50 &mu ; l Microdistributeur Tubes capillaires | Fisher Scientific | 21-169D | |
| Ocytocine (20 unités USP/ml) | Bimeda-MTC | 1OXY015 | |
| PPC Vet Isoflurane Inhalation Anesthésique, 250 ml | Fresenius Kabi | M60302 | Utilisé sur commande d’un vétérinaire |
| Tampon de préparation à l’alcool stérile | Dukal | 853 | |
| Sous-coussin absorbant pour banc | VWR | 82020-845 | |
| Maxi-Therm Hyper/Hypothermia Blanket | Cincinnati Sub-Zero | 274 | |
| Machine d’anesthésie pour rongeurs avec vaporisateur | Benson Medical Industries Inc. | Sous réserve des besoins individuels du laboratoire | |
| Masques pour animaux, | Benson Medical Industries, Inc. | 50100/50102 | |
| Tubes de microcentrifugation | Axygen | MCT-060-C | |
| ChroMini Tondeuse professionnelle | Wahl | ||
| Equipment - Creamatocrit | |||
| StatSpin SafeCrit Tubes de microhématocrite en plastique (non traité) | Fisher Scientific | 22-274-914 | |
| Critoseal Plateau d’étanchéité pour tube capillaire | VWR | 470161-478 | |
| StatSpin CritSpin Centrifugeuse à microhématocrite | Beckman Coulter, Inc | X00-004999-001 |
Références
- Izumi, H., Kosaka, N., Shimizu, T., Sekine, K., Ochiya, T., Takase, M. Time-dependent expression profiles of microRNAs and mRNAs in rat milk whey. PLoS ONE. 9 (2), e0088843(2014).
- Hsieh, C. C., Hernández-Ledesma, B., Fernández-Tomé, S., Weinborn, V., Barile, D., de Moura Bell, J. M.
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Réimpressions et autorisations
