Article de méthode

Trois dimensions technologie biomimétique: Roman Biorubber Crée Défini micro et macro-échelle Architectures en collagène hydrogels

DOI :

10.3791/53578

12 février 2016

Dans cet article

Résumé

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Une technique de biofabrication innovante a été développée pour concevoir des constructions tridimensionnelles qui ressemblent aux caractéristiques architecturales, aux composants et aux propriétés mécaniques des tissus in vivo. Cette technique fait appel à un matériau sacrificiel nouvellement développé, le caoutchouc BSA, qui transfère des caractéristiques spatiales détaillées, reproduisant les architectures in vivo d’une grande variété de tissus.

Résumé

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échafaudages tissulaires jouent un rôle crucial dans le processus de régénération des tissus. L'échafaudage idéal doit répondre à plusieurs exigences comme ayant une composition appropriée, module ciblé, et les caractéristiques architecturales bien définis. Biomatériaux qui récapitulent l'architecture intrinsèque des tissus in vivo sont vitales pour l'étude des maladies ainsi que pour faciliter la régénération des tissus mous perdus et mal formé. Une technique de biofabrication roman a été développé qui combine l'état de l'imagerie de l'art, l'impression en trois dimensions (3D), et l'activité enzymatique sélective pour créer une nouvelle génération de biomatériaux pour la recherche et l'application clinique. Le matériau développé, caoutchouc sérum-albumine bovine, est une réaction injectée dans un moule qui respecte les caractéristiques géométriques spécifiques. Ce matériau sacrificiel permet le transfert adéquat d'éléments architecturaux à un matériau d'échafaudage naturel. Le prototype se compose d'un échafaudage de collagène 3D avec 4 et 3 canaux mm que des reprESENT une architecture ramifiée. Ce document met l'accent sur l'utilisation de cette technique de biofabrication pour la production de produits d'assemblage physiques. Ce protocole utilise un logiciel assistée par ordinateur (CAO) pour fabriquer un moule solide qui sera injecté avec du caoutchouc réaction de BSA, suivi par la digestion enzymatique de la gomme, en laissant ses caractéristiques architecturales au sein du matériau d'échafaudage.

Introduction

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Dans le domaine de l'ingénierie tissulaire de la capacité de fabriquer des échafaudages tissulaires est essentiel. Un échafaudage pour tissu approprié présente une structure 3D, est composée de matériaux biocompatibles, et imite l'architecture tissulaire in vivo afin de faciliter la croissance et le remodelage cellulaire et tissulaire. Cet échafaudage doit permettre le transport des nutriments et l'élimination des déchets 1-4. L'un des principaux obstacles à la production de ces échafaudages est la capacité de récapituler les caractéristiques géométriques spécifiques dans un matériau biocompatible. Plusieurs techniques de ....

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Protocole

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1. Déterminer le pourcentage de solides dans le Lot collagène

  1. Extraire le collagène suivant une procédure déjà publié 13. Décongeler un minimum de 20 ml de collagène. Déterminer le pourcentage de matière sèche initiale de collagène dans le lot dans le but de manipuler la concentration de collagène dans les hydrogels formés.
    1. Couper trois morceaux de feuille d'aluminium (environ 6 x 6 cm) et la forme de chacun comme une casserole en utilisant le fond d'un bêcher de 25 ml. Noter le poids de chaque moule.
    2. Ajouter une petite quantité de collagène pour chaque moule et noter le poids total de la casserole d'aluminium et de collagène.....

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Résultats

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Les résultats montrent que cette technique de biofabrication est efficace pour générer des échafaudages 3D qui peuvent imiter l'arrangement spatial vu dans les tissus in vivo. Les caractéristiques architecturales sont des paramètres essentiels pour l'application de l'ingénierie tissulaire, qui jouent un rôle crucial dans l'interaction in vivo de cellules et la fonctionnalité du tissu.

La consistance et la mis.......

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Discussion

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Biofabrication est un domaine hautement multidisciplinaire dans laquelle les principes de la biologie et de l'ingénierie fusionnent pour générer des matériaux complexes qui imitent tissu natif. Pour atteindre cet objectif, il est nécessaire de développer des techniques qui utilisent les informations recueillies à partir de tissus in vivo et le traduire en un échafaudage in vitro. De cette manière, une plate-forme peut être modifiée génétiquement qui ressemble étroitement les propriétés architectura.......

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Déclarations de divulgation

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Les auteurs ont rien à révéler.

Remerciements

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Ce travail a été soutenu par le NIH-NIDCR IRO1DE019355 (MJ Yost, PI) et le NSF-EPSCoR (EPS-0903795).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Collagène de type ICollagène extrait de la peau de veau
Acide chlororique (HCl)Sigma-Aldrich7647-01-0
Solution tampon de phosphate (comprimés PBS)MP BiomedicalU53781 comprimé par 100 ml donne 1x PBS
Albumium à partir de sérum bovin (BSA)Sigma-AldrichA9647
GlutaraldéhydeSigma -AldrichG5882Champs de
saindouxtoxiques 3090
Moules en acier inoxydablefraisés à l’aide d’une
Pneumatique central47791
Embout mélangeur pour seringue doubleMedmixML2.5-16-LLMMélangeur, DN2,5X16, 4:1 brun, med
Petit joint torique pour seringue doubleMedmixPPB-X05-04-02SMPiston B, 5 ml, 4:1, PE naturel
Double capuchon de seringue  ;MedmixVLX002-SMCapuchon, 4:1/10:1, PE brun, med
Grand joint torique pour seringue doubleMedmixPPA-X05-04-02SMPiston A, 5 ml, 4:1
Seringue doubleMedmixSDL X05-04-50MSeringue double, 5 ml, 4:1
Distributeur de seringues doublesMedmixDL05-0400M, 5 ml, 4:1, med, plain
Laminim3,6 mg/ml - extrait USC lab
Seringue de 20 ml Luer Lock TipBD302830
Luer Lock CapsFisherJGTCBLLX
HEPESSigma -AldrichH4034
Gibco Minimum Essential Media 10x (MEM)Life Technologies1143-030
TrypsinLife Technologies27250-018
Réticulant UV  ;Spectroline UVXLE1000
Cloure de sodium (NaCl)FisherS271-10Pour préparer Mosconas
Chlorure de potassium (KCl)Sigma -AldrichP5405-250Pour préparer Mosconas
Bicarbonate de sodium (NaHCO3)FisherBP328-500Pour préparer Mosconas
GlucoseSigma -AldrichG-8270Pour préparer Mosconas
Phosphate de sodium didasique (NaH2PO4)Sigma-AldrichS-7907Pour préparer Mosconas
Filtre stérile pour seringuesCorning431224
machine à microlution Kit d’aérographe

Références

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  1. Kundu, J., Pati, F., Hun Jeong, Y., Cho, D. W., Cho, D. W. Biofabrication. Forgacs, G. abor, Sun, W. ei , William Andrew Publishing. 23-46 (2013).
  2. Vats, A., Tolley, N. S., Polak, J. M., Gough, J. E. Scaffolds and biomaterials for tissue engineering: a review of clinical applications. Clin. Otolaryngol. 28, 165-1....

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Mots-clés

Caoutchouc d albumine de s rum bovinchafaudage d hydrogel de collag neprotocole de digestion enzymatiqueimpression tridimensionnelleactivit enzymatique s lectivetransfert de mat riau sacrificielmoule con u par ordinateurchafaudages de r g n ration tissulaire

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