Détection simultanée de c-Fos Activation de Sites de récompense dopaminergique mésolimbique et mésocortical Après Naive sucre et de graisse Ingestion chez le rat

Julie A. D. Dela Cruz; Tricia Coke; Richard J. Bodnar

doi:10.3791/53897

Article de méthode

Détection simultanée de c-Fos Activation de Sites de récompense dopaminergique mésolimbique et mésocortical Après Naive sucre et de graisse Ingestion chez le rat

DOI :

10.3791/53897

⸱

24 août 2016

Julie A. D. Dela Cruz^*¹ , Tricia Coke^*² , Richard J. Bodnar²^,³

¹Behavioral and Cognitive Neuroscience Cluster, Psychology Doctoral Program, The Graduate Center, CUNY, New York, NY, ²Department of Psychology, Queens College, CUNY, Flushing, NY, ³Behavioral and Cognitive Neuroscience Cluster, Psychology Doctoral Program, The Graduate Center, CUNY, Flushing, NY

^* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Le but de cette étude est d'identifier les réseaux cérébraux distribués liés à la récompense en délimitant une technique immunohistochimique fiable en utilisant l'activation de c-fos cellulaire pour mesurer les changements simultanés dans les voies de la dopamine et sites terminaux après nouvelle ingestion de gras et de sucre chez les rats.

Résumé

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cette étude utilise l'activation de c-fos cellulaire pour évaluer les effets de l'ingestion de nouvelles graisses et de sucre sur le cerveau de la dopamine (DA) voies chez les rats. Apports de sucres et de graisses sont médiés par leurs attractions innées ainsi que les préférences apprises. dopamine du cerveau, en particulier méso-limbique et projections méso-corticale de l'aire tegmentale ventrale (VTA), a été impliqué dans ces deux réponses désappris et apprises. Le concept de réseaux cérébraux distribués, dans lequel plusieurs sites et systèmes émetteurs / peptides interagissent, a été proposé à la médiation apport alimentaire acceptable, mais il y a peu de preuves démontrant empiriquement ces actions. Ainsi, la consommation de sucre provoque immunoréactivité DA libération et augmente c-fos-like (FLI) à partir de chaque zones de projection VTA DA, y compris le noyau accumbens (NAC), amygdale (AMY) et médiale cortex préfrontal (CPFm), ainsi que le striatum dorsal. En outre, l'administration centrale des antagonistes sélectifs des récepteurs de DA dans ces sitess différentiellement réduire l'acquisition et l'expression des préférences gustatives conditionnées provoquées par des sucres ou de graisses. Une approche permettant de déterminer si ces sites ont interagi en tant que réseau de cerveau distribué en réponse à sucre ou la consommation de graisses serait simultanée évaluer si le VTA et ses principales zones de projection mesotelencephalic de DA (prélimbique et infralimbic CPFm, noyau et l'enveloppe du NAc, basolatéral et le centre-cortico-médial AMY), ainsi que le striatum dorsal afficherait coordonné et activation FLI simultanée après orale, l'apport inconditionnée d'huile de maïs (3,5%), le glucose (8%), le fructose (8%) et la saccharine (0,2 %) solutions. Cette approche est une première étape réussie dans l'identification de la possibilité d'utiliser l'activation de c-fos cellulaire simultanément sur les sites du cerveau pertinents pour étudier l'apprentissage récompense liée à l'ingestion d'aliments agréables au goût chez les rongeurs.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Cerveau dopamine (DA) a été impliquée dans les réponses centrales à la consommation de sucres par un goût agréable proposé hédonique ^1,2, ³ et l' habitude à base de ^4,5 mécanismes d'action liée à l' effort. La voie DA primaire impliquée dans ces effets provient de l'aire tegmentale ventrale (VTA), et les projets vers le noyau accumbens de noyau (NAC) et la coquille, l'amygdale basolatérale et du centre-cortico-médial (AMY), et le prélimbique et médial infralimbic cortex préfrontal (CPFm) (voir les commentaires ^6,7). Le VTA a été impliquée dans la prise de saccharose ^8,9, et la libérat....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Protocole

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ces protocoles expérimentaux ont été approuvés par le Comité soin et l'utilisation des animaux institutionnels attestant que tous les sujets et les procédures sont en conformité avec les National Institutes of Health Guide pour les soins et l'utilisation des animaux de laboratoire.

1. Sujets

Achat et / ou de la race des rats mâles Sprague-Dawley (260-300 g).
rats Maison individuellement dans des cages grillagées. Maintenir les sur une 12:12 h cycle lumière / obscurité avec chow de rat et de l' eau ad libitum.
Attribuer la taille des échantillons appropriés (par exemple, n ≈ 6-8) au hasard en groupes.

....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Résultats

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tous les résultats représentatifs décrits ci - dessous ont été publiés précédemment ^69, et sont présentés de nouveau ici pour soutenir "preuve de concept" en indiquant l'efficacité de la technique.

Apports Solution
Des différences significatives dans les apports de la saccharine de base ont été observées au cours des quatre premiers jours pour tous les animaux (F (3108) = 57,27, p <0,001) av.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Le but de l'étude était de déterminer si la source (VTA) et des objectifs de projection de prosencéphale (NAC, AMY, CPFm) des neurones liés à la récompense-DA ont été simultanément activées après nouvelle ingestion de gras et de sucre chez les rats en utilisant la technique de c-fos cellulaire . La présente étude est une description détaillée des protocoles d'une étude publiée précédemment ^69. Il a émis l' hypothèse que l'ADV, ses principales zones de projection à l'prélimbique et infralim.......

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Déclarations de divulgation

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs ont aucun intérêt financier concurrents.

Remerciements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Merci à Diana Icaza-Culaki, Cristal Sampson et Theologia Karagiorgis pour leur travail acharné sur ce projet.

....

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Equipment
Rats Sprague-Dawley Charles	River Laboratories	CD-1
Wire Mesh Cages	Lab Products, Seaford, DE	30-Cage
rack Rat Chow	PMI Nutrition International	5001
Taut Metal Spring	Lab Products, Seaford, DE	n/a
Balance pour rats	Fisher Scientific Company	n/a
Nalgene Centrifuge Tubes	Lab Products, Seaford, DE	10-0501
Rubber Stopper	Lab Products, Seaford, DE	n/a
Metal Sippers	Lab Products, Seaford, DE	n/a
Saccharin	Sigma Chemical Co	82385-42-0
Kool-Aid, Cerise	Kool-Aid	Commercial
Kool-Aid, Raisin	Kool-Aid	Commercial
Fructose	Sigma Chemical Co	F0127
Glucose	Sigma Chemical Co	G8270
Huile de maïs	Mazzola	Commercial
Xanthan Gum	Sigma Chemical Co	11138-66-2
Microtome coulissant	Microm International	n/a
Neurolucida Caméra	MBF Bioscience	Application logicielle
Lames recouvertes de gélatine	Fisher Scientific Company	12-550-343
Verre de couverture	Fisher Scientific Company	12-545-M
Pinceaux en nylon doré	Loew-Cornell ;	2037
Cheveux Naturels Sable ;	Loew-Cornell ;	2022
24 Plaques de puits	Fisher Scientific	3527
Plaques 6 puits	Fisher Scientific	3506
Bouteilles en pyrex 1 L	Fisher Scientific	1395-1L
Insert tissulaire (passoire à tissus)	Fisher Scientific	7200214
Pipettes Eagle ;	World Precision Instruments	E10 pour 1-10μ ;
Pipettes Eagle ;	World Precision Instruments	E100 pour 20-100μ ;
Pipettes Eagle ;	World Precision Instruments	E200 pour 50-200μ ;
Pipettes Eagle ;	World Precision Instruments	E1000 pour 100-1000μ ;
Pipettes Eagle ;	World Precision Instruments	E5000 pour 1000-5000μ ; l ;
Embouts universels .1-10 μ ; l	World Precision Instruments	500192
Embouts Universels 5-200 μ ; l	World Precision Instruments	500194
Embouts Universels 500-5 000 μ ; l	World Precision Instruments	500198
Blade Vibroslice 100	World Precision Instruments	BLADE
DPX Mounting Medium ;	Microscopie électronique ;	13510
Tubes à centrifuger de 15 ml	Biologix Research Co.	10-0501
Boîtes à diapositives	Biologix Research Co.	41-6100
Agitateur orbital ;	Madell Corporation ; ;	ZD-9556
bateaux de pesée ;	Fisher Scientific	02-202-100
Pipettes jetables 5 ml	Fisher Scientific	13-711-5AM
Logiciel d’investigation stéréo	Micro Bright Field	Application logicielle
Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
forts
paraformaldéhyde granulaire	Fisher Scientific	19210
NaCl	Fisher Scientific	S271-1
Phophate de sodium monobasique	Fisher Scientific	S468-500
Phosphate de sodium Diphasique	Fisher Scientific	BP332-500
Hydrogène Peroxyde ;	Fisher Scientific	H324-500
SafeClear II ;	Fisher Scientific	23-044-192
Méthanol ;	Fisher Scientific	A412-1
Vecteur	sérique de chèvre normal	S-1000
Biotinylé Anti-Lapin IgG (H+L)	Vecteur	BA-1000
ABC Kit Peroxydase	Vecteur	PK-4000
Anti-cFos (Ab-5) Lapin	EMD chem/Cal Biochem	PC38
Triton X 100	SigmaAldrich	X-100
3,3' chlorhydrate de diaminobenzidine tétra ;	SigmaAldrich	D5905
Hydroxyde de sodium	SigmaAldrich	5881
Anticorps TH primaire	EMD Millipore	AB152
Euthosol	Virbac AH

llll Standard

Références

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Koob, G. F. Neural mechanisms of drug reinforcement. Ann. N.Y. Acad. Sci. 654, 171-191 (1992).
Wise, R. A. Role of brain dopamine in food reward. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 361, 1149-1158 (2006).
Salamone, J. D., Correa, M.

Accès restreint. Veuillez vous connecter ou commencer un essai pour afficher ce contenu.

Réimpressions et autorisations

Demander l’autorisation de réutiliser le texte ou les figures de cet article JoVE

Demander une autorisation

Mots-clés

Voies dopaminergiques de l AIA projections m solimbiques projections m socorticales sites de r compense c r braux ingestion de sucre et de gras protocole d immunohistochimie marquage la tyrosine hydroxylase visualisation au DAB analyse par comptage cellulaire

Détection simultanée de c-Fos Activation de Sites de récompense dopaminergique mésolimbique et mésocortical Après Naive sucre et de graisse Ingestion chez le rat

Dans cet article

Résumé

Résumé

Introduction

Protocole

Résultats

Discussion

Déclarations de divulgation

Remerciements

Matériaux

Références

Réimpressions et autorisations

Mots-clés

Articles connexes