Article de méthode

Foraging Protocole Chemin de longueur pour Drosophila melanogaster larves

DOI :

10.3791/53980

23 avril 2016

Dans cet article

Résumé

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Nous fournissons un protocole détaillé pour un test de longueur de chemin de recherche de nourriture de Drosophila melanogaster. Nous discutons de la préparation et de la manipulation des animaux de test, de la façon d’effectuer le test et d’analyser les données.

Résumé

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La Drosophila melanogaster larvaire longueur de chemin phénotype est une mesure établie utilisée pour étudier les contributions génétiques et environnementales à la variation du comportement. Le test de longueur de chemin larvaire a été développé pour mesurer les différences individuelles dans le comportement alimentaire qui ont ensuite été lié au gène de recherche de nourriture. Larvaire longueur de chemin est un trait facilement marqué qui facilite la collecte des échantillons de grande taille, à un coût minime, pour les écrans génétiques. Ici, nous fournissons une description détaillée du protocole actuel pour le test de longueur de chemin larvaire d'abord utilisé par Sokolowski. Le protocole décrit comment gérer de façon reproductible des animaux d'essai, effectuer le test de comportement et d'analyser les données. Un exemple de la façon dont le dosage peut être utilisé pour mesurer la plasticité comportementale en réponse aux changements environnementaux, en manipulant l'alimentation environnement avant d'effectuer le test, est également fourni. Enfin, la conception d'essai approprié, ainsi que les facteurs environnementaux qui peuvent modifierchemin de longueur larvaire tels que la qualité des aliments, l'âge de développement et les effets de jour sont discutés.

Introduction

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Depuis la découverte du gène blanc dans le laboratoire de Thomas Hunt Morgan en 1910, la mouche des fruits, Drosophila melanogaster (D. melanogaster), a été utilisé comme modèle pour l'étude des fondements moléculaires et physiologiques de divers processus biologiques. La popularité de D. melanogaster provient en grande partie de la quantité considérable et la variété des outils génétiques. La petite taille de la drosophile, une relative facilité de manipulation et de courte durée de génération rendent un modèle idéal pour les études génétiques. Tout aussi important est la capacité de Drosophila

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Protocole

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1. Préparer raisin assiettes et bouteilles Holding pour Collection de Larves

  1. Pour fabriquer des bouteilles de maintien, les trous coupés dans un côté de bouteilles 6 oz de culture de mouche, assez grand pour accueillir un bouchon de flacon de mouche pour l' alimentation en air (Fig. 1D).
  2. Pour fabriquer des plaques de raisin, préparer 250 ml de milieu de jus de raisin (1,8% de gélose, 45% de jus de raisin, l'acide acétique à 2,5%, 2,5% d'éthanol) en faisant bouillir l'agar-agar, le jus de raisin et la plupart de l'eau, refroidir à 70 ºC ( remuer pendant le refroidissement), puis ajouter de l'acide acétique ....

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Résultats

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Les différences de longueur de trajet du rover et sitter pour les souches et l'effet de la privation de nourriture sur le chemin de longueur sont illustrés sur la Fig. . 3 Les données recueillies pendant trois jours consécutifs de tests ont montré un effet significatif de déformation (F (1,421) = 351,89, p <2,20 x 10 -16;. La figure 3A), avec rovers voyager plus loin que sitters. En plus.......

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Discussion

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Le test de longueur de chemin décrite ici propose une mesure simple et robuste du comportement alimentaire des larves de drosophile. Le protocole suit la méthodologie générale décrite dans Sokolowski 2, mais a depuis été amélioré en ce qui concerne l' efficacité et les contrôles expérimentaux. Au meilleur de notre connaissance, cette méthode est la seule méthode disponible pour la mesure des larves de longueur de chemin. La version originale du protocole 2, 3, 15, 16 larves testé sur d.......

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Déclarations de divulgation

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

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Les auteurs reconnaissent que le Conseil de recherches en sciences naturelles et de génie du Canada (CRSNG) continue de financer la MBS.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
6 onces  ; Flacons de culture de mouches  ;Fisher Scientific  ;AS355  ;
Bouchons anti-mouchesDroso-Plugs59-201
35 x 10 mm Boîtes de PétriFalcon351008
100 x 15 mm Boîtes de PétriBoîtes
60 x 15 mmVWR25384-168  ;
Sondes de dissectionAlmedic2325-58-5300  ;
Laboratoire delevureScientific FLY-8040-20F
de Pétri Fisher 875712

Références

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  1. Behavioral Genetics of the Fly (Drosophila melanogaster). Dubnau, J. , Cambridge University Press. New York. 173(2014).
  2. Sokolowski, M. B. Foraging strategies of Drosophila melanogaster: a chromosomal analysis. Behav Genet. 10, 291-302 (1980).
  3. de Belle, J. S., Hilliker, A. J., Sokolowski, M. B.

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Mots-clés

Larves de Drosophilaessai de longueur de trajectoirecomportement de recherche de nourritureg n tique comportementaleapplication de p te de levuremanipulation des larvesprivation alimentairechronologie du d veloppementmesure de la longueur de trajectoirecriblage g n tique

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