Foraging Protocole Chemin de longueur pour Drosophila melanogaster larves

Résumé

Nous fournissons un protocole détaillé pour un test de longueur de chemin de recherche de nourriture de Drosophila melanogaster. Nous discutons de la préparation et de la manipulation des animaux de test, de la façon d’effectuer le test et d’analyser les données.

Résumé

La Drosophila melanogaster larvaire longueur de chemin phénotype est une mesure établie utilisée pour étudier les contributions génétiques et environnementales à la variation du comportement. Le test de longueur de chemin larvaire a été développé pour mesurer les différences individuelles dans le comportement alimentaire qui ont ensuite été lié au gène de recherche de nourriture. Larvaire longueur de chemin est un trait facilement marqué qui facilite la collecte des échantillons de grande taille, à un coût minime, pour les écrans génétiques. Ici, nous fournissons une description détaillée du protocole actuel pour le test de longueur de chemin larvaire d'abord utilisé par Sokolowski. Le protocole décrit comment gérer de façon reproductible des animaux d'essai, effectuer le test de comportement et d'analyser les données. Un exemple de la façon dont le dosage peut être utilisé pour mesurer la plasticité comportementale en réponse aux changements environnementaux, en manipulant l'alimentation environnement avant d'effectuer le test, est également fourni. Enfin, la conception d'essai approprié, ainsi que les facteurs environnementaux qui peuvent modifierchemin de longueur larvaire tels que la qualité des aliments, l'âge de développement et les effets de jour sont discutés.

Introduction

Depuis la découverte du gène blanc dans le laboratoire de Thomas Hunt Morgan en 1910, la mouche des fruits, Drosophila melanogaster (D. melanogaster), a été utilisé comme modèle pour l'étude des fondements moléculaires et physiologiques de divers processus biologiques. La popularité de D. melanogaster provient en grande partie de la quantité considérable et la variété des outils génétiques. La petite taille de la drosophile, une relative facilité de manipulation et de courte durée de génération rendent un modèle idéal pour les études génétiques. Tout aussi important est la capacité de Drosophila

Protocole

1. Préparer raisin assiettes et bouteilles Holding pour Collection de Larves

1. Pour fabriquer des bouteilles de maintien, les trous coupés dans un côté de bouteilles 6 oz de culture de mouche, assez grand pour accueillir un bouchon de flacon de mouche pour l' alimentation en air (Fig. 1D).
2. Pour fabriquer des plaques de raisin, préparer 250 ml de milieu de jus de raisin (1,8% de gélose, 45% de jus de raisin, l'acide acétique à 2,5%, 2,5% d'éthanol) en faisant bouillir l'agar-agar, le jus de raisin et la plupart de l'eau, refroidir à 70 ºC ( remuer pendant le refroidissement), puis ajouter de l'acide acétique ....

Résultats

Les différences de longueur de trajet du rover et sitter pour les souches et l'effet de la privation de nourriture sur le chemin de longueur sont illustrés sur la Fig. . 3 Les données recueillies pendant trois jours consécutifs de tests ont montré un effet significatif de déformation (F _(1,421) = 351,89, p <2,20 x 10 ^-16;. La figure 3A), avec rovers voyager plus loin que sitters. En plus.......

Discussion

Le test de longueur de chemin décrite ici propose une mesure simple et robuste du comportement alimentaire des larves de drosophile. Le protocole suit la méthodologie générale décrite dans Sokolowski ^2, mais a depuis été amélioré en ce qui concerne l' efficacité et les contrôles expérimentaux. Au meilleur de notre connaissance, cette méthode est la seule méthode disponible pour la mesure des larves de longueur de chemin. La version originale du protocole ^{2, 3, 15, 16} larves testé sur d.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
6 onces  ; Flacons de culture de mouches  ;	Fisher Scientific  ;	AS355  ;
Bouchons anti-mouches	Droso-Plugs	59-201
35 x 10 mm Boîtes de Pétri	Falcon	351008
100 x 15 mm Boîtes de Pétri	Boîtes
60 x 15 mm	VWR	25384-168  ;
Sondes de dissection	Almedic	2325-58-5300  ;
Laboratoire de	levure	Scientific FLY-8040-20F