Murine Prostate Micro-dissection et Castration chirurgicale

Résumé

Ce manuscrit décrit les protocoles de la prostate microdissection et la castration chirurgicale chez la souris de laboratoire. Nous représentons également des résultats représentatifs produits par ces protocoles. Enfin, nous discutons des avantages et de l'utilisation de ces protocoles.

Résumé

Les modèles murins sont largement utilisés pour étudier le cancer de la prostate et d’autres maladies. La souris est un excellent modèle pour étudier la prostate et a été utilisée comme substitut pour les découvertes dans le développement et la maladie de la prostate humaine. La micro-dissection de la prostate permet une étude cohérente de l’anatomie, de l’histologie et des caractéristiques cellulaires spécifiques du lobe de la prostate en l’absence de contamination d’autres tissus. La testostérone affecte le développement de la prostate et la maladie. La thérapie par privation androgénique est un traitement courant pour les patients atteints de cancer de la prostate, mais de nombreuses tumeurs de la prostate deviennent résistantes à la castration. La castration chirurgicale de modèles murins permet d’étudier la résistance à la castration et d’autres facettes de la biologie hormonale sur la prostate. Cette procédure peut être associée à la réintroduction de la testostérone ou à la régénération hormonale de la prostate, une méthode puissante pour étudier les lignées de cellules souches dans la prostate. Ensemble, la micro-dissection de la prostate et la castration chirurgicale ouvrent une multitude de possibilités pour une recherche solide et cohérente sur le développement et la maladie de la prostate. Ce manuscrit décrit les protocoles de micro-dissection de la prostate et de castration chirurgicale chez la souris de laboratoire.

Introduction

La prostate est le site le plus commun de cancer chez les hommes aux États-Unis. Près de 220.000 hommes chaque année recevront un diagnostic de cancer de la prostate, et environ 27.000 hommes succomberont à leur maladie ^1. Les hommes ont un risque de 1 sur 7 à vie d'un diagnostic de cancer de la prostate aux États - Unis ^1. Hyperplasie bénigne de la prostate (HBP), un élargissement noncancerous liée à l' âge de la prostate, est également une condition répandue, affectant plus de 80% des hommes de plus de 80 ^2. En tant que tel, la prostate est l'objet de nombreuses recherches.

Des modèles de sou....

Protocole

Ce protocole respecte et suit les lignes directrices établies par la Commission institutionnelle soin et l'utilisation des animaux de l'Université Johns Hopkins.

1. Micro-disséquant un Prostate souris

1. Euthanasier la souris par asphyxie au dioxyde de carbone ou une méthode approuvée de remplacement, conformément aux soins des animaux et de l'utilisation des lignes directrices institutionnelles.
2. Pin de la souris dans une position couchée sur une planche à dissection en mettant une broche à travers chacune des quatre pattes.
3. Vaporiser l'abdomen avec 70% d'éthanol.
4. Tenir la peau du bas-ventre avec une p....

Résultats

Les six lobes de la prostate ont été retirés de la prostate par l' intermédiaire d' une souris microdissection (figure 1). Tractus urogénital intégral (UGT) se compose de tous les lobes de la prostate, la vessie, les vésicules séminales et l'urètre (figure 1a). Le canal déférent se fixe à l'urètre, mais il est inutile de la prostate microdissection, et peuvent ainsi être détachées avant le retrait de l'UGT en coupant l'urètre

Discussion

Prostate microdissection permet une expérimentation précise du lobe et l' analyse de la prostate de la souris (figure 1). Dans les modèles de souris génétiquement modifiées, les phénotypes peuvent être vus dans un lobe qu'on ne voit pas dans d'autres. En outre, pour l'analyse histologique, ce protocole assure que la quantité maximale de tissus de la prostate pur peut être sectionné et coloré, sans autres tissus du tractus uro-génital présentes dans la section. Enfin, pour des expériences.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Outils chirurgicaux	Roboz	Divers
Formaldéhyde	Sigma	F8775
OCT moyen	VWR	25608-930	Doit être placé sur de la glace carbonique pour être congelé et stocké à -80 ° ; C
PBS	Life Technologies	10010
Isoflurane	Johns Hopkins		Également disponible auprès des vendeurs en ligne
Cautery Pen	Medline	ESCT002
Suture en soie	AD Surgical	M-S330R19
Surgical Wound Clips	Roboz	RS-9265