Non-retenue EEG radiotélémétrie est une approche méthodologique précieux pour enregistrer les électroencéphalogrammes in vivo à long terme des rongeurs qui se déplacent librement. Ce protocole détaillé décrit péridurale stéréotaxique et le placement des électrodes intracérébrales profondément dans différentes régions du cerveau afin d'obtenir des enregistrements fiables de CNS rythmicité et des étapes comportementales liées au SNC.
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Article de méthode
Non-retenue EEG télémesure: péridurale et Deep intracérébrale stéréotaxique EEG Placement des électrodes
Dans cet article
Résumé
Résumé
Radiotélémétrie implantable EEG est d'une importance centrale dans la caractérisation neurologique des modèles de souris transgéniques de maladies neuro-psychiatriques et les maladies neurodégénératives ainsi que des épilepsies. Cette technique puissante ne fournit pas seulement des indications précieuses sur les mécanismes physiopathologiques sous - jacents, à savoir., L'étiopathogénie des maladies liées au SNC, il facilite également le développement de nouveaux translationnelle, ie., Approches thérapeutiques. Considérant que des techniques concurrentes qui utilisent des systèmes d'enregistrement utilisés dans des vestes ou des systèmes captifs souffrent de leur retenue à caractère non physiologique semi-retenue, les enregistrements EEG radiotélémétrique surmonter ces inconvénients. Techniquement, implantable radiotélémétrie EEG permet une mesure précise et très sensible, EEGs intracérébrales péridurale et profondes dans diverses conditions physiologiques et physiopathologiques. Tout d'abord, nous présentons un protocole détaillé d'une avant droite, avec succès,technique rapide et efficace pour les enregistrements péridurale (surface) EEG résultant en electrocorticograms de haute qualité. Deuxièmement, nous montrons comment implanter profondes, des électrodes EEG intracérébrale, par exemple, dans l'hippocampe (electrohippocampogram). Pour les deux approches, un système informatisé 3D électrode d'implantation stéréotaxique est utilisée. L'émetteur radiofréquence lui-même est implanté dans une poche sous-cutanée chez les souris et les rats. Une attention particulière doit aussi être accordée à pré-, péri- et traitement post-opératoire des animaux de laboratoire. préparation préopératoire des souris et des rats, l'anesthésie appropriés ainsi que la gestion du traitement et de la douleur post-opératoire sont décrits en détail.
Introduction
Radiotélémétrie est une approche méthodologique plus utile pour mesurer une variété de paramètres comportementaux et physiologiques conscients, des animaux non de tailles différentes, en particulier dans le contexte de l' EEG, ECG, EMG, la pression artérielle, la température corporelle centrale ou des mesures d'activité 1-7. Théoriquement, toutes les espèces peuvent être analysées à l' aide implantable radiotélémétrie EEG des rongeurs de laboratoire tels que les souris et les rats à chats, les chiens, les porcs et les primates 3,8. Même les poissons, les reptiles et les amphibiens font l' objet d' une enquête radiotélémétriqu....
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Protocole
Déclaration éthique: Tout l'expérimentation animale a été réalisée selon les directives du Conseil local et institutionnel de protection des animaux (Université de Bonn, BfArM, LANUV, Allemagne). En outre, toute expérimentation animale a été réalisée conformément à la législation supérieure, par exemple., Communautés européennes Directive du Conseil du 24 Novembre 1986 (86/609 / CEE) ou individuelle législation régionale ou nationale. effort spécifique est fait pour réduire au minimum le nombre d'animaux utilisés et de leur souffrance.
1. animaux d'expérimentation
- Sélection des animaux de laboratoire et des....
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Résultats
Cette section présente des exemples obtenus à partir de la surface et de profondeur, enregistrements EEG intracérébrale. Initialement , il convient de préciser que les enregistrements de base dans des conditions physiologiques sont obligatoires avant les enregistrements ultérieurs suivants , par exemple, le traitement pharmacologique. Ces enregistrements de base peuvent fournir des informations précieuses sur l'interdépendance fonctionnelle du cerveau rythmicité avec différe.......
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Discussion
Implantable radiotélémétrie EEG est d' une importance centrale car elle est une technique non-retenue permettant des animaux de laboratoire pour effectuer leur répertoire complet du comportement 1,3. Ceci est d'un intérêt majeur que l'approche télémétrique permet non seulement des enregistrements EEG spontanée, mais aussi des enregistrements sous tâches cognitives et configurations analytiques circadiens, tels que T-labyrinthe, labyrinthe radial, labyrinthe d'eau, les tâches de privation de so.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Remerciements
Les auteurs tiennent à remercier la Dre Christina Ginkel (Centre allemand pour les maladies neurodégénératives, DZNE), la Dre Michaela Möhring (DZNE) et le Dr Robert Stark (DZNE) pour leur aide dans l’élevage et les soins de santé animale. Ce travail a été soutenu financièrement par l’Institut fédéral des médicaments et des dispositifs médicaux (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM) Bonn, Allemagne.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Carprofène (Rimadyl VET - InjektionA2 :D43slö ; sung) | Pfizer | PZN 0110208 | 20 ml |
| Microscope à grossissement chirurgical binoculaire ; | Zeiss Stemi 2000 | 0000001003877, 435540000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000 | |
| Bulldog serrefine | F.S.T.18051-28 | 28 mm | |
| Cages (Macrolon) | Techniplast | 1264C, 1290D | |
| Source de lumière froide | Schott KL2500 LCD | 9.705 ; 202 | commandés chez Th.Geyer |
| Applicateurs à embout en coton (stériles) | Carl Roth ; | EH12.1 | |
| Dexpanthenole (Bepanthen Wund- und Heilsalbe) | Bayer | PZN : 1578818 | |
| Champs (stériles) | Hartmann | PZN 0366787 | |
| 70 % d’éthanol | Carl Roth ; | 9065.5 | |
| Solution de peroxyde d’hydrogène à 0,3 %/3 % | Sigma | 95321 | Solution mère à 30 % ; |
| Gants (stériles) | Unigloves | 1570 | |
| Dental glas ionomer cement | KentDental /NORDENTA | 957 321 | |
| 2 % glutaraldehyde solution | Sigma | G6257 | |
| Graefe Forceps-courbé, dentelé | F.S.T. | 11052-10 | |
| Halsey Micro Porte-Aiguille-Carbure de Tungstène | F.S.T.12500-12 | 12,5 cm | |
| Stérilisateur d’instruments chirurgicaux à base de chaleur | F.S.T. | 18000-50 | |
| Coussin chauffant | AEG HK5510 | 520010 | commandé chez myToolStore |
| Foret dentaire à grande vitesse | Adeor | SI-1708 | |
| Ciseaux à iris extra fin ; | F.S.T.14058-09 | 9 cm | |
| Système narcotique par inhalation (isoflurane) | Harvard Apparatus GmbH | 34-1352, 10-1340, 34-0422, 34-1041, 34-0401, 34-1067, 72-3044, 34-0426, 34-0387, 34-0415, 69-0230 | |
| Isoflurane | Baxter 250 ml | PZN 6497131 | |
| Kétamine | Pfizer | PZN 07506004 | |
| Lactate Ringer' s solution (stérile) | Braun | L7502 | |
| Lexar-Baby Scissors-droit, 10 cm | F.S.T.14078-10 | 10 cm | |
| Nissl staining solution | Armin Baack | BAA31712159 | |
| Matériau de suture non résorbable 5-0/6-0 (stérile) | SABANA (Sabafil) | N-63123-45 | |
| Covidien (Sofsilk) | S1172, S1173 | ||
| Halsey Porte-aiguille | F.S.T.12001-13 | ||
| Coussinets de 13 cm (stérile) | ReWa Krankenhausbedarf | 2003/01 | |
| 0,9 % de solution saline (NaCl, stérile) | Braun | PZN :8609255 | |
| Lames de scalpel avec manche (stérile) | propraxis | 2029/10 | |
| Pince à motif standard | F.S.T.11000-12 | , 11000-14 | 12 cm et 14,5 cm de longueur |
| Électrodes en acier et tungstène revêtues de parylène ; | FHC Inc., États-Unis) | UEWLGESEANND | |
| Châssis stéréotaxique | Neurostar | 51730M | commandé chez Stoelting |
| (Stereo Drive-New Motorized Stereotaxic) | |||
| Bandes (stériles) | BSN medical GmbH & Co. KG | 626225 | |
| ; | DSI | 270-0042-001X | Transmetteur radiofréquence 3,9 g, ; 3,9 g, 1,9 ml, plage de tension d’entrée ± ; Largeur de bande de canal 2,5 mV, (B) 1 - 200 Hz, ; < fréquence d>'échantillonnage nominale (f) 1 000 Hz (f = 5 B)< >plage de température de fonctionnement 34 - 41 ° 34 - 41 ° ° C autonomie garantie de la batterie 4 mois |
| TL11M2-F20EET ; | DSI | 270-0124-001X | Transmetteur de radiofréquence ; 3,9 g, 1,9 ml, plage de tension d’entrée ± ; Largeur de bande de canal de 1,25 mV, (B) 1 - 50 Hz, ; fréquence d’échantillonnage nominale (f) 250 Hz (f = 5B) plage de température de fonctionnement 34 - 41 ° ; C autonomie garantie 1,5 mois |
| Pince à tissus - 1x2 dents 12 cm | F.S.T.11021-12 | 12 cm de longueur | |
| Ciseaux à iris en carbure de tungstène | F.S.T.14558-11 | 11,5 cm | |
| Vibroslicer 5000 MZ | Microscopie électronique Sciences | 5000-005 | |
| Xylazine (Rompun) | Bayer | PZN : 1320422 |
Références
- Kramer, K., et al. The use of radiotelemetry in small laboratory animals: recent advances. Contemp Top Lab Anim Sci. 40, 8-16 (2001).
- Kramer, K., et al. The use of telemetry to record electrocardiogram and hea....
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Réimpressions et autorisations
