procédures de coupe du cerveau organisés sont nécessaires pour corréler les phénomènes neuropsychiatriques spécifiques avec des diagnostics neuropathologiques définitives. boutures de cerveau sont effectuées différemment selon diverses éventualités clinico-académique. Ce protocole décrit une procédure de coupe du cerveau bihemispheric symétrique pour étudier les différences hémisphériques dans les pathologies du cerveau humain et de maximiser les techniques biomoléculaire / neuroimagerie actuelles et futures.
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Article de méthode
Symmetric Bihemispheric Postmortem cerveau de coupe pour étudier en santé et états pathologiques du cerveau chez les humains
Dans cet article
Résumé
Résumé
Neuropathologistes, parfois, se sentent intimidés par la quantité de connaissances nécessaires pour produire des diagnostics définitifs des phénomènes neuropsychiatriques complexes décrits chez les patients pour lesquels une autopsie du cerveau a été demandée. Bien que les progrès des sciences biomédicales et neuroimagerie ont révolutionné le domaine neuropsychiatrique, ils ont également généré l'idée trompeuse que les autopsies du cerveau ont seulement une valeur de confirmation. Cette idée fausse a créé une réduction drastique des taux d'autopsie et, par conséquent, une possibilité réduite d'effectuer des enquêtes neuropathologiques plus détaillées et approfondies, qui sont nécessaires pour comprendre de nombreux aspects normaux et pathologiques encore inconnus du cerveau humain. La méthode déductive traditionnelle de corrélation entre les phénomènes neuropsychiatriques observés et correspondant localisation / caractérisation de leurs corrélats neurohistologiques possibles continue d'avoir une valeur indéniable. Dans le contexte de neuropsychimaladies triques, la méthode clinicopathologique traditionnelle est toujours la meilleure méthodologie possible (et souvent le seul disponible) pour relier les caractéristiques neuropsychiatriques uniques à leurs substrats neuropathologiques correspondants, puisqu'il repose précisément sur l'évaluation physique directe des tissus du cerveau. L'évaluation des cerveaux post mortem est basée sur le cerveau des procédures qui varient entre les différents centres de neuropathologie de coupe. boutures de cerveau sont effectuées d'une manière relativement extensive et systématique sur la base des diverses éventualités cliniques et universitaires présents dans chaque établissement. Une méthodologie de coupe du cerveau bi-hémisphérique plus anatomiquement inclusive et symétrique devrait au moins être utilisé à des fins de recherche en neuropathologie humaine pour étudier de manière cohérente, en profondeur, des conditions normales et pathologiques avec les particularités du cerveau humain (c. -à- spécialisation hémisphérique et latéralisation pour particulier les fonctions). Une telle méthode offrirait une colle plus complètection des cerveaux neuropathologique bien caractérisés disponibles pour les techniques de la biotechnologie et de neuroimagerie actuels et futurs. Nous décrivons une procédure de coupe du cerveau bi-hémisphérique symétrique pour l'étude des différences hémisphériques dans les pathologies du cerveau humain et pour une utilisation avec le courant, ainsi que les futures techniques biomoléculaire / neuroimagerie.
Introduction
Neuropathologistes ont le privilège scientifique, l'honneur intellectuelle, et l'obligation de diagnostic pour évaluer les cerveaux humains. Pendant de nombreuses décennies, les descriptions cliniques détaillées des maladies du cerveau et des efforts importants pour individualisent leurs corrélats neurohistologiques possibles dans le cerveau post-mortem humains ont été entreprises. Historiquement, ces efforts représentent la modalité la plus productive par lequel les sciences médicales et la neurologie, en particulier, ont progressé dans l'ère moderne. Merci à neuropathologistes précédents éminents et leur dévouement, la détermination, la bourse, et étonn....
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Protocole
Les procédures impliquant des tissus humains post-mortem ont été examinés par le comité d'examen institutionnel et exemptés en vertu de 45 CFR (Code of Federal Regulations).
NOTE: Le protocole décrit une procédure de coupe du cerveau bihemispheric symétrique pour l'évaluation du cerveau post-mortem finalisé pour les études neuropathologiques chez les humains. Des descriptions détaillées des appareils, instruments, matériaux et fournitures nécessaires pour effectuer la coupe du cerveau humain seront exclus. Matériaux et fournitures pour dissections du cerveau sont sélectionnés à la discrétion du chercheur unique et sont basés sur les outils d'autopsie autorisés ou appr....
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Résultats
Protocole Longueur
Le temps passé pour une procédure de coupe unique symétrique bihemispheric fixe du cerveau est estimé à 1 h (hors temps passé la mise en place de la table de dissection, des outils et surfaces de coupe; étiquetage;. Etc). Le temps nécessaire à une seule alternance bi-hémisphérique symétrique gelé et le cerveau fixe la procédure de coupe est estimée à 2 h. Il peut prendre au moins entre 4-6 semaines pou.......
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Discussion
Cette méthode de cerveau de coupe peut être adaptée aux besoins spécifiques de chaque laboratoire de neuropathologie (par exemple, en réduisant le nombre de régions cérébrales pour évaluer pour chaque hémisphère), tout en conservant la procédure de coupe symétrique bihemispheric comme l'une de ses principales caractéristiques. Ce protocole proposé pourrait être utilisé pour des procédures de routine (centres neuropathologiques orientés vers la recherche) ou seulement lorsque cela est nécessaire (études spécifiques a.......
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Déclarations de divulgation
Les auteurs n'ont rien à dévoiler.
Remerciements
Nous remercions les milliers de donneurs de cerveau, de patients, de familles et de neuroscientifiques du monde entier qui, au cours des deux derniers siècles et grâce à leurs dons généreux et à leurs efforts intellectuels, ont contribué à découvrir le fonctionnement du cerveau humain, à comprendre les maladies cérébrales dévastatrices et à développer des traitements à ces sujets. Nous remercions tout particulièrement Mme Cecilia V. Feltis pour l’édition et la révision de ce manuscrit.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Copie du consentement éclairé signé permettant l’autopsie et le don de cerveau à des fins de recherche. | |||
| Antécédents cliniques détaillés du sujet, y compris une description détaillée de tout symptôme et signe neurologique et psychiatrique. | |||
| Enregistrements vidéo médicaux ou non médicaux lorsqu’ils sont disponibles (particulièrement utiles dans le domaine des troubles du mouvement). Plus proche parent' consentement requis. | |||
| Échelles de neuroimagerie, de neurophysiologie, de neuropsychiatrie et d’évaluation ou clinicométriques. | |||
| Données génétiques et d’histoire familiale. Les rapports génétiques examinent si des maladies neurogénétiques ont été diagnostiquées. | |||
| Conteneur d’histologie | ELECTRONON MICROSCOPY SCIENCES | 64233-24 | |
| Cassettes d’histologie | VWR | 18000-142 (orange) | |
| Cassettes d’histologie | VWR | 18000-132 (marine) | |
| Manches de couteaux et lames jetables | ELECTRONOLOGICAL MICROSCOPY SCIENCES | 62560-04 | |
| Lames longues | MICROSCOPIE ELECTRIQUE SCIENCES | 62561-20 | |
| Lames jetables Manches de couteau | ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES | 72040-08 | |
| Lames de scalpel | ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES | 72049-22 | |
| Accu-Punch 2 mm | ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES | 69038-02 ; | |
| Contenants en polystyrène &ndash ; | Stérile ELECTRONIUM MICROSCOPY | SCIENCES 64240-12 | |
| Carte de dissection | ELECTRON MICROSCOPY SCIENCES | 63307-30 | |
| Solution de formol, tamponnée neutre, 10 % | Sigma-Aldrich | HT501128 SIGMA | |
| solution d’hématoxyline, Gill No. 2 | Sigma-Aldrich | GHS280 ; SIGMA | |
| Eosin Y solution, aqueuse | Sigma-Aldrich | HT1102128 ; SIGMA | |
| anti-bêta-amyloïde | Covance, Princeton, NJ | SIG-39220 | 1:500 |
| anti-tau | Thermo Fisher Scientific | MN1020 | 1:500 |
| anti-alpha-synucléine | Abcam | ab27766 | 1:500 |
| anti-phospho-TDP43 | Cosmo Bio Co. | TIP-PTD-P02 | 1:2000 |
| à n’importe quelle | |||
| tête ; | Grainger | 5ZZ35 |
Références
- Braun, B., Stadlober-Degwerth, M., Hajak, G., Klunemann, H. H. 100th anniversary of Perusini's second case: patient RM and his kindred. Am. J. Alzheimers Dis. Other Demen. 25, 189-192 (2010).
- Jellinger, K. A. Neuropathology of sporadic ....
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