Method Article

Reliable Méthode d'évaluation de la germination des graines, dormance, et la mortalité sous conditions de terrain

DOI:

10.3791/54663

November 6th, 2016

In This Article

Summary

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Nous présentons ici un protocole d'évaluation de la survie des semences, la germination et la dormance dans des conditions de terrain à l'aide enfouis, des bandes de semences étiquetées et chlorure de tétrazolium (TZ) les tests de viabilité.

Abstract

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Nous décrivons des techniques pour approximer la dynamique des banques de graines au fil du temps en utilisant Helianthus annuus comme exemple d’espèce d’étude. Des bandes de tissu en polyester perméable et de colle peuvent être pliées et collées pour construire une bande de compartiments qui abritent les graines et les informations d’identification, tout en permettant le contact avec le lixiviat du sol, l’eau, les micro-organismes et la température ambiante. Les bandes peuvent être construites avec une large gamme de nombres et de tailles de compartiments et permettent au chercheur d’héberger une variété de génotypes au sein d’une même espèce, de différentes espèces ou de graines qui ont subi différents traitements. Contrairement aux sachets de graines individuels, les bandes sont plus facilement récupérées en tant qu’unité. Bien que des paquets répliqués puissent être inclus dans une bandelette, différentes bandes peuvent agir comme des blocs ou être récupérées à différents moments pour observer le comportement des graines au fil du temps. Nous avons utilisé un pistolet à colle à haute température pour délimiter les compartiments et scellé les bandes une fois que la graine et les étiquettes identifiant le bloc et les temps de retrait ont été insérés. Les bandes de semences ont ensuite été enterrées dans le champ à la profondeur souhaitée, l’emplacement étant indiqué pour un enlèvement ultérieur. Les prédateurs d’animaux fouisseurs ont été efficacement exclus à l’aide d’une couche de tissu métallique à la surface du sol. Après l’intervalle de temps choisi pour l’enterrement, les bandes ont été déterrées et les graines ont été évaluées pour la germination, la dormance et la mortalité. Bien qu’il soit évident que les graines mortes peuvent souvent être distinguées des graines vivantes non germées à l’œil nu, les graines dormantes ont été identifiées de manière concluante à l’aide d’un test colorimétrique standard au chlorure de tétrazolium pour vérifier la viabilité des graines.

Introduction

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L'objectif global de cette méthode est d'évaluer de façon fiable la survie des graines au fil du temps dans des conditions de terrain.

Les banques de semences du sol sont une réserve de graines dispersées, encore non germés viables distribués soit sur la surface du sol, dans la litière de surface, ou dans le profil du sol, qui peuvent persister ou transitoirement pendant de nombreuses années 1,2. Lorsque inhumation des méthodes similaires à celles présentées ici de semences ont été appliqués à une étude de 17 ans en utilisant plusieurs dizaines d' espèces, des graines viables ont été trouvées dans la plupart des esp....

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Protocol

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1. Recueillir des semences à partir des espèces multiples ou croisements contrôlés d'une espèce unique

Note: Cet exemple semences utilisées à partir de 15 types croisées au sein du annuus Helianthus des espèces (de tournesol) en utilisant sauvage, hybride, et les types de cultures que la maternelle (productrice de semences) parent.

  1. À la fin de la saison de croissance, de recueillir des têtes de graines matures dans des sacs étiquetés. Nettoyer les graines de la balle et la place des semences dans des enveloppes étiquetées avec des parents de type croix en format standard (ie, x maternelle paternelle).
  2. graines en vrac ain....

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Results

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Types Croix avec variés maternelle pourcentage filiation et culture allèle (tableau 1) différaient entre les dates de retrait en pour cent germée, non germés, et les semences mortes (Fig. 2 et 3). L' utilisation de tests de TZ de graines non germées, nous avons trouvé quelques graines vraiment dormantes au deuxième retrait (début du printemps) (tableau 2), alors que toutes les graines non germées par le troisième retrait.......

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Discussion

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Nous présentons ici des méthodes d'utilisation des bandes d'enfouissement des semences pour observer la germination des graines, la dormance et la mortalité des stocks de semences diverses à des périodes de temps prédéterminés dans le domaine. Les avantages de l'utilisation des bandes plutôt que des paquets individuels se trouvent dans (1) la vitesse de la bande et la construction du compartiment sur la création de paquets individuels; et (2) la facilité et la rapidité d'élimination des compartiments mul.......

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Disclosures

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Acknowledgements

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Ce travail a été soutenu par le grand concours du programme de subventions pour l’évaluation des risques en biotechnologie n° 2006-39454-17438 à A. Snow, K. Mercer et H. Alexander du National Institute of Food and Agriculture du ministère de l’Agriculture des États-Unis. Des expériences utilisant cette méthode ont été menées et soutenues par la station de terrain de l’Université du Kansas, une unité de recherche du Kansas Biological Survey et l’Université du Kansas. Les auteurs tiennent à remercier P. Jourdan et E. Regnier pour les critiques utiles sur les versions antérieures de ce manuscrit. De plus, ce travail a été facilité par les contributions du personnel de la....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Enveloppes pour petites pièces de monnaieN’importe Enveloppes
pour pièces de monnaie Enveloppes pour pièces de monnaie Enveloppes pour pièces de monnaie de grande tailleN’importe quelle
moustiquaire en polyester à mailles fines N’importequel
pistolet
quel
permanent industrielN’importe quel
étiquettes de jardin en plastiqueN’importe quelles
ciseauxN’importe quelle
pelleN’importe quel
tissu dur en maille métalliqueN’importe quel
drapeau d’arpenteur, plusieurs couleurs N’importeQuel
journal humideN’importe Quelle
glacièreN’importe
Papier buvardN’importe quelle
boîte de PétriN’importe quelle
chambre de croissance à température contrôléeToute
lame de rasoirN’importe quelle
boîte de PétriN’importe quel
chlorure de tétrazoliumN’importe quelle
chaleur incubateurN’importe quel
à colle à haute température N’importe marqueur eau N’importe quelle

References

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  1. Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns. Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).
  2. Alexander, H. A., Schrag, A. M.

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Tags

Seed GerminationSeed DormancySeed MortalityField ConditionsTetrazolium ChlorideSeed ViabilitySeed Bank DynamicsHelianthus AnnuusSeed Strip MethodBurial Trials

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